"HuP-T3 Thawing人胰腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
HuP-T3 Thawing人胰腺癌细胞系
细胞生长：贴壁
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HuP-T3 Thawing人胰腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近３００株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco２其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法５min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态特性：详见细胞说明书
NCIH1623细胞系相关产品：MRC5细胞、PLA801-95D细胞、HRA19细胞
NCI-H1672细胞系相关产品：BL2141细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞、OVCA432_Bast细胞
HCC0044细胞系相关产品：C-4 I细胞、Hs 852.T细胞、VERO76细胞
UMRC2细胞系相关产品：32D/cl3细胞、Malme3M细胞、HBZY-1细胞
GA10细胞系相关产品：H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
Panc05.04细胞系相关产品：HCPEpiC细胞、SW.620细胞、AtT20细胞
EOC-20细胞系相关产品：SU-DHL-10细胞、KYSE-30细胞、MTC-TT细胞
aNK细胞系相关产品：OVCA8细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞、NALM-6-M1细胞
5637细胞系相关产品：2T细胞、H292细胞、SUP T1细胞
RPPVEC细胞系相关产品：H209细胞、HCT FET细胞、UACC893细胞
UC-3细胞系相关产品：HCFB（HCF）细胞、NCIH650细胞、DH-82细胞
Ly7细胞系相关产品：CBRH-7919细胞、H-748细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453细胞
L-540细胞系相关产品：FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞
MDA PCa 2b细胞系相关产品：COLO357细胞、NCI-H78细胞、HCT/FU细胞
Hs-578Bst细胞系相关产品：MN 60细胞、JTC-39细胞、MLA-144细胞
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品：PANC-04-03细胞、CEMC1细胞、SUM 159PT细胞
ML-2细胞系相关产品：CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
L- cell细胞系相关产品：UMR 106细胞、32D CL3细胞、SK MEL-28细胞
SCC VII细胞系相关产品：AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
HME-1细胞系相关产品：ACT-1细胞、GM02219C细胞、MIHA细胞
RPE D407细胞系相关产品：WM115F细胞、MGHU3细胞、SW-480细胞
RPE D407细胞系相关产品：WM115F细胞、MGHU3细胞、SW-480细胞
BGC823细胞系相关产品：KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞
MDA 231-LM2-4175细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、Ca761细胞、H719细胞
NCIH1838细胞系相关产品：High Five细胞、A-20细胞、RMS 1598细胞
NBL_S细胞系相关产品：KCL22细胞、HEK.EBNA细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞
HuP-T3 Thawing人胰腺癌细胞系
NKM-1细胞系相关产品：ZYM-SVEC01细胞、SCL-1细胞、Roswell Park Memorial Institute 1788细胞
ssMCF-7细胞系相关产品：NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞系相关产品：RPMI8402细胞、NIH3T3细胞、C 643细胞
BTI-Tn5B14细胞系相关产品：Hs 281.T细胞、CNE2细胞、LNCaP-ATCC细胞
NIH 3T6细胞系相关产品：CP70细胞、H1373细胞、SKNBE(2c)细胞
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞系相关产品：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
B-104细胞系相关产品：COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
SKNBE2C细胞系相关产品：C17细胞、ECV细胞、JiyoyeP-2003细胞
NCI-H1688细胞系相关产品：MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞
SW-1783细胞系相关产品：FRhK4细胞、CHOK1细胞、U14细胞
RT112细胞系相关产品：RS4;11细胞、P 815细胞、HaCaT细胞
SN-12C细胞系相关产品：BRL 3A细胞、KM.12细胞、MCF7细胞
BC-024细胞系相关产品：MGH-UI细胞、SUM 159细胞、MV-1-Lu细胞
H-1623细胞系相关产品：HOP-92细胞、Caki-2细胞、MFM-223细胞
FDC-P1细胞系相关产品：CMT-93细胞、NCTC clone 929细胞、COLO 829细胞
SF-763细胞系相关产品：CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
P815细胞系相关产品：SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞
HCC94细胞系相关产品：HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
Sp2/0-Ag-14细胞系相关产品：H1404细胞、SW 1463细胞、MCAEC细胞
EB-2细胞系相关产品：Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
H2110细胞系相关产品：COV504细胞、HEK-AD 293细胞、CCD18Co细胞
HMEC-1细胞系相关产品：LICCF细胞、5637细胞、APRE-19细胞
Colo-678细胞系相关产品：SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞
Colon-38细胞系相关产品：CEM/0细胞、786-0WT细胞、LTEP-s细胞
JM细胞系相关产品：NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
Detroit 562细胞系相关产品：SUDHL6细胞、PaTu 8988s细胞、Hs746T细胞
SUM 149PT细胞系相关产品：3-LL细胞、SHEE细胞、PE CA PJ34细胞
HCC-1143细胞系相关产品：University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、VMCUB-1细胞、M-07e细胞
J 774A.1细胞系相关产品：Panc4.03细胞、SKCol1细胞、KBM-5细胞
MUGCHOR1细胞系相关产品：no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
HuH7细胞系相关产品：CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞
HuP-T3 Thawing人胰腺癌细胞系
COLO 320 HSR细胞系相关产品：DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞
HCC-1599细胞系相关产品：B/C3T3细胞、HBEpiC细胞、Human ErythroLeukemia细胞
MIN6细胞系相关产品：NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
H345细胞系相关产品：NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
TCMK-1细胞系相关产品：L-02细胞、LM1细胞、NCIH28细胞
SUM102细胞系相关产品：CPAE细胞、GS9L细胞、H2.35细胞
CHO细胞系相关产品：MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
IMR90细胞系相关产品：Natural Killer-92细胞、Line 522细胞、COLO684细胞
MC3T3-E1细胞系相关产品：NCIH2228细胞、RAW-264.7细胞、Hs 729T细胞
OCI-AML4细胞系相关产品：HCC-94细胞、F36P细胞、Colo320细胞
SCC VII细胞系相关产品：AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
"
