"NCI-H1694 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
NCI-H1694 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:3-4天换液1次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H1694 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
细胞形态特性:聚团悬浮
ATN1细胞系相关产品:NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞系相关产品:Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、201T细胞、Hs695T细胞
VMRC-RCZ细胞系相关产品:SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
H1954细胞系相关产品:Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
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C22细胞系相关产品:OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
H2107细胞系相关产品:38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞
NCI-H1770细胞系相关产品:SKGIIIA细胞、HuH28细胞、TK.10细胞
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Caov-3细胞系相关产品:BLO 11细胞、LUDLU 1细胞、SUM-52细胞
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SNU-739细胞系相关产品:A-498细胞、Hs 888.Lu细胞、639V细胞
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COLO680N细胞系相关产品:CCC-HSF-1细胞、SNU182细胞、LS411N细胞
Panc-10.05细胞系相关产品:OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
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CL 1-0细胞系相关产品:HFT-8810细胞、U373-MG细胞、NCI-H292细胞
NCI-H1694 Thawing人小细胞肺癌细胞系
COLO 824细胞系相关产品:KY-270细胞、NP-69细胞、HEK293-EBNA细胞
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ZR7530细胞系相关产品:Caco2-BBE细胞、293-F细胞、H-1092细胞
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KYSE-410细胞系相关产品:TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞系相关产品:Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞
T-24细胞系相关产品:SK-ML2细胞、Walker 256细胞、BL-6细胞
HBL100细胞系相关产品:PLB985细胞、Mel RM细胞、SU-DHL-10细胞
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C3H10T1/2 clone8细胞系相关产品:COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
SUM 52PE细胞系相关产品:OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
OCI/AML-4细胞系相关产品:IGR.OV1细胞、PTK 2细胞、COLO 16细胞
GS9L细胞系相关产品:Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞
PC3-M细胞系相关产品:Hs 611.T细胞、H-647细胞、HO-8910细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
GM03569细胞系相关产品:UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
Panc08.13细胞系相关产品:PC-3M-1E8细胞、MEL-526细胞、NIH3T3-L1细胞
SNU668细胞系相关产品:Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品:SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
SNU-251细胞系相关产品:NSC-34细胞、751-NA-15细胞、CPA 47细胞
NCI-H1694 Thawing人小细胞肺癌细胞系
MXI细胞系相关产品:Earles's cells细胞、HET-1A细胞、HepG2-luc细胞
High5细胞系相关产品:C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞
Hs895T细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、SK-N-AS细胞、MOLP2细胞
LAC细胞系相关产品:SGC 7901细胞、CFSC-8B细胞、Panc 5.04细胞
OCI AML5细胞系相关产品:H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞
MADB106细胞系相关产品:JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞
HCC0038细胞系相关产品:U-373MG细胞、Hs688(A)T细胞、J-774细胞
D407细胞系相关产品:NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞系相关产品:H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
M-20细胞系相关产品:HCCC9810细胞、CAL148细胞、MUVEC细胞
SK-RC-39细胞系相关产品:PE/CA-PJ34细胞、BT.549细胞、COR-L51细胞
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