"UACC-812 Thawing人乳腺导管瘤细胞系
细胞背景资料:该细胞是由Liebovitz A等于1986年从一名43岁的白人女性乳腺导管癌患者的乳腺切除肿瘤组织中分离建立的;手术前该病人曾接受过广泛的化疗。该细胞HER-2/neu癌基因序列有15倍的扩增;雌激素受体ER、孕激素受体PR和糖蛋白P阴性。
细胞形态:上皮细胞样
UACC-812 Thawing人乳腺导管瘤细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3传代;5-7天1次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
UACC-812 Thawing人乳腺导管瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞冻存知识普及:细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。 采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。
细胞形态特性:上皮样
SU4细胞系相关产品:NW38细胞、MCA-38细胞、CAL-39细胞
GM637A细胞系相关产品:HO-8910 PM细胞、686LN-M4e细胞、Hs 746.T细胞
DI TNC1细胞系相关产品:H-2172细胞、HREC细胞、ATDC5细胞
AC16 [Human hybrid]细胞系相关产品:SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
HCC-1438细胞系相关产品:LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞
S-16细胞系相关产品:Hs578Bst细胞、Vero 76 clone E-6细胞、QGY 7701细胞
CL-34细胞系相关产品:MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
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UACC-812 Thawing人乳腺导管瘤细胞系
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RL952细胞系相关产品:MV-4:11细胞、IA-LM细胞、Sf-21细胞
UACC-812 Thawing人乳腺导管瘤细胞系
Panc10.05细胞系相关产品:MUGCHOR1细胞、MLE-12细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞
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B16-F10细胞系相关产品:Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
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K7M2细胞系相关产品:GM03569D细胞、Pro-Lec1.3C细胞、NCI-H1092细胞
RGC6细胞系相关产品:SF-295细胞、MFE 296细胞、KYSE 180细胞
G402细胞系相关产品:MOLP2细胞、TE353.SK细胞、PANC403细胞
MARC145细胞系相关产品:FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞
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