"DMS 114 Thawing人肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
DMS 114 Thawing人肺癌细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
DMS 114 Thawing人肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
细胞形态特性:详见细胞说明书
UMNSAH/DF-1细胞系相关产品:NCM-460细胞、NCIH1666细胞、H-1993细胞
BALL1细胞系相关产品:Wien 133细胞、HEH2细胞、UCLA-SO-M21细胞
HCC0095细胞系相关产品:Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞
Molm 14细胞系相关产品:M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞
SCL-II细胞系相关产品:C41细胞、LL/2(LLc1)细胞、CCFSTTG1细胞
Calu3细胞系相关产品:PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
KYSE-30细胞系相关产品:95-D细胞、NCTC929细胞、3T3 L1细胞
KYSE-180细胞系相关产品:SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
OLN 93细胞系相关产品:Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
MIN6细胞系相关产品:NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
MC-3T3细胞系相关产品:CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
WM115mel细胞系相关产品:Panc203细胞、HTori-3.1细胞、UCLA RO-81A-1细胞
CFSC-8B细胞系相关产品:L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
PC-3M细胞系相关产品:Murine Lung Epithelial-12细胞、Hs706T细胞、PA317细胞
HCT-8/V细胞系相关产品:DR2R 1610细胞、STTG1细胞、HuTu-80细胞
CCD-33Co细胞系相关产品:HMC细胞、SKNEP-1细胞、SBC3细胞
Clone Y-1细胞系相关产品:C-Lu65细胞、H1666_DA细胞、CCLP1细胞
CHO-ori细胞系相关产品:FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
HNE3细胞系相关产品:GM04678细胞、KYSE-410细胞、LM-TK-细胞
SK-N-BE(1)n细胞系相关产品:NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
SK-N-BE(1)n细胞系相关产品:NSC34细胞、H-2023细胞、EAHY-926细胞
TE 354.T细胞系相关产品:NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
NCIH2085细胞系相关产品:Hs840T细胞、Mino细胞、IEC6细胞
L5178Y细胞系相关产品:Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
DMS 114 Thawing人肺癌细胞系
H1781细胞系相关产品:MAC1细胞、mREC细胞、HEC151细胞
751细胞系相关产品:SK-NEP-1细胞、H-1792细胞、RIN-14B细胞
PL5细胞系相关产品:PSN-1细胞、JM-Jurkat细胞、SK-N-FI细胞
HOP 62细胞系相关产品:SNU886细胞、NCI-SNU-16细胞、H-1105细胞
MDCKII细胞系相关产品:NCI-H774细胞、EoL-1-cell细胞、HCE细胞
PF382细胞系相关产品:FRTL-5 Cl 2细胞、RWPE1细胞、PC 61 5.3细胞
GM07404D细胞系相关产品:H1838细胞、NS20Y细胞、KP2细胞
RINm-5F细胞系相关产品:Capan-2细胞、NCIH1781细胞、hs 68细胞
MPP 89细胞系相关产品:KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
NCI-H23细胞系相关产品:HEL-92细胞、H676细胞、VSMC细胞
CFPAC细胞系相关产品:NCIH524细胞、HEL9217细胞、DMS-153细胞
CMT167细胞系相关产品:NS1/1-Ag4.1细胞、LIM-1215细胞、MC/CAR细胞
Tb1.Lu细胞系相关产品:CPA47细胞、H-1869细胞、L363细胞
SNU878细胞系相关产品:L cell细胞、CMECs细胞、A-875细胞
Karpas 422细胞系相关产品:WC00059细胞、NS-1细胞、TC7细胞
ECC12细胞系相关产品:HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞
C-33A细胞系相关产品:NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞
JURKAT E-61细胞系相关产品:MT-4细胞、WM-2664细胞、HNEpC细胞
BT-B细胞系相关产品:HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
H-520细胞系相关产品:QGP-1细胞、UPCI-SCC090细胞、CPAE细胞
NRK-52E细胞系相关产品:Wistar Institute, Susan Hayflick细胞、Mia PACA 2细胞、PC9细胞
Colon26细胞系相关产品:ABE8.1/2细胞、TE 85.T细胞、BCECs细胞
CCLP1细胞系相关产品:HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞
CCRF-CEM C1细胞系相关产品:HIMEC细胞、FaDu细胞、HCT-GEO细胞
TE 354.T细胞系相关产品:NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞
P-815细胞系相关产品:P3-X63-Ag8细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞、Panc-327细胞
Calu6细胞系相关产品:Ra #1细胞、RPMI8402细胞、HEK-A细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品:H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
A7r5细胞系相关产品:SKCol1细胞、HuH6细胞、NCI-H64细胞
H-446细胞系相关产品:U251-MG细胞、Hs 888.T细胞、A9(Hamprecht)细胞
769-P细胞系相关产品:143B细胞、MA 104细胞、RBE细胞
H1693细胞系相关产品:PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
H4-IIE-C3细胞系相关产品:CAL 27细胞、Human Embryonic Kidney 293细胞、Walker-Ca.256细胞
DMS 114 Thawing人肺癌细胞系
OCI-Ly 8细胞系相关产品:K562/ADP细胞、MOLT3细胞、MDA-MB-436细胞
L-Wnt3A细胞系相关产品:Hk-2细胞、Hs1.Tes细胞、MUGCHOR1细胞
NCCIT细胞系相关产品:L-929细胞、Ca Ski细胞、NPC-TW01细胞
Pt K2 (NBL-5)细胞系相关产品:NP69SV40T细胞、Cor L88细胞、NCIH1650细胞
Nb 2细胞系相关产品:3T3F442A细胞、A-549细胞、G401细胞
WM 239细胞系相关产品:PAEC细胞、DLD-1细胞、HCT8细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
SK-MEL-2-LUC细胞系相关产品:VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
EC-109细胞系相关产品:HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
A-375SM细胞系相关产品:HCa/16A3-F细胞、NCIH1355细胞、NR8383细胞
RPTEC/TERT1细胞系相关产品:PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
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