"NCI-H446 cell line人小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料:该细胞是1982年由CarneyD和GazdarAF等从一位小细胞肺癌患者的胸腔积液中建立的。细胞的原始形态并不具有小细胞肺癌特征。这个细胞株是小细胞肺癌的生化和形态学上的变种,表达神经元特有的烯醇酶和脑型肌酸激酶同工酶;左旋多巴脱羧酶、蚕素、抗利尿激素、催产素或胃泌激素释放肽未达到可检测水平。与正常细胞相比,该细胞c-mycDNA序列扩增约20倍,RNA增加15倍。最初传代培养基用含有5%FBS的RPMI1640,另外添加10nM化可的松、0.005mg/ml胰岛素、0.01mg/ml转铁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良好,当补液时,需避免反复吹打。
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCI-H446 cell line人小细胞肺癌细胞系
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
细胞生长特性:贴壁/悬浮生长,混合
细胞组成了组织,组织组成了器官,器官的组织就形成了一个个体,所有的组织和器官都是由细胞分化增殖形成的,通过汲取营养物质,最后形成个体。把人体的单个小细胞比喻成一个地球,人体组织呢就是一个太阳系,器官就是银河系,这样生动形象的比喻,可以让我们很容易了解到细胞与组织、组织与器官之间的关系。人的身体就像一个庞大的机器工厂,每时每秒都在进行着能量的传输与转化,它也像个巨大的产业链,一旦某个环节出了问题,同样伴随着的是人的身体也会出现不同程度的功能障碍,这也就是为什么人到某一定阶段以后身体的某些功能会逐渐衰退的原因。人的基本生命活动是通过细胞实现的,细胞的活动或功能异常,人体就容易生病。人之所以会得病就是人体内的细胞除了问题,一旦细胞有问题——组织就有问题——器官就有问题——系统就有问题——人就会得病。人体细胞每天都在分裂增殖,但是增长到一定阶段后就开始停止、病变或凋亡,如果不及时修复或增加,人体就会出现不同程度的疾病症状,小到病毒感冒,大到疑难杂症无一不都是因为人体内的细胞出了问题。
NCI-H446 cell line人小细胞肺癌细胞系
细胞形态特性:上皮样
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