"GP2d Thawing人结肠癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
GP2d Thawing人结肠癌细胞系
细胞生长:贴壁
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2—1:3传代,每周换液2—3次
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
GP2d Thawing人结肠癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
很多朋友讨论细胞培养问题,见到很多很好的经验总结,这里说一些我个人的经验,因为一些比较特殊的原因,我自己培养接触过近300种细胞,常用于做实验的,累积有百余种,可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题,并不是因为细胞消化最重要,而是近期看到大家频繁讨论这个话题,我就抛砖引玉,下面几点拙见,可能与其它朋友总结的一些经验有点出入,仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,总结下来,细胞培养中消化很重要,但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要),关键所在是细胞来源,血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题,很多时候bottleneck没有找到,虽然通过其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作,总觉得自己没有经验,而忽视试剂,溶液尤其是细胞的质量,后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
细胞形态特性:上皮细胞
OCLY8细胞系相关产品:PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞
WRL-68细胞系相关产品:LS411细胞、MeT-5A细胞、SUDHL-5细胞
H295细胞系相关产品:T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞
SNU-601细胞系相关产品:NT2/D1细胞、PANC-03-27细胞、DSL-6A-C1细胞
REC1细胞系相关产品:MKN-7细胞、HEMCSS细胞、CEM clone 7细胞
U-266细胞系相关产品:EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
RD 2细胞系相关产品:SACCLM细胞、PANC-10-05细胞、COLO-HSR细胞
H748细胞系相关产品:MJ细胞、H-2009细胞、CAL 27细胞
NCI-H1734细胞系相关产品:IEC-6细胞、SKO-007细胞、RPE1细胞
NCIN87细胞系相关产品:H1876细胞、NCIH841细胞、NCI-H2405细胞
RK-13细胞系相关产品:CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
LAD-2细胞系相关产品:293FT细胞、PLC-PRF-5细胞、TB1 Lu细胞
A.704细胞系相关产品:HEK293-EBNA细胞、16HBE140细胞、HSC-2细胞
ECC12细胞系相关产品:HEK-EBNA细胞、U-118 MG细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞
CV-1细胞系相关产品:CCD 1112SK细胞、P 3 HR 1细胞、U343细胞
HCT 116细胞系相关产品:H1694细胞、MES-13细胞、EA.Hy926细胞
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品:A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
LS-174T细胞系相关产品:H4-II-EC3细胞、NCIH1869细胞、SKCol1细胞
Mv.1.Lu细胞系相关产品:YAC细胞、BC-027细胞、LICCF细胞
PNEC30细胞系相关产品:Ly7细胞、FHC细胞、BCPAP细胞
L-M(TK-)细胞系相关产品:GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
Jurkat clone A3细胞系相关产品:LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
NCIH2052细胞系相关产品:G361mel细胞、A10细胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞
Nb2a细胞系相关产品:CEM clone 7细胞、PIGI细胞、Kato-III细胞
T-ALL 1细胞系相关产品:ZR75-30细胞、NUGC-3细胞、OCI-Ly 19细胞
IPLB-Sf21-AE细胞系相关产品:SNU1细胞、H-1648细胞、MT-2J细胞
GP2d Thawing人结肠癌细胞系
RPMI1846细胞系相关产品:KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞
HT-29细胞系相关产品:HS578细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、HcerEpic细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞系相关产品:8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
3T3 J2细胞系相关产品:Henrietta Lacks cells细胞、RPMI 8402细胞、G-401细胞
ML-2细胞系相关产品:CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
NS-1-Ag4-1细胞系相关产品:H661细胞、Tb1Lu细胞、OUMS27细胞
LSC-1细胞系相关产品:NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
Karpas-422细胞系相关产品:Colon 38细胞、T.T细胞、Caco-2/ATCC细胞
Homo sapiens No. 578, breast cells细胞系相关产品:TMK-1细胞、Ramos.2G6.4C10细胞、COLO 206F细胞
Anip[973]细胞系相关产品:B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
Wien-133细胞系相关产品:NCI-322细胞、NL20细胞、NCIH2030细胞
GC-1 spg细胞系相关产品:NCI-H3255细胞、CHL-CL-11细胞、NMC-G1细胞
UO.31细胞系相关产品:MDA-MB-134 VI细胞、GB-1细胞、NBL-1细胞
A375.S2细胞系相关产品:DMS-153细胞、NH6细胞、NOZAWA细胞
Ca759细胞系相关产品:130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
SJCRH30细胞系相关产品:SBC-3细胞、RCC-10RGB细胞、NCI660细胞
HOP92细胞系相关产品:MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞
MKN-74细胞系相关产品:RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞
H596细胞系相关产品:GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞
201T细胞系相关产品:Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、KALS-1细胞、MDBK (NBL-1)细胞
GC-1 spg细胞系相关产品:NCI-H3255细胞、CHL-CL-11细胞、NMC-G1细胞
Hca-F细胞系相关产品:ARO81细胞、RASMCs细胞、SK Mel 2细胞
GM02219D细胞系相关产品:RMa-bm细胞、WSU-DLCL2细胞、HFT8810细胞
C918细胞系相关产品:BNL CL.2细胞、HCT-15细胞、MDA435细胞
KU-812细胞系相关产品:PC14细胞、2008细胞、NKT细胞
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
SCC090细胞系相关产品:A673细胞、MOLM13细胞、Lewis Lung细胞
HCA7细胞系相关产品:CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
ES-2细胞系相关产品:OCI/AML-2细胞、GMK,BSC-1细胞、TOV-112细胞
JTC-28细胞系相关产品:G 292 Clone A 141B1细胞、HSC2细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞
SCC-15细胞系相关产品:MKN 28细胞、SK-MEL-1细胞、OB2细胞
H-209细胞系相关产品:253J-BV细胞、UCLA RO-81A-1细胞、KS-1 [Human glioblastoma]细胞
JROECL33细胞系相关产品:LS-411N细胞、HEK AD293细胞、OCI-AML5细胞
GP2d Thawing人结肠癌细胞系
KRC-Y细胞系相关产品:Human Foreskin Fibroblast细胞、EAC细胞、Y3M细胞
FRO81-2细胞系相关产品:RIN-m细胞、SW1088细胞、NCI-H196细胞
PCI:SG231细胞系相关产品:NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
OV-90细胞系相关产品:P3JHR-1细胞、RK-13细胞、OK-WT细胞
NCIH526细胞系相关产品:Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞
X63.Ag8.653细胞系相关产品:NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
32D:cl3细胞系相关产品:Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
H-2405细胞系相关产品:Lu-99A细胞、WiDr细胞、WM115F细胞
McArdle RH-7777细胞系相关产品:WB F344细胞、786.O细胞、OVCAR-420细胞
CMEC/D3细胞系相关产品:DB细胞、GM00215A细胞、FBHE细胞
C33细胞系相关产品:2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞
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