"WERI-Rb-1 Thawing人视网膜母细胞瘤细胞系
细胞背景资料:WERI-Rb-I细胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。 细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 扫描电镜显示在表面囊泡,板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。 细胞分化研究,肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。
细胞形态:上皮细胞样
WERI-Rb-1 Thawing人视网膜母细胞瘤细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
WERI-Rb-1 Thawing人视网膜母细胞瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液:小心吸出旧培养液,用PBS清洗(冲洗),加入适量消化液(胰蛋白酶液),注意消化液的量以盖住细胞,消化温度是37℃;2)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度;(3)吸弃消化液加入培养液:弃去胰蛋白酶液,注意更换吸管,加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬:用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液;2)吸细胞悬液入离心管:将细胞悬液吸入10ml离心管中;3)平衡离心:平衡后将离心管放入台式离心机中,以1000转/分钟离心6-8分钟;4)弃上清液,加入新培养液:弃去上清液,加入2ml培养液,用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察细胞量,必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长,传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。最后要做好标记;2)分装:将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中,加入适量培养基旋紧瓶盖;3)继续培养:用酒精棉球擦拭培养瓶,适当旋松瓶盖,放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
细胞形态特性:圆形细胞聚集成葡萄状
OCI AML5细胞系相关产品:H-1693细胞、Hs-688A-T细胞、X63Ag8.653细胞
Hs870T细胞系相关产品:JG细胞、NCI-H748细胞、SK-MEL-1细胞
AM-38细胞系相关产品:NRK52E细胞、EBNA-293细胞、HN-6细胞
LUDLU 1细胞系相关产品:HCC9204细胞、CCD841CoTr细胞、NPC-TW-039细胞
TGW-nu细胞系相关产品:SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞
Pro-Lec1.3C细胞系相关产品:3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
IHHA-1细胞系相关产品:G402细胞、BEL 7405细胞、TE-32细胞
SK N SH细胞系相关产品:MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
Monomac-1细胞系相关产品:H2228细胞、Panc 10.05细胞、SUM190细胞
LP1细胞系相关产品:SW480细胞、HCC 94细胞、AML12细胞
WSUDLCL2细胞系相关产品:CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞
NCl-H157细胞系相关产品:BC-027细胞、HITT15细胞、MDA-134细胞
A-549细胞系相关产品:MDAMB468细胞、HCC1937细胞、P30-OHK细胞
SK-RC-20细胞系相关产品:CT 26细胞、L 1210细胞、TE 32.T细胞
CHO细胞系相关产品:MT-2细胞、T98细胞、U-118 MG细胞
Vero C1008细胞系相关产品:COLO 206F细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞
IMR 32细胞系相关产品:RenCa细胞、MDA-MB-134 VI细胞、H1048细胞
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HCC-2185细胞系相关产品:hTERT RPE-1细胞、SU-DHL-8细胞、KYSE140细胞
MS 751细胞系相关产品:OVCA5细胞、BALB 3T3 clone A31细胞、NCI-H520细胞
TE354.T细胞系相关产品:S.B.细胞、HCC44细胞、RS1细胞
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Farage Original Line细胞系相关产品:IOSE-Van细胞、HO1N1细胞、HEL 299细胞
SK-MEL3细胞系相关产品:D283MED细胞、MDA-MB231细胞、PaTu 8988s细胞
PK 15细胞系相关产品:MDCC-MSB1细胞、HCC95细胞、Panc 3.27细胞
PC3细胞系相关产品:MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
WERI-Rb-1 Thawing人视网膜母细胞瘤细胞系
NCI-H64细胞系相关产品:HepaRG细胞、D-324 Med细胞、McA-RH7777细胞
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NCI660细胞系相关产品:87 MG细胞、NCI-H23细胞、MV 4;11细胞
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BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品:NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
H2141细胞系相关产品:Reuber H-35细胞、LP-1细胞、NCI-Hut 125细胞
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Centre Antoine Lacassagne-62细胞系相关产品:MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞
SACC83细胞系相关产品:BMSCs(mBMSCs)细胞、MLMA细胞、SF17细胞
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SHSY5Y细胞系相关产品:H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞
WERI-Rb-1 Thawing人视网膜母细胞瘤细胞系
870细胞系相关产品:H1650细胞、BTI-Tn5B14细胞、EFO 27细胞
HCC15细胞系相关产品:FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
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RH8994细胞系相关产品:SVGp12细胞、Opossum Kidney细胞、NCI-H3255细胞
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