"HCC1419 Thawing人乳腺导管癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
HCC1419 Thawing人乳腺导管癌细胞系
细胞生长:贴壁
接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜,血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(1200rpm,5min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC1419 Thawing人乳腺导管癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
【悬浮型细胞的传代操作】1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm 5分钟;2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。【注意事项】1)严格的无菌操作;2)适度消化:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。附:EDTA(0.02%四乙酸二钠)消化液配方:EDTA 0.20g,NaCl 8.00g,KCl 0.20g,KH2PO4 0.02g,葡萄糖 2.00g,0.5%红4ml,加入蒸馏水定容至1000ml。10磅20min高压灭菌,使用时调节PH值到7.4。注意EDTA不能被血清中和,使用后培养瓶要彻底清洗,否则再培养时细胞容易脱壁。
细胞形态特性:上皮样
ARO81-1细胞系相关产品:IBRS2细胞、Bowes melanoma cells细胞、CoCL2细胞
DB细胞系相关产品:RGB细胞、NBL-3细胞、HEL299细胞
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CEF细胞系相关产品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
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HCC1419 Thawing人乳腺导管癌细胞系
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HCC1419 Thawing人乳腺导管癌细胞系
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