"NCI-H64 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
细胞复苏相关注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致爆炸。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。4.离心问题:目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养,第二天换液。因为离心的目的是两个,去除DMSO,去除死细胞,这个是标准流程,但对一般人来说,把握不好离心转速和时间,转的不够活细胞沉底的少,细胞就全被扔掉了,转过了活细胞会受压过大,死亡。此外在操作过程中容易污染,所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO),DMSO对细胞有一定的毒副作用,所以须将离心后的液体前倒净,且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏,结果无异常。5.细胞贴壁少的问题:教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液,而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题:试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中,分装过多,细胞浓度过低,不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题:这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度,从如果你加培养基的太少,那么DMSO的浓度就会比较大,就会影响细胞生长,从以前的资料来看,DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响,还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
HS-294-T细胞系相关产品:HSAEC1-KT细胞、TC-1[JHU-1]细胞、TALL1细胞
CHAGOK1细胞系相关产品:Caov-3细胞、NCIH1417细胞、H322T细胞
GM00346B细胞系相关产品:ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞
细胞生长:贴壁
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌细胞系
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,最小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到最小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到最小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MHH-CALL2细胞系相关产品:D-283MED细胞、W133细胞、BE(2)-C细胞
Mono Mac 1细胞系相关产品:BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
OCI/AML4细胞系相关产品:SK-N-BE-2c细胞、MPC11细胞、OCI/AML4细胞
MKN45细胞系相关产品:TE-671细胞、MCMEC细胞、SVG(P12)细胞
TB1 Lu细胞系相关产品:SK_HEP1细胞、P3HR-1细胞、LA-N-1细胞
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
细胞形态特性:详见细胞说明书
培养细胞真的不难,最关键几点:1)所有的东西使用,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏;2)动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因;3)有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,传代细胞的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验;5)个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢;6)传代细胞不能进去太多人,避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套;3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测;4)水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去);5)晚上离开的时候给传代细胞照紫外,超净台是用完就开;6)是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
HEK 293-H细胞系相关产品:Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
CMT 64细胞系相关产品:TGBC11T细胞、M20 [Human melanoma]细胞、NEC8细胞
HuT 78细胞系相关产品:LS 174T细胞、SKMEL3细胞、ST细胞
GM00346细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞、BT474细胞、HFL-1细胞
B16 subline B78细胞系相关产品:SKMEL-2细胞、DMS-273细胞、CALU1细胞
10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
NG10815细胞系相关产品:P30-OHK细胞、B78细胞、IOSE-80细胞
NCIH2106细胞系相关产品:GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
Calu3细胞系相关产品:PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
SCaBER细胞系相关产品:QGY7703细胞、RGC6细胞、L 428细胞
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌细胞系
CHL/IU细胞系相关产品:NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞
SW1463细胞系相关产品:H69细胞、SF539细胞、TE1细胞
Nittby-Salford 1细胞系相关产品:FAK+/+细胞、H-1522细胞、Dx5细胞
PC3M细胞系相关产品:BMSC/hBMSCs细胞、KM12SM细胞、PNT-1A细胞
NCTC clone 1469细胞系相关产品:Hs 729T细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM 239细胞
HF-91细胞系相关产品:TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
HF-91细胞系相关产品:TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
LoVo细胞系相关产品:KYSE 270细胞、SNU878细胞、NCI-H1105细胞
Hos TE-85细胞系相关产品:MS1细胞、H650细胞、ACC3细胞
HCPEpiC细胞系相关产品:PT-67细胞、NCIH2172细胞、C2-C12细胞
SCC7细胞系相关产品:Douglas Foster-1细胞、ASH3细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞
ACT-1细胞系相关产品:LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
H-841细胞系相关产品:SUM 102PT细胞、MES-SA细胞、CEM/0细胞
MGH-U3细胞系相关产品:RC-K8细胞、AR4-2J细胞、PANC1005细胞
HeLa229细胞系相关产品:RT-BM-1细胞、CA-46细胞、OCI-Ly 7细胞
MFM-223细胞系相关产品:SKLU-1细胞、KM12-SM细胞、P3X63Ag8-6-5-3细胞
HS-5细胞系相关产品:HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞
WiDr细胞系相关产品:HPAF细胞、TOV-112细胞、L cell细胞
U-251-MG细胞系相关产品:SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
CWR22R-V1细胞系相关产品:HLE-SRA-01/04细胞、NG-108-15细胞、CAL12T细胞
D-341 Med细胞系相关产品:OVCAR8/ADR细胞、EOC-20细胞、HuCC-T1细胞
NCI-H1668细胞系相关产品:NPA细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞、HOS TE85细胞
Z310细胞系相关产品:NCI660细胞、NCI-H2122细胞、TE354.T细胞
CEM.C1细胞系相关产品:10RGB细胞、NCIH23细胞、MN-9D细胞
SCC15细胞系相关产品:H1092细胞、NCI-H1694细胞、Colo699细胞
WEHI3细胞系相关产品:Hs294T细胞、RPMI-7951细胞、SGC7901/DDP细胞
ketr 3细胞系相关产品:HTSMC细胞、Granta-519细胞、OVCAR 4细胞
DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
L540细胞系相关产品:MES-SA/Dx5细胞、P31 FUJ细胞、RS(4;11)细胞
MT-3 [Human leukocytes]细胞系相关产品:PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞
LY-R细胞系相关产品:EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
LM-TK-细胞系相关产品:RPTC细胞、ID8细胞、GC-2spd(ts)细胞
NUGC-2细胞系相关产品:LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
P3-X63-Ag8-653细胞系相关产品:H250细胞、JKT1细胞、SJSA细胞
L-428细胞系相关产品:NBLS细胞、SKGIIIA细胞、SNU-638细胞
HGF-1细胞系相关产品:PAN 02细胞、SNU-869细胞、JIMT-1细胞
NCI-H1048细胞系相关产品:TE 85.T细胞、CMT 167细胞、RAG细胞
LC2/Ad细胞系相关产品:RCM1细胞、McG-1细胞、Hep II细胞
MOLT 3细胞系相关产品:BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
Panc-8_13细胞系相关产品:HUV-EC-C细胞、KMST6细胞、NCIH838细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品:8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
KYSE270细胞系相关产品:2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞
D407 RPE细胞系相关产品:NCI H508细胞、SuDHL 10细胞、GM05384细胞
EFM192B细胞系相关产品:COLO-394细胞、NCI-H2227细胞、Helacyton gartleri细胞
NBL-S细胞系相关产品:CZ-1细胞、H-1395细胞、U-373MG ATCC细胞
SUPB-15细胞系相关产品:CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
BJAB细胞系相关产品:COLO 320 DM细胞、SK-N-BE(2)-M17细胞、tdott细胞
QG56细胞系相关产品:EVSA/T细胞、U-343MG细胞、Neuro2a细胞
KRC Y细胞系相关产品:L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
JIMT-1细胞系相关产品:TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
Hs68细胞系相关产品:DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
NCI-H64 epithelioid cells人肺癌细胞系
H-1930细胞系相关产品:PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
NCIH187细胞系相关产品:J774.A1细胞、HO-8910细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、32D/cl3细胞、SW13细胞
HUT 28细胞系相关产品:NCIH1666细胞、HepG2细胞、H2170细胞
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