"FAK+/+ fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:成纤维细胞样
贴壁细胞的消化方法介绍:1、胰酶。这是用得最多的。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于细胞间。配制时不能用含、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。2、胶原酶。这种方法比较少,一般是用原代培养时,从组织消化下细胞。这种方法作用温和,对细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般浓度在0.02%左右。作用于细胞与间质,对细胞间也有一定作用。注意,它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶。因此,配制时应调节好酸碱度。它不能被终和。因此,消化下来的细胞要洗一遍。4、商品化的无酶消化液。个人的使用经常觉得对细胞的损伤比较大,但是分离成单细胞悬液的能力确实比较强。5、物理法。直接吹打或用细胞刮子将细胞刮下来。6、冷冻法。此方法仅能用于细胞传代时。无法使组织上的细胞脱落下来。本方法的原理,我想是因细胞冷冻后收缩,从而从培养瓶上脱落下来。优点是:对细胞损伤小,不需要中止或洗细胞,方便,不需要另外配制消化液。特别适用那些贴壁不是特别紧,又特别娇气的细胞。不足是细胞常成小片脱落。此种方法曾用于因用其它方法传代导致大量细胞死亡操作的间充质干细胞、DC细胞的培养,效果非常满意。具体过程是:1、用较多的4度的PBS 洗涤一遍细胞(以6孔板为例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,静置操作台上,很快细胞就小片脱落,3、轻轻吹打,细胞即完全脱落,4、按一定比例传代。
Hep II细胞系相关产品:NCIH1581细胞、Anglne细胞、MHCCLM3细胞
HLMVEC细胞系相关产品:MKN 7细胞、ML-2细胞、HPaSteC(HPSC)细胞
NCI-H3255细胞系相关产品:CATH-a细胞、C8166-CD4细胞、H-196细胞
细胞生长:贴壁
FAK+/+ fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
细胞传代方法:1:4-1:8传代;
BE(2)-M17细胞系相关产品:H-774细胞、A2780细胞、beta-TC6细胞
P3X63 AG8-653细胞系相关产品:T-CAM2细胞、HMEC细胞、HELF细胞
SW1417细胞系相关产品:B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
NCM356细胞系相关产品:MDCK II细胞、REC1细胞、AK细胞
H661细胞系相关产品:ABC1细胞、BHK21细胞、TSUpr1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
FAK+/+ fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:成纤维细胞
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中最常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
SMA 560细胞系相关产品:HPAF-II细胞、H2444细胞、I90细胞
BT-325细胞系相关产品:SNU601细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NCI-H87细胞
SCC 9细胞系相关产品:MLE-12细胞、SK-MEL-24细胞、GM03671C细胞
NCI-H1944细胞系相关产品:RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞
UCLA NPA871细胞系相关产品:MADB106细胞、A2780 CP70细胞、MDAMB361细胞
PC-14细胞系相关产品:SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞
Hs 863.T细胞系相关产品:CHO-Lec1细胞、A431细胞、WEHI-231细胞
H2452细胞系相关产品:BrCL12细胞、PTK2细胞、EB2细胞
Douglas Foster-1细胞系相关产品:NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
FAK+/+ fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
HCC15细胞系相关产品:FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
PNT-1A细胞系相关产品:SV40 MES 13细胞、A9 (Hamprecht)细胞、GMK,BSC-1细胞
LM-TK-细胞系相关产品:RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
UCLA-RO 81细胞系相关产品:M-14细胞、HTori:3细胞、MDA.MB.231细胞
DMS79细胞系相关产品:RBL-1细胞、SK MES 1细胞、BGC-823细胞
SKMEL1细胞系相关产品:HL-60 Clone 15细胞、HCC1954BL细胞、CHO-Lec1细胞
HCC0366细胞系相关产品:MCF/Adr细胞、RN-c细胞、NTC200细胞
JTC-28细胞系相关产品:G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
SF763细胞系相关产品:H510A细胞、MONO-MAC 6细胞、PBMC细胞
COLO-824细胞系相关产品:Med 341细胞、Rat Skin 1细胞、M1细胞
HOC细胞系相关产品:H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞
KMS-26细胞系相关产品:ARH-77细胞、H-2110细胞、HME1细胞
266 Bl细胞系相关产品:GM03671C细胞、KM-H2细胞、SACC-83细胞
MC3T3-E1 Subclone 14细胞系相关产品:P3/X63/Ag8.653细胞、FLS细胞、DMS 53细胞
NCI-H727细胞系相关产品:T-ALL 1细胞、NCI-H1993细胞、KG-1细胞
HECCL-1细胞系相关产品:K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
MOVAS细胞系相关产品:SUM159PT细胞、KHYG细胞、M-O7e细胞
PGBE1细胞系相关产品:Simpson细胞、Clone 15 HL-60细胞、C6661细胞
MUTZ-1细胞系相关产品:SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
MB-49细胞系相关产品:HT29细胞、KOPN-8细胞、UC-3细胞
LLC-MK2细胞系相关产品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5细胞、PC3细胞、L-M (TK-)细胞
MOLT-3细胞系相关产品:HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
Psi-2 DAP细胞系相关产品:HFT 8810细胞、SJRH 30细胞、HCC1954 BL细胞
RPMI-8226S细胞系相关产品:RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞
OCI Ly10细胞系相关产品:SCL-1细胞、HD-LM-2细胞、A2780-CP细胞
H2052细胞系相关产品:K-562细胞、P560细胞、L cells (TK-)细胞
GDM-1细胞系相关产品:MCF7-GFP细胞、B16 melanoma F10细胞、UWB1289细胞
IGROV-1细胞系相关产品:G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞
SK N SH细胞系相关产品:MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
EC-9706细胞系相关产品:LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
Malme-3 M细胞系相关产品:KNS-62细胞、NS1-Ag 4/1细胞、SRS-82细胞
RPMI 1846细胞系相关产品:AMC-HN8细胞、CMT64细胞、TE85细胞
WC00079细胞系相关产品:A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞
IPLB-Sf21细胞系相关产品:OV-2008细胞、HNTEC细胞、KYSE-510细胞
OVCAR8/ADR细胞系相关产品:CTLA4 Ig-24细胞、RBL-2H3细胞、LN229细胞
D-341 Med细胞系相关产品:OVCAR8/ADR细胞、EOC-20细胞、HuCC-T1细胞
WM115细胞系相关产品:NE1细胞、SN12PM6细胞、Jurkat FHCRC细胞
H4-II-E-C3细胞系相关产品:Mel-624细胞、CESS细胞、THEECs细胞
NOZC-1细胞系相关产品:F442A细胞、MFE-280细胞、Hs 636.T细胞
MeT5A细胞系相关产品:OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
SK-N-F1细胞系相关产品:Hs 274.T细胞、IM-95细胞、SW 1271细胞
Fortner's melanotic melanoma #3细胞系相关产品:C4I细胞、AR4-IP细胞、NCI-H2347细胞
OVCAR8细胞系相关产品:RCC4细胞、SKRC-39细胞、Panc4.03细胞
HIEC-6细胞系相关产品:GM04679细胞、SW1573细胞、RPMI2650细胞
MCF7ADR细胞系相关产品:SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞
L-6TG细胞系相关产品:P-2003细胞、A875细胞、GS-9L细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞系相关产品:M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
Mel-624细胞系相关产品:CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
Experimental Mammary Tumour-6细胞系相关产品:TE 354.T细胞、bEND.3细胞、QGY7703细胞
NCI-H2171细胞系相关产品:AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
LK 2细胞系相关产品:MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
FAK+/+ fibroblast cells小鼠成纤维细胞系
Pro-5WgaRI3C细胞系相关产品:NCI-SNU-423细胞、NCIH69细胞、Hs 934.T细胞
NCIH1930细胞系相关产品:Hs888Lu细胞、RCK8细胞、SK-Hep1细胞
Hs895T细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、RKO_AS45细胞、SK RC 20细胞
SCC 9细胞系相关产品:MLE-12细胞、PA1细胞、HEK-2细胞
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