"NH-6 Thawing人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
NH-6 Thawing人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NH-6 Thawing人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性:成纤维细胞
IALM细胞系相关产品:DMS273细胞、COS7细胞、C28/I2细胞
TGW-nu-1细胞系相关产品:Hep2细胞、SW 626细胞、SF-539 BT细胞
NFS-60细胞系相关产品:Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞
B-95-8细胞系相关产品:L-cell细胞、CAMA细胞、KTC-1细胞
P-19细胞系相关产品:HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞
746T细胞系相关产品:MNNG-HOS (Cl#5)细胞、PC3M-2B4细胞、VM-CUB1细胞
ABC-1细胞系相关产品:NCIH1869细胞、L 363细胞、NCIH1930细胞
LA-795细胞系相关产品:NR 8383细胞、HTori 3细胞、DHL6细胞
MOLT 3细胞系相关产品:BC-009细胞、OAW-42细胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞
CAL33细胞系相关产品:RPMI-1846细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、F-81细胞
Walker256细胞系相关产品:NCI-H1993细胞、kms 11细胞、624mel细胞
HuH-1细胞系相关产品:NIH:OVCAR-8细胞、DHL10细胞、NCI-H2291细胞
Mono Mac 6细胞系相关产品:CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
RSC96细胞系相关产品:PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞
MDA-MB453细胞系相关产品:CCD966SK细胞、HEC-1-B细胞、B16/BL6细胞
HeLa 229细胞系相关产品:NTERA-2cl.D1细胞、CHO-S细胞、BALL-1细胞
BEL7404细胞系相关产品:Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
SCL-2细胞系相关产品:BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
NCIH2122细胞系相关产品:LN-382细胞、OVTOKO细胞、NCIH1581细胞
TALL-104细胞系相关产品:Mino细胞、LTEP-sm 1细胞、HEK-293-EBNA细胞
H-2110细胞系相关产品:RCC 786-O细胞、Hs-729-T细胞、WC00079细胞
H-2110细胞系相关产品:RCC 786-O细胞、Hs-729-T细胞、WC00079细胞
CTLL-2细胞系相关产品:M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
LS-1034细胞系相关产品:NCI-H2107细胞、OsACL细胞、A 549细胞
LA-N-1细胞系相关产品:HOP-62细胞、B16F10细胞、CHG-5细胞
HCC1954BL细胞系相关产品:HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
NH-6 Thawing人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
MCCAR细胞系相关产品:TGHAVSMC细胞、U266 B1细胞、H1437细胞
NCIH889细胞系相关产品:LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
NCI-H2591细胞系相关产品:AML 12细胞、MC38细胞、Tu 212细胞
HFE-145细胞系相关产品:VSMC细胞、H1876细胞、T 84细胞
EL 4细胞系相关产品:L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞
JIMT-1细胞系相关产品:TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
Kit-225细胞系相关产品:PLC8024细胞、ST486细胞、NCIH209细胞
NCIH2029细胞系相关产品:16-HBE细胞、CFPAC1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞
HuPT4细胞系相关产品:MC-38细胞、Loucy细胞、SJSA1细胞
EVSA/T细胞系相关产品:OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
HEL-1细胞系相关产品:SCC 4细胞、Adeno-293细胞、H2052细胞
ACC-M细胞系相关产品:MCF10-A细胞、NFS60细胞、HN13细胞
NCI-H446细胞系相关产品:WM 451-Lu细胞、TALL1细胞、H-226细胞
KNS-62细胞系相关产品:UMNSAH-DF-1细胞、SK-N-BE(2)细胞、MNNG/HOS细胞
L-929细胞系相关产品:SN12PM6细胞、HANK-1细胞、Hs.27细胞
Hs746-T细胞系相关产品:DU 4475细胞、NCI-H2126细胞、KY-270细胞
Human Pancreatic Duct Epithelial细胞系相关产品:293H细胞、MDA415细胞、HPAC细胞
H345细胞系相关产品:NPC-TW039细胞、UMR106细胞、P3-X63-Ag8细胞
J 82细胞系相关产品:RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞
MDA-436细胞系相关产品:RKOAS451细胞、BNL-CL.2细胞、HUT28细胞
TK-10细胞系相关产品:Panc 03.27细胞、FLC-7细胞、Hep2细胞
Panc813细胞系相关产品:Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞
SCCVII细胞系相关产品:U-373MG ATCC细胞、Vx-2细胞、SiHa细胞
HL60细胞系相关产品:MT-3 [Human leukocytes]细胞、Farage细胞、MDA MB 436细胞
CTLL2细胞系相关产品:HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞
PL-12细胞系相关产品:MOLT-3细胞、NCIH747细胞、NIE-115细胞
NCI-H1993细胞系相关产品:PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞
CT26-clone 25细胞系相关产品:MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
PC-3细胞系相关产品:Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
HMy2.CIR细胞系相关产品:P3X63 Ag8.653细胞、OCI/AML3细胞、MC-38细胞
SKNBE2细胞系相关产品:PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞
SNU-119细胞系相关产品:HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
INS-1细胞系相关产品:BALL1细胞、22Rv1细胞、COLO 206细胞
NH-6 Thawing人肾上腺神经母细胞瘤细胞系
UCLA NPA-87-1细胞系相关产品:SNU-16细胞、MHCC97-L细胞、HCC78细胞
ASPC1细胞系相关产品:HT-144细胞、TE671/RD细胞、MFM223细胞
NCI-H1993细胞系相关产品:PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞
Colo-201细胞系相关产品:NK-92 MI细胞、BEL 7404细胞、Ha Fe细胞
J111细胞系相关产品:NCIH650细胞、Hs819T细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞
NCI-H1915细胞系相关产品:NCIADRRES细胞、NCI-H2195细胞、SK-N-BE-2c细胞
KALS1细胞系相关产品:NCIH209细胞、2BS细胞、Cloudman S91 melanoma细胞
Vero E-6细胞系相关产品:OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞
Buffalo Rat Liver-3A细胞系相关产品:VMRCLCD细胞、Hs940.T细胞、Verda reno细胞
BHK21细胞系相关产品:MHCC97细胞、H2135细胞、SU 86.86细胞
T 24细胞系相关产品:MDA-MB415细胞、ECC 10细胞、SUNE1细胞
"