"NCI-H748 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
NCI-H748 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长:贴壁
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:3-4天换液1次。
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H748 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
细胞形态特性:详见细胞说明书
KMBC细胞系相关产品:MKN-28细胞、TE 85 ClF-5细胞、Neukoplast细胞
HCT/Taxo1细胞系相关产品:NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
T-47D细胞系相关产品:149 PT细胞、HT115细胞、BCaP-37细胞
SHG-44细胞系相关产品:H4细胞、A253细胞、SF295细胞
LLC-WRC 256细胞系相关产品:HuNS1细胞、HEEpiC细胞、MHCC-LM3细胞
K 562细胞系相关产品:Walker/LLC-WRC 256细胞、RPMI2650细胞、H-1568细胞
MES-23.5细胞系相关产品:P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞
TE4细胞系相关产品:RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
CCD-1095Sk细胞系相关产品:SCC 9细胞、hFOB 1.19细胞、HCO细胞
HPF细胞系相关产品:2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
P3X63Ag8细胞系相关产品:HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
NCI H716细胞系相关产品:OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞
Hs 636 T细胞系相关产品:SNG-M细胞、Hs.27细胞、A-101D细胞
DMS114细胞系相关产品:LL/2细胞、Nb 2细胞、HCC-9204细胞
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、SUDHL10细胞、H1238细胞
NCI-SNU-668细胞系相关产品:B16-BL6细胞、NKT细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞
143BTK-细胞系相关产品:H9细胞、NCIH1770细胞、HCEC细胞
SMA 560细胞系相关产品:HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
NCIH2286细胞系相关产品:IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞
C2BBe1细胞系相关产品:PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
C3H/10T1/2-clone8细胞系相关产品:MSF细胞、SW-962细胞、NSC-34细胞
SK-NEP-1细胞系相关产品:SCL II细胞、Dunn LM8细胞、COLO-829细胞
Huh-7细胞系相关产品:MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
TE 32细胞系相关产品:Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞
MADB-106细胞系相关产品:MNNG/HOS Clone F-5细胞、MUTZ-1细胞、Caov-3细胞
NCI-H748 Thawing人小细胞肺癌细胞系
ARPE-19细胞系相关产品:CoCL3细胞、TMK-1细胞、MDA 1386细胞
PANC-03-27细胞系相关产品:hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞
HuH7细胞系相关产品:CAL-120细胞、MeT 5A细胞、M 1细胞
Panc02-H0细胞系相关产品:PANC-08-13细胞、Y-1细胞、VA-ES-BJ细胞
Det. 562细胞系相关产品:H19-7细胞、SNU620细胞、MES 13细胞
LAN5细胞系相关产品:SW 1463细胞、293GP细胞、H295细胞
HNE2细胞系相关产品:SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
FLC7细胞系相关产品:GM00346B细胞、OVCAR8细胞、Nb2细胞
74Int细胞系相关产品:RT-BM细胞、H-1581细胞、H6c7细胞
CCRF SB细胞系相关产品:H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞
MLA 144细胞系相关产品:ATDC-5细胞、CAL 51细胞、NCI-H1650细胞
EL-4细胞系相关产品:NHDF细胞、16HBE14o-细胞、MHCC-97细胞
LOUNH91细胞系相关产品:CCD-112 CoN细胞、HSC-T6细胞、Vx-2细胞
Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品:SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
2PK3细胞系相关产品:NIH 3T6细胞、Lewis-Lung细胞、NTERA2D1细胞
NIH3T3细胞系相关产品:MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
UCLA SO M21细胞系相关产品:MAVER-1细胞、Mono Mac 6细胞、SF-295细胞
BA/F3细胞系相关产品:DSL-6A-C1细胞、HEP-3B2细胞、MDA-MB468细胞
CD-18细胞系相关产品:B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
Centre Antoine Lacassagne-33细胞系相关产品:Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞
D562细胞系相关产品:MIA-PaCa-2细胞、HFT8810细胞、SHSY5Y细胞
NS1细胞系相关产品:H-889细胞、OVCAR-5细胞、AN3细胞
WEHI164细胞系相关产品:RMS 13细胞、BL2141细胞、HCC0202细胞
SO-Rb 50细胞系相关产品:293/EBNA细胞、H-1385细胞、RASMC细胞
Pan02细胞系相关产品:OVCAR.5细胞、JTC-28细胞、EHEB细胞
LC-2 ad细胞系相关产品:C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
NCIH2030细胞系相关产品:DoHH-2细胞、RH-30细胞、GP2-293细胞
B16 F10细胞系相关产品:A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
3T3-F442A细胞系相关产品:rRTEC细胞、SK-LU-1细胞、Panc 05.04细胞
NCI-HUT-69细胞系相关产品:SKUT1细胞、Karpas 299细胞、H596细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞系相关产品:52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
NCI-SNU-387细胞系相关产品:Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
L-363细胞系相关产品:H2342细胞、MCF-7细胞、SK ES 01细胞
NCI-H748 Thawing人小细胞肺癌细胞系
CORL23细胞系相关产品:DoTc2细胞、Madin Darby Bovine Kidney细胞、RF/6A细胞
HeLa-229细胞系相关产品:HEK 293T/17细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞、SP2/0 Ag-14细胞
AMC-HN8细胞系相关产品:Hs746T细胞、LTEP-a-2细胞、PC3M细胞
NTERA-2 cl.D1细胞系相关产品:GM02219细胞、HMC3细胞、B16/F1细胞
H-2330细胞系相关产品:Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
OCIAML3细胞系相关产品:BetaTC6细胞、GM2132细胞、HS-5细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
WI 38细胞系相关产品:GM-346细胞、MOLT-4细胞、Okayama University Medical School-27细胞
H28细胞系相关产品:H1618细胞、HOK细胞、V79-GalK1细胞
FL 62891细胞系相关产品:HL60细胞、NCI-SNU-216细胞、KPL-1细胞
RBMEC细胞系相关产品:mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞
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