"MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纤维细胞系
细胞背景资料:MRC-5细胞系来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,该细胞老化前能传代42~46个倍增时间。
细胞形态:成纤维细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
U-2932细胞系相关产品:Hs 839.T细胞、P3HR1细胞、NRK52E细胞
LC-2 ad细胞系相关产品:C17.2细胞、IMR-32细胞、SMA 560细胞
R3/1细胞系相关产品:JS1细胞、NK-10A细胞、HSC2细胞
细胞生长:贴壁
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纤维细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑,考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异,有时因寄赠、交换和购买,培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室,的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是:在-70℃以下时,细胞内的酶活性均己停止,即代谢处于完全停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内,水晶呈针状,极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏:冻存细胞较脆弱,要轻柔操作。冻存细胞要快速融化,并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感,离心去除冻存培养基,然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数,细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml;培养细胞12到24小时,更换新鲜的完全生长培养基,去除冻存剂。离心方法:取出贮存细胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基,轻轻混匀;以大约80x离心2到3分钟;弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞,并且进行活细胞计数。细胞铺板,细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化:一个成年人全身细胞总数约1012个,可以区分为200多种不同类型的细胞:形态结构,代谢,行为,功能等各不相同。追根溯源,这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以,通常把发育过程中,细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段,也发生在胎儿出生以后,乃至成人阶段。例如,人体血细胞的产生和分化,这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞,转入分化,通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞,它们的基因表达和代谢活动各不相同。
细胞传代方法:1:2-1:5传代;每周1-2次。
MDA-453细胞系相关产品:JCA1细胞、CHP-100细胞、Caco-2/BBe 1细胞
SuDHL 4细胞系相关产品:Evsa T细胞、H-1876细胞、WTRL1细胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3细胞系相关产品:FU-97细胞、OCM-1细胞、WM-451Lu细胞
MHCC 97细胞系相关产品:LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
SCC25细胞系相关产品:Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纤维细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞形态特性:成纤维细胞样
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
CHP212细胞系相关产品:CTV1细胞、T-98细胞、Farage Original Line细胞
SNU-719细胞系相关产品:HcerEpic细胞、P36细胞、Sp2/0-Ag14细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞系相关产品:WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞
SK-UT-1细胞系相关产品:TE-14细胞、3-LL细胞、HPAEpiC细胞
DMS114细胞系相关产品:LL/2细胞、Nb 2细胞、HCC-9204细胞
SNU182细胞系相关产品:U266细胞、CC-LP-1细胞、hTERT-RPE1细胞
HuTu-80细胞系相关产品:Alpha Mouse Liver 12细胞、3T3-L1 ad细胞、Vero from pool #76细胞
PLB-985细胞系相关产品:NCI-H676细胞、CAL 12细胞、KMH2细胞
NCIH1648细胞系相关产品:NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞
SEG1细胞系相关产品:NCI H929细胞、MDA-435细胞、Jurkat E6细胞
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纤维细胞系
H-510A细胞系相关产品:HUT28细胞、Line 207细胞、McCoy细胞
GM0637细胞系相关产品:SUM149细胞、TOV112D细胞、Leukemic 1210细胞
Hs729T细胞系相关产品:NIHOVCAR3细胞、EJ细胞、MDA361细胞
Normal Rat Kidney-52E细胞系相关产品:U-138-MG细胞、MDA-MB157细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞
NTera-2D1细胞系相关产品:HuH7细胞、NALM-6-M1细胞、TKB1细胞
BPH-1细胞系相关产品:H711细胞、HEK;293细胞、Hs-746T细胞
BPH-1细胞系相关产品:H711细胞、HEK;293细胞、Hs-746T细胞
SKGT4细胞系相关产品:BEND细胞、HCC15细胞、CCRF SB细胞
DMS-114细胞系相关产品:MDAMB-231细胞、253J细胞、293AD细胞
T24细胞系相关产品:KCL22S细胞、GA-10细胞、UCLA-RO 81细胞
MGH-U1细胞系相关产品:OCI-AML2细胞、IM-9细胞、GM02219C细胞
Institute for Medical Research-32细胞系相关产品:MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
SK-BR3细胞系相关产品:MKN-74细胞、DMS-114细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞
HuLEC-5a细胞系相关产品:AG06814-M细胞、OCI-AML-5细胞、NBLAN5T细胞
Psi2-DAP细胞系相关产品:Ca759细胞、UACC812细胞、TC-1[JHU-1]细胞
PANC-10-05细胞系相关产品:SNU-878细胞、TGBC11TKB细胞、B16 BL6细胞
MDBK细胞系相关产品:ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
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RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
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COLO 699细胞系相关产品:TE671/RD细胞、UCD-MLA-144细胞、ZR-75-30细胞
COLO357细胞系相关产品:NCI-H810细胞、WM-239-A细胞、Anip-973细胞
AG 9细胞系相关产品:Ramos-RA1细胞、IAR20细胞、NCIH345细胞
H2172细胞系相关产品:alphaTC clone 6细胞、Med 341细胞、MKN74细胞
Mouse INsulinoma 6细胞系相关产品:U251MG细胞、H1436细胞、WI38细胞
RC-K8细胞系相关产品:HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
OVCA-420细胞系相关产品:RIN-m5F细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞、Pa14C细胞
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CAKI1细胞系相关产品:Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
SGC7901细胞系相关产品:Daoy细胞、Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDA-415细胞
EAhy 926细胞系相关产品:SU86_86细胞、SK-MES-1细胞、huH 1细胞
SJSA-1细胞系相关产品:PECAPJ34细胞、HAC-84细胞、MDA.MB.435细胞
HOS (TE85, Clone F5)细胞系相关产品:JurkatE6-1细胞、HGE细胞、OCI-Ly03细胞
CWR-22rv1细胞系相关产品:H-929细胞、Hs 606细胞、DF-1细胞
H-740细胞系相关产品:UACC 812细胞、H-1436细胞、HNE-2细胞
MOLM-14细胞系相关产品:C-643细胞、OCI-Ly07细胞、PANC0203细胞
COLO-16细胞系相关产品:OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞
COLO-16细胞系相关产品:OUMS27细胞、P3-X63-Ag8.653细胞、SW900细胞
HMC细胞系相关产品:CEM-CCRF (CAMR)细胞、624 MEL细胞、GM2132细胞
BHP 10-3细胞系相关产品:W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
Madison细胞系相关产品:RF/6A细胞、SF 126细胞、CBRH7919细胞
Hs 888Lu细胞系相关产品:Ramos 2G6 4C10细胞、KP2细胞、KYSE70细胞
Calu-6细胞系相关产品:GTL-16细胞、SW-13细胞、GM06141细胞
SKBr3细胞系相关产品:Hs-281-T细胞、HFTF细胞、OAW 42细胞
BC-021细胞系相关产品:Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞
RSC96细胞系相关产品:PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞系相关产品:LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞
P 815细胞系相关产品:SPCA1细胞、SNU354细胞、EU-3细胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞系相关产品:HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞
MDAMB157细胞系相关产品:MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
MRC-5 fibroblast cells人胚肺成纤维细胞系
BT 20细胞系相关产品:NCI-HUT-460细胞、NE-4C细胞、NCI-H2122细胞
NCIH508细胞系相关产品:UACC893细胞、NCI-H2228细胞、MOLT3细胞
RSC-364细胞系相关产品:NCI-H-128细胞、CV-1细胞、F442-A细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞系相关产品:WPMY-1细胞、3T3F442A细胞、HeLa S-3细胞
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