"NCI-H322 Thawing人肺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H322 Thawing人肺癌细胞系
细胞生长：贴壁
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H322 Thawing人肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近３００株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco２其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法５min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT１５, LS４１１和KM１２，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００ mm dish，一次最多加入５００ul，就足够了，一般我加３００ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过５min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态特性：详见细胞说明书
N2a细胞系相关产品：MPP89细胞、Gejiu Lung Carcinoma-82细胞、SNU16细胞
KYSE0520细胞系相关产品：Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
LTEP a2细胞系相关产品：P3X63 AG 8.653细胞、870细胞、Malme-3 M细胞
HLEB3细胞系相关产品：McA-RH 7777细胞、2780CP细胞、NRK-52E细胞
IOSE 29细胞系相关产品：293-EBNA1细胞、F442A细胞、Hx147细胞
H-596细胞系相关产品：H-661细胞、CAL62细胞、Tb1Lu细胞
R 2 C细胞系相关产品：CCD-841-CoTr细胞、MDA-468细胞、HCEC-12细胞
NCI-H526细胞系相关产品：P3-X63-Ag8.653细胞、HS-940-T细胞、MCMEC细胞
HCC-1359细胞系相关产品：SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
CAKI1细胞系相关产品：Anip 973细胞、159 PT细胞、HTR8svn细胞
KYSE0030细胞系相关产品：hOMF细胞、P31/Fujioka细胞、Human Epithelioma-2细胞
RN-c细胞系相关产品：BSC-1细胞、X63细胞、NTERA-2细胞
TFH细胞系相关产品：RAW 264.7细胞、NU-GC-2细胞、OCILY-10细胞
NCI-H719细胞系相关产品：Ca 9-22细胞、HLEC细胞、JG细胞
LLC PK1细胞系相关产品：U20S细胞、SKMEL1细胞、M07e细胞
GFP-Olig2细胞系相关产品：hTERT-RPE细胞、Tsup-1细胞、H-1435细胞
ARIP细胞系相关产品：AR4-2J细胞、H1666细胞、CFSC-2G细胞
NCI-H2066细胞系相关产品：Panc_08_13细胞、Hs606T细胞、3T3细胞
Tu-177细胞系相关产品：MUG-Chor1细胞、NIH:OVCAR-10细胞、WM2664细胞
R1610细胞系相关产品：H510细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、HUT 28细胞
SKNBE(2)细胞系相关产品：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
SKNBE(2)细胞系相关产品：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
CMT 93细胞系相关产品：FaDu细胞、Hs445细胞、P3/NS-1细胞
SKHEP-1细胞系相关产品：SNT-8细胞、NCI-H1436细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞
KHYG-1细胞系相关产品：Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
G422细胞系相关产品：SKGT2细胞、B16F1细胞、H-2170细胞
NCI-H322 Thawing人肺癌细胞系
COR L279细胞系相关产品：LAN-1细胞、BLO 11细胞、MDA-157细胞
McA-RH 8994细胞系相关产品：A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞
GM03569细胞系相关产品：UCLA NPA-87-1细胞、NCIH3255细胞、BV2细胞
Rat 2细胞系相关产品：AR4IP细胞、TEV-1细胞、253J B-V细胞
Walker256-TC细胞系相关产品：WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
SW1088细胞系相关产品：P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
hTERT RPE1细胞系相关产品：RPMI-8226细胞、MHCC97-H细胞、H-2108细胞
D341细胞系相关产品：hFOB1.19细胞、CAL-120细胞、KASUMI6细胞
MDA-MB-134-VI细胞系相关产品：MDA-MB436细胞、TGW-nu细胞、RAOEC细胞
Hs578Bst细胞系相关产品：RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
HF-91细胞系相关产品：TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
T-98G细胞系相关产品：COLO 320DM细胞、TC7细胞、MV-522细胞
H-2330细胞系相关产品：Soleus clone 8细胞、RL-952细胞、HEK293FT细胞
SP2细胞系相关产品：CCD1095Sk细胞、SW 13细胞、HPB-ALL细胞
SKNBE(2)细胞系相关产品：786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
BHP 10-3细胞系相关产品：W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
NIE 115细胞系相关产品：B16-F10-BL6细胞、Bac1 2F5细胞、NCIH1395细胞
SNU-886细胞系相关产品：SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞
HUT-226细胞系相关产品：RCC23细胞、COLO-699细胞、OVCAR10细胞
MDCKII细胞系相关产品：NCI-H774细胞、EoL-1-cell细胞、HCE细胞
CEF细胞系相关产品：Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
TE-7细胞系相关产品：Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞
526 mel细胞系相关产品：RTE细胞、293-EBNA细胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞
NCIH2291细胞系相关产品：Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞
Balb/c3T3细胞系相关产品：IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
MX1细胞系相关产品：BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
ABC1细胞系相关产品：Hs-852-T细胞、Sci-1细胞、R1800[RA]细胞
OCI Ly3细胞系相关产品：Tokyo Medical and Dental university 8细胞、MDAMB436细胞、CESS细胞
Jurkat细胞系相关产品：Pt-K1细胞、ACC2细胞、mRMEC细胞
H2135细胞系相关产品：HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞
P30-OHKUBO细胞系相关产品：BALB/3T3 (clone A31)细胞、SW13细胞、Renal Carcinoma细胞
NCIH1651细胞系相关产品：KG-1细胞、HuT 78细胞、NCIH1792细胞
NCI-H322 Thawing人肺癌细胞系
HPAF-I细胞系相关产品：KM.12细胞、HC11 Mammary Epithelium细胞、Hs 832(C).T细胞
CT26-clone 25细胞系相关产品：MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
HB611细胞系相关产品：HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB（HCF）细胞
SUM190PT细胞系相关产品：PLA-801C细胞、MLE 12细胞、NOMO1细胞
RD-ES细胞系相关产品：BSC1细胞、H-810细胞、OCI-AML-4细胞
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
B6Tert-1细胞系相关产品：CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞
GC-2细胞系相关产品：OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞系相关产品：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
1.1B4细胞系相关产品：LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞
CWR22-R1细胞系相关产品：Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞
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