"KP4 Thawing人胰腺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
KP4 Thawing人胰腺癌细胞系
细胞生长:贴壁
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
KP4 Thawing人胰腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞冻存知识普及:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
细胞形态特性:详见细胞说明书
Tb 1 Lu (NBL-12)细胞系相关产品:VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞
HCC-202细胞系相关产品:RT4细胞、NB1-RGB细胞、ND7/23细胞
A9(Hamprecht)细胞系相关产品:SCC-15细胞、HCC-1359细胞、PC-14细胞
TF-1细胞系相关产品:Chang liver细胞、Alexander cells细胞、hTERT RPE1细胞
Th17细胞系相关产品:MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞
PECAPJ34细胞系相关产品:BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
Wistar Institute-38细胞系相关产品:PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
Pa17C细胞系相关产品:H-345细胞、2B4-L细胞、HT 1197.T细胞
WPMY-1细胞系相关产品:8226细胞、K7M2-WT细胞、VM Cub 1细胞
Hs-606-T细胞系相关产品:SKES1细胞、NCIH1838细胞、LP-1细胞
DoTc2 4510细胞系相关产品:COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
EFM19细胞系相关产品:HCC78细胞、MC3T3细胞、SKRC-52细胞
1E8-H细胞系相关产品:RPMI 7666细胞、RBSMC细胞、LNCaP细胞
LC1-Sq细胞系相关产品:SCI1细胞、NBL-2细胞、Pa17C细胞
MC-4细胞系相关产品:SUIT2细胞、Mel526细胞、CTSC-3细胞
MT-4细胞系相关产品:HPAC细胞、MDA415细胞、HCoEpiC细胞
OE33细胞系相关产品:HPMC细胞、Ramos 2G6 4C10细胞、SK Hep1细胞
2BS细胞系相关产品:alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞
SUDHL-6细胞系相关产品:MCF-10 Attached细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、RGC-5细胞
U-hth74细胞系相关产品:MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
HT115细胞系相关产品:OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞
HT115细胞系相关产品:OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞
H-2066细胞系相关产品:OVCA433_Bast细胞、RKO-AS-45-1细胞、Panc 02细胞
MDA MB 175 VII细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞、H-1623细胞、TO 175.T细胞
SMA560细胞系相关产品:Kit 225 K6细胞、CEM/0细胞、PECAPJ34细胞
NOR-10细胞系相关产品:ROS-17/2.8细胞、H146细胞、SKNFI细胞
KP4 Thawing人胰腺癌细胞系
HOP-62细胞系相关产品:LK2细胞、HUTU80细胞、T24细胞
451Lu细胞系相关产品:NS1-1 Ag4.1细胞、RPMI No. 1846细胞、HCa/16A3-F细胞
NCI-H661细胞系相关产品:MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
TOG细胞系相关产品:Human Epidermoid carcinoma #2细胞、H441细胞、CCRF-SB细胞
Caco2BBe细胞系相关产品:Tn-5B1-4细胞、OVCAR4细胞、LS174T细胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞系相关产品:UACC 893细胞、JVM2细胞、LS-411N细胞
NCIH2172细胞系相关产品:MCA-205细胞、KY-50细胞、HBMEC细胞
MDCK II细胞系相关产品:SC1细胞、G-292细胞、130 T细胞
HDLM2细胞系相关产品:HT-115细胞、HIC细胞、Duke University 4475细胞
MDCC MSB1细胞系相关产品:MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞
SNU668细胞系相关产品:Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
MC3T3-L1细胞系相关产品:C-Li-7细胞、BV2细胞、MES-SA-Dx5细胞
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品:NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞
NBL-S细胞系相关产品:CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
ML2细胞系相关产品:HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞
Clone Y1细胞系相关产品:COR-L23/P细胞、RPE1-hTERT细胞、H1876细胞
Hs 746.T细胞系相关产品:SK_N_BE2C细胞、U87 MG细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞
Loucy细胞系相关产品:Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
CaEs17细胞系相关产品:X63Ag8-653细胞、SU-DHL-4细胞、B16/BL6细胞
H1963细胞系相关产品:SK Col 1细胞、GA-10 clone 4细胞、MCF-7/ADR细胞
Human Embryonic Skin细胞系相关产品:BeWo细胞、UMUC3细胞、SUDHL1细胞
NCI-128细胞系相关产品:SL1细胞、SW 48细胞、NCIH1651细胞
SNU-620细胞系相关产品:DoHH2细胞、NPC-TW01细胞、NCIH1435细胞
Hep3B细胞系相关产品:P3J-HR-1细胞、OCI-AML3细胞、IPI-2I细胞
NCI-H1781细胞系相关产品:253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
PA-1细胞系相关产品:Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
PLA-801C细胞系相关产品:FHL124细胞、BTT739细胞、PC-3细胞
SKLU-1细胞系相关产品:SK-Mel1细胞、WEHI 3细胞、D283-MED细胞
U-118MG细胞系相关产品:PK-15细胞、293EBNA细胞、HPDEC细胞
Namalwa细胞系相关产品:A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞
H1650细胞系相关产品:H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞
A2780CP细胞系相关产品:SNK6细胞、HRIF细胞、H508细胞
KP4 Thawing人胰腺癌细胞系
Huh 7.5细胞系相关产品:MiaPaCa2细胞、Lewis Lung Cancer细胞、SUM 190细胞
LC-MS细胞系相关产品:NCIH1963细胞、SNU601细胞、NCI-H2170细胞
DC2.4细胞系相关产品:Psi-2-DAP细胞、PK136细胞、HNSC细胞
YES2细胞系相关产品:MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞
HAC-84细胞系相关产品:Panc-3_27细胞、KNS62细胞、Hs-729-T细胞
MCF7-CTRL细胞系相关产品:SK HEP-1细胞、RS411细胞、Caco-2细胞
HEC1A细胞系相关产品:NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
EFM-192A细胞系相关产品:H524细胞、Anip 973细胞、Mv1Lu细胞
NCIH510细胞系相关产品:N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞
H-7721细胞系相关产品:TSU-Pr1细胞、TGBC-11-TKB细胞、HEp-2细胞
Y3-Ag1,2,3细胞系相关产品:HO-8910细胞、CD18/HPAF细胞、LLC-MK2细胞
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