"NCI-H2029 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
NCI-H2029 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长:贴壁
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法:在解冻冻存细胞时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题,究竟是什么原因导致,我们该怎么进行解决?以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题,总结的一些解决方案!出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下:1)解冻过程中细胞裂解,推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,考虑到这一损失。起始浓度为1*10(6)至1*10(7)细胞/毫升;2)解冻过程中的问题,推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养;3)对冷冻液过敏,推荐的解决方案:A.完全或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期;4)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄,推荐的解决方案:解冻最近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3-1:5传代;
细胞培养时分布不均匀,通常操作步骤:做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。96孔板一般以100微升每孔接种,直接用100微升移液器吸取细胞悬液,沿孔壁(稍离开一点孔底即可,不要离底太高)直接接入,移液器不需完全打到,轻轻按下即可,每铺完一行换一次枪头同时轻轻混匀细胞悬液。都加完后盖上盖子,左手轻轻扶住板的左边,右手轻轻敲击板的右边缘,注意把握力度(我一般轻巧敲三下),太强或次数太多会导致细胞集中成堆,将板顺时针旋转(逆时针效果不好),依次敲击剩余三个边,静置约5分钟,放入37度培养箱。6孔板、12孔板或24孔板,可采用将每个孔加入少量无血清培养基,晃动浸润整个孔底,然后用移液枪吸至第二孔,同样方法浸润孔底,其它孔依此类推,这样整个孔底都是湿润的,细胞悬液会平铺在整个孔底,注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢,但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式,但力度没有96孔板好掌握,效果没有96孔板好。培养瓶里面加好细胞以后(比如传代好/分好细胞以后),先顺时针摇晃3次,马上逆时针摇晃3次。然后延X轴Y轴分别水平摇动3次。放入CO2培养箱后,平放着培养瓶重复延X轴Y轴分别水平摇动3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H2029 Thawing人小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性:详见细胞说明书
GM3570细胞系相关产品:HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞
Sci-1细胞系相关产品:Anip-973细胞、EC-9706细胞、ECC 10细胞
A.704细胞系相关产品:HEK293-EBNA细胞、16HBE140细胞、HSC-2细胞
HCT/FU细胞系相关产品:Hs 27细胞、Panc-1-P细胞、HUVSMC细胞
LLC PK1细胞系相关产品:U20S细胞、LTEP-s细胞、JTC-28细胞
HEK 293细胞系相关产品:WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
PT67细胞系相关产品:CWR22Rv1细胞、OCILY3细胞、CCD841CoN细胞
HKBML细胞系相关产品:HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞
RT4-D6P2T细胞系相关产品:Jiyoye(P-2003)细胞、IAR 20细胞、QSG-7701细胞
AD293细胞系相关产品:T-T细胞、MV4:11细胞、ID8/MOSEC细胞
HL7702细胞系相关产品:HPAFII细胞、MCAEC细胞、H-1373细胞
NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
CoC1细胞系相关产品:D324细胞、L540细胞、74Int细胞
HTh74细胞系相关产品:NCI-H1568细胞、KG1A细胞、KY-50细胞
EHEB细胞系相关产品:KYSE-270细胞、AMC-HN-8细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞
RPMI no. 8226细胞系相关产品:BHT-101细胞、FHs 74 Int细胞、ECC12细胞
CAL120细胞系相关产品:IMR90细胞、OCILY-19细胞、RK-13细胞
L5178-R细胞系相关产品:Karpas-299细胞、GM3190细胞、P3X63-Ag8.653细胞
L-6细胞系相关产品:L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
CMT64细胞系相关产品:LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
MCF7/WT细胞系相关产品:MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞
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H2591细胞系相关产品:Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
MOLT.4细胞系相关产品:H295细胞、A2780S细胞、DCS细胞
HCC1143细胞系相关产品:Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞、NL-20细胞、MDCK-II细胞
Immortal Pig Intestinal-2I细胞系相关产品:CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
NCI-H2029 Thawing人小细胞肺癌细胞系
COLO320DM细胞系相关产品:GC-1spg细胞、HFF细胞、HEL 92.1.7细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
PTK 2细胞系相关产品:COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
SK-RC 52细胞系相关产品:BLO11细胞、McCoy细胞、Vertebral Cancer of the Prostate细胞
IB-RS-2细胞系相关产品:CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
KFB细胞系相关产品:YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
Adeno 293细胞系相关产品:COLO-824细胞、Hep-G2/C3A细胞、HCAEC细胞
SN4741细胞系相关产品:Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞
Mouse Podocyte Clone-5细胞系相关产品:DSL-6A/C1细胞、HCEC-12细胞、U-251细胞
MC-26细胞系相关产品:HCC-1428细胞、C3A细胞、Hs 683细胞
SK-RC-20细胞系相关产品:CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞
Natural Killer-92细胞系相关产品:BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞
RBMVEC细胞系相关产品:DoTc2 4510细胞、G401细胞、IPLB-SF-21-AE细胞
HCC-44细胞系相关产品:NU-GC-2细胞、BLO11细胞、TH1细胞
UACC812细胞系相关产品:SNU-719细胞、HAEC细胞、SW1990细胞
VMRC-LCD细胞系相关产品:M059K细胞、NBL-S细胞、NCI-H1522细胞
293 H细胞系相关产品:RGC5细胞、NCI-H2291细胞、H-125细胞
RL细胞系相关产品:SCC90细胞、NCIH596细胞、C22细胞
SU4细胞系相关产品:NW38细胞、MCA-38细胞、CAL-39细胞
H-128细胞系相关产品:NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
SK.OV.3细胞系相关产品:HME1细胞、NUGC2细胞、Emory University-2细胞
SNU1040细胞系相关产品:16HBE14o-细胞、PLA-801D细胞、RSC 96细胞
NCI-H250细胞系相关产品:H-295细胞、H1341细胞、NCI-H226细胞
VMM5A细胞系相关产品:CX-1细胞、Fox/NY细胞、7860细胞
Okayama University Medical School-27细胞系相关产品:EHEB细胞、HT 1080.T细胞、2008细胞
C-28I2细胞系相关产品:RPPVEC细胞、H-1650细胞、NCI-H1993细胞
CTLA4 Ig-24细胞系相关产品:LC-1-sq细胞、LC-2/ad细胞、253JB-V细胞
HEEpiC细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
CCRF SB细胞系相关产品:H-1355细胞、KTCTL-140细胞、A101D细胞
T/G HA VSMC细胞系相关产品:10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
HeLa S 3细胞系相关产品:YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
MDA.MB.435细胞系相关产品:B-cell with DC Morphology细胞、PCI-4.2细胞、Liver-02细胞
NCI-H2029 Thawing人小细胞肺癌细胞系
Blotchy fibroblast-11细胞系相关产品:Mevo细胞、OCI-AML-3细胞、UMC11细胞
Hs 895 T细胞系相关产品:CP-70细胞、THP-1细胞、MLTC-1细胞
NGEC细胞系相关产品:Duke University 145细胞、TCam-2细胞、SF-763细胞
IPLB-SF-21细胞系相关产品:Z-138细胞、COLO320 DM细胞、786O细胞
X63.Ag8.653细胞系相关产品:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
G-401细胞系相关产品:NCIH889细胞、OC316细胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞
NCIH526细胞系相关产品:Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞
U251n细胞系相关产品:IM-9细胞、NCIH748细胞、H-1672细胞
OCI/AML-3细胞系相关产品:MDST8细胞、293FT细胞、He La细胞
HFT-8810细胞系相关产品:NCI-H1155细胞、TJ905细胞、Capan2细胞
MDA MB 436细胞系相关产品:U266-B1细胞、EAC-E2G8细胞、KM12-SM细胞
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