"NCI-H2073 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H2073 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长：贴壁
养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：３-１：６传代
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H2073 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性：上皮细胞
BC-025细胞系相关产品：Ramos G6.C10细胞、Human Microglia Clone 3细胞、NCI-H748细胞
NCI-H596细胞系相关产品：MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞
NG10815细胞系相关产品：P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
HCASMC细胞系相关产品：NR-8383细胞、J-774细胞、MA-104细胞
HUT 28细胞系相关产品：NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
Kit225-K6细胞系相关产品：NCI-H358细胞、Okayama University Medical School-27细胞、HeLa.S3细胞
P31/FUJ细胞系相关产品：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞
CCC-HSF-1细胞系相关产品：McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞
C4-2B细胞系相关产品：H-II-E-C3细胞、FRO81-2细胞、LCD细胞
Earles's cells细胞系相关产品：BC3 H1细胞、OCI-LY-8细胞、NCI-SNU-C2B细胞
Hs-746T细胞系相关产品：NOZAWA细胞、CCRF/CEM-C7细胞、EAhy926细胞
SNU-398细胞系相关产品：NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞
GM3190细胞系相关产品：RS4-11细胞、C17.2细胞、Hep 3B2.1-7细胞
HLEC细胞系相关产品：50.B1细胞、HEK293A细胞、KE-39细胞
M059J细胞系相关产品：Reuber-H-35 hepatoma细胞、MA-782细胞、P3-X63-Ag8-6-5-3细胞
SKMEL1细胞系相关产品：HL-60 Clone 15细胞、MNNG-HOS细胞、NCIH810细胞
NR8383.1细胞系相关产品：NCIH520细胞、COC1/CDDP细胞、A2058细胞
NCI-H596细胞系相关产品：MDCK supertube细胞、Vero C1008细胞、Los Angeles Prostate Cancer-4细胞
HLEpiC细胞系相关产品：Tca8113细胞、AAV293细胞、DHL5细胞
Mv1.Lu细胞系相关产品：MDA-MB-361细胞、H1975细胞、P3X63细胞
Panc02细胞系相关产品：P815细胞、KTA-7细胞、CHOS细胞
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BJAB-1细胞系相关产品：SF767细胞、SkMel31细胞、Hs739T细胞
LNCaP clone FGC细胞系相关产品：Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞
GL261细胞系相关产品：GM02131细胞、SK-N-MC细胞、HuH-1细胞
Super Tube细胞系相关产品：SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
NCI-H2073 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
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NCI-H2073 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
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