"NCI-H1882 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
KP-2细胞系相关产品:NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品:HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞
AR4-IP细胞系相关产品:S3 HeLa细胞、Scott and White No. 13细胞、Rat Fetal Lung-6细胞
细胞生长:贴壁
NCI-H1882 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SK-GT-2细胞系相关产品:D-407细胞、KP-N-RT-BM-1细胞、H-774细胞
PC3M-IE8细胞系相关产品:NWA细胞、SW-1417细胞、X63.Ag8.653细胞
BE(2)C细胞系相关产品:SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞
DU-145细胞系相关产品:HRGEC细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、Hx-147细胞
DSL-6A-C1细胞系相关产品:HTh 74细胞、SW-1271细胞、HMEC细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H1882 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
NCI-H1781细胞系相关产品:253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
NCIH841细胞系相关产品:C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
Hs870T细胞系相关产品:JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
H820细胞系相关产品:CHP-100细胞、PC 61细胞、IAR-20细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
NCI-H810细胞系相关产品:ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞
H-1944细胞系相关产品:SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞
Panc 08.13细胞系相关产品:AZ 521细胞、HKF细胞、HSAS1细胞
SCL-I细胞系相关产品:WM-266-4细胞、UCLA-SO-M20细胞、NCI-H647细胞
OC316细胞系相关产品:COLO320HSR细胞、WEHI-279细胞、Human Embryo Kidney-2细胞
NCI-H1882 epithelioid cells人肺癌细胞系
R1610细胞系相关产品:H510细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、HUT 28细胞
H345细胞系相关产品:NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
BI-Mel细胞系相关产品:KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
MIO-M1细胞系相关产品:PL12细胞、OCI/AML2细胞、ZR7530细胞
D-341Med细胞系相关产品:MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞
751-NA-15细胞系相关产品:SMA-560细胞、SW 480细胞、KYSE 70细胞
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KU-812F细胞系相关产品:E304细胞、LAN-6细胞、BpRc1细胞
H3255_DA细胞系相关产品:HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
Hs 766细胞系相关产品:SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
PCI:SG231细胞系相关产品:NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
L Wnt-3A细胞系相关产品:HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞
OCI-LY-7细胞系相关产品:HEC-251细胞、SK-ES-1细胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞
GBCSD细胞系相关产品:Vx2细胞、IGROV细胞、Hs 274.T细胞
H2171细胞系相关产品:LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞
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T/G HA-VSMC细胞系相关产品:OVCAR-433细胞、PLC/PRF5细胞、NCI-H1563细胞
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PC14细胞系相关产品:LMTK-细胞、Sup T-1细胞、HOPC细胞
LAD 2细胞系相关产品:GC-1细胞、SN4741细胞、Hs 746T细胞
V 79细胞系相关产品:Liver-02细胞、LS 123细胞、Microbiological Associates-104细胞
Hela-mock细胞系相关产品:LS-123细胞、HCV 29细胞、Hs 578.Bst细胞
CEF细胞系相关产品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
H-660细胞系相关产品:P3X63细胞、WM266mel细胞、Y3-Ag123细胞
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H295R细胞系相关产品:Mia PACA 2细胞、MM134细胞、H660细胞
SK-ChA1细胞系相关产品:Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
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NOMO-1细胞系相关产品:786-O细胞、CII细胞、HEK293T/17细胞
B-95-8细胞系相关产品:L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
Molm 14细胞系相关产品:M-O7e细胞、HCO细胞、38C-13细胞
COV 504细胞系相关产品:HGBEC细胞、NCI-H520细胞、L-132细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
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H22-H8D8细胞系相关产品:CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
NCI-H1882 epithelioid cells人肺癌细胞系
BERH-2细胞系相关产品:MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
NCIH345细胞系相关产品:COLO 738细胞、CAKI.1细胞、624 MEL细胞
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