"M059J Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
M059J Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
细胞生长:贴壁
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:6-1:8传代;每周换液2-3次。
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
M059J Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代培养(消化法)标准操作规程【原理】细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。【材料和试剂】1)无菌生理缓冲液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分装于15 ml无菌离心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回温;3)新鲜培养基;4)无菌吸管/离心管/培养瓶【传代前准备操作】1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热;2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染;4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;5)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶;6)取出预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内;7)从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞;8)打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
细胞形态特性:成纤维细胞
C12细胞系相关产品:DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
6-T CEM细胞系相关产品:1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞
AG06814-J细胞系相关产品:BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞
KM-H2细胞系相关产品:HMC-1细胞、CaSki细胞、KP-2细胞
CHP-100细胞系相关产品:PC9细胞、CAL-33细胞、HPDE6c7细胞
NCI-HUT-292细胞系相关产品:NCIH2291细胞、H322T细胞、SUDHL4细胞
KYSE140细胞系相关产品:H1573细胞、BJ1细胞、H1299细胞
HBVP细胞系相关产品:NCIH1793细胞、Panc-8_13细胞、Reuber H35细胞
H-128细胞系相关产品:NCI-H125细胞、UO-31细胞、H-9细胞
COLO-HSR细胞系相关产品:H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞
Human Liver-7702细胞系相关产品:JiyoyeP-2003细胞、ATDC5细胞、LICR-HN-6细胞
NS-I/1细胞系相关产品:3T3J2细胞、WRL-68细胞、SNUC2B细胞
MV4II细胞系相关产品:Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞、KYSE520细胞、HFLS-RA细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞系相关产品:AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞
NCIH2172细胞系相关产品:MCA-205细胞、F-81细胞、NCTC clone 1469细胞
C32 mel细胞系相关产品:MESSA-DX5细胞、Tn5 B1-4细胞、KYSE-150细胞
NGEC细胞系相关产品:Duke University 145细胞、TCam-2细胞、SF-763细胞
FHs74 Int细胞系相关产品:HRC-99细胞、Med 283细胞、LO2细胞
PL-9细胞系相关产品:IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
LC-2-Ad细胞系相关产品:SKRC 39细胞、HLFa细胞、WB-F344细胞
Oregon J-111细胞系相关产品:RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞
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MES-SA-Dx5细胞系相关产品:CAL-39细胞、3T3细胞、38C13细胞
MDCK (NBL-2)细胞系相关产品:KMS-26细胞、As-PC1细胞、NCI-H69C细胞
SNU-C1细胞系相关产品:NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
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M059J Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
CMT93细胞系相关产品:SK-MEL-2细胞、HCS2/8细胞、SK.OV.3细胞
PTK 1细胞系相关产品:Medical Research Council cell strain-9细胞、SKRC-42细胞、SHI-1细胞
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COLO-829细胞系相关产品:A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞
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SW-837细胞系相关产品:P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞
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GM05372E细胞系相关产品:SNU423细胞、NBL-7细胞、L5178YR细胞
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WSU-DLCL(2)细胞系相关产品:MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞
ssMCF-7细胞系相关产品:NCI-SNU-C1细胞、NCI.H522细胞、AZ 521细胞
S-16细胞系相关产品:Hs578Bst细胞、Vero 76 clone E-6细胞、QGY 7701细胞
OCM-1A细胞系相关产品:A.704细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、OCILY3细胞
RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
RL-95-2细胞系相关产品:SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞
NCIH1693细胞系相关产品:C4-2 B细胞、Metastatic Variant-522细胞、COLO-320DM细胞
KM12-SM细胞系相关产品:143B TK-细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞、HLFa细胞
RMC-1细胞系相关产品:VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞
WM 239A细胞系相关产品:WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
M059J Thawing人脑神经胶质瘤细胞系
HEL细胞系相关产品:OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞
NCI-Hut 125细胞系相关产品:R1800[RA]细胞、NMCG-1细胞、Strain V细胞
SK HEP 01细胞系相关产品:HcaF细胞、Wien-133细胞、CAMA-1细胞
C12细胞系相关产品:DLM8细胞、TE13细胞、RPMI-8226细胞
QGY 7701细胞系相关产品:NCI H23细胞、HOPC细胞、MS1细胞
NCIH2591细胞系相关产品:KS-SLK细胞、Mouse Colon 38细胞、Meat Animal Research Center-145细胞
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C3H 10T1/2细胞系相关产品:CA 46细胞、H2126细胞、HCC44细胞
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Los Angeles Prostate Cancer-4细胞系相关产品:SF295细胞、HKBML细胞、HRVEC细胞
Caki-2细胞系相关产品:SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞
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