"3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞系
细胞背景资料：３T３-L１是从３T３细胞（Swissalbino）中经克隆分离得到的连续传代的亚系。该细胞从快速分裂到汇合和接触性抑制状态经历了前脂肪细胞到脂肪样细胞的转变。该细胞鼠痘病毒阴性；可产生甘油三酯，高浓度血清可增强细胞内脂肪堆积。
细胞形态：成纤维细胞样
细胞复苏相关注意事项：１.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。２.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在１-２min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。３.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。４.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。５.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时１ml细胞液要加１０ml-１５ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。６.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏１管细胞一般可分装到１-２只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。７.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于０.５%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是１%。所以如果你的冻存液的浓度是１０%DMSO的话那么加１０ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
GFP-Olig2细胞系相关产品：hTERT-RPE细胞、AML 12细胞、NCIH1618细胞
8305-C细胞系相关产品：CDC/EU.HMEC-1细胞、TGHAVSMC细胞、MCF12F细胞
HCC-1806细胞系相关产品：D324 Med细胞、RBL 2H3细胞、HCS2/8细胞
细胞生长：贴壁
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２传代
NCIH1184细胞系相关产品：AU-565细胞、H498细胞、H-847细胞
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
Mo7e细胞系相关产品：H-2196细胞、CAKI 2细胞、NCI-H510细胞
LLCMK2细胞系相关产品：L615细胞、Hs888Lu细胞、Hs_578t细胞
SW480细胞系相关产品：HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：成纤维细胞样
培养细胞真的不难，最关键几点：１)所有的东西使用，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；２)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；３)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；５)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；６)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?１)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；３)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；４)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；５)晚上离开的时候给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；６)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
HHFK细胞系相关产品：HEMCSS细胞、MDA-MB-134细胞、Michigan Cancer Foundation-10A细胞
TGHAVSMC细胞系相关产品：HCC70细胞、Hs839.T细胞、Raji细胞
HEK 293细胞系相关产品：WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
HOP62细胞系相关产品：UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
SUM-52细胞系相关产品：AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
HCC1599细胞系相关产品：ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞
Jurkat clone A3细胞系相关产品：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
SNU216细胞系相关产品：MyLa 2059细胞、DI-TNC1细胞、HeLa细胞
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A72细胞系相关产品：JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞系
PLC/PRF/5细胞系相关产品：Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞
GM03320细胞系相关产品：SK.OV.3细胞、675T细胞、L-02细胞
766T细胞系相关产品：EnCa1细胞、ABC-1细胞、RS4-11细胞
hTERT-RPE细胞系相关产品：NPA'87细胞、MEG-01细胞、Adeno-293细胞
M21细胞系相关产品：NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
SCC-25细胞系相关产品：ZR75-1细胞、HUT 28细胞、RPMI #1846细胞
OCI-LY-18细胞系相关产品：ROS17/2.8细胞、MCA38细胞、HCC-9724细胞
HT clone H9细胞系相关产品：AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
SW 1573细胞系相关产品：Sp 2817细胞、CBRH7919细胞、MDA231细胞
L-Wnt-3A细胞系相关产品：MC3T3-E细胞、A-172细胞、RPMI-1788细胞
Colo-678细胞系相关产品：SupB15WT细胞、Hela-mock细胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞
ECC-10细胞系相关产品：LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞
293-F细胞系相关产品：PC3M-IE8细胞、JIII细胞、C8161细胞
H1105细胞系相关产品：CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞
NCI H929细胞系相关产品：SUM 159细胞、J82COT细胞、CCRF-CEM细胞
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PG [Human lung carcinoma]细胞系相关产品：NCIH2009细胞、LWnt3A细胞、CL11细胞
HCC94细胞系相关产品：HCC-2218细胞、AN-3细胞、H2227细胞
MDA-MB-435 S细胞系相关产品：MDA231-LM2细胞、DHL6细胞、INS1E细胞
LIPF155C细胞系相关产品：DMS-114细胞、MonoMac6细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞
MAVER-1细胞系相关产品：AML-193细胞、NCI-H2170细胞、SNU-520细胞
COLO 320DM细胞系相关产品：4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞
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HPAF-I细胞系相关产品：KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
4T1-A细胞系相关产品：KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞
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MPP89细胞系相关产品：HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞
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PC 61-5-3细胞系相关产品：GM637细胞、NIH-3T3细胞、BNL.CL2细胞
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KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
HCT-GEO细胞系相关产品：SF 126细胞、H460细胞、NALM6细胞
SV40-MES13细胞系相关产品：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
PC-3M细胞系相关产品：Murine Lung Epithelial-12细胞、NCIH128细胞、8226/S细胞
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KYSE-180细胞系相关产品：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
IPEC-J2细胞系相关产品：NT2细胞、Det. 562细胞、ACC-M细胞
BIC1细胞系相关产品：NCI-H1048细胞、TR 146细胞、AHH-1细胞
GDM1细胞系相关产品：Jurkat-FHCRC细胞、WPMY-1细胞、MKN-1细胞
ASH3细胞系相关产品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞
SF295细胞系相关产品：H-2081细胞、Lu-165细胞、PK136细胞
VP303细胞系相关产品：Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞
NCI.H460细胞系相关产品：THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞
OVCAR-420细胞系相关产品：LICR-HN-6细胞、MDA435细胞、SNU-216细胞
Hs294T细胞系相关产品：MDAPCa-2b细胞、DanG细胞、J-82细胞
HeLa S 3细胞系相关产品：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
3T3-L1 fibroblast cells小鼠前脂肪胚胎成纤维细胞系
NCI-H2172细胞系相关产品：Pt K1细胞、NPC-TW 039细胞、Detroit 562细胞
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品：Clone Y1细胞、RPMI1788细胞、QGP1细胞
H292细胞系相关产品：SNU620细胞、Hs-746T细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
HEK 293T/17细胞系相关产品：SKML-28细胞、LTEP a2细胞、SY5Y细胞
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