"RTE Thawing大鼠气管上皮细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
RTE Thawing大鼠气管上皮细胞系
细胞生长:贴壁
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3传代,3-4天换液一次
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RTE Thawing大鼠气管上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
细胞形态特性:多角
DHL-5细胞系相关产品:KS-1 [Human glioblastoma]细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞、HCC0070细胞
Mono Mac6细胞系相关产品:138 MG细胞、KATOIII细胞、SCC-9细胞
HuH 6细胞系相关产品:UACC812细胞、OE19细胞、NCI-SNU-601细胞
MEF细胞系相关产品:OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
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CTLL-2细胞系相关产品:M14细胞、CemT4细胞、KLM-1细胞
KHYG-1细胞系相关产品:Y3细胞、GM00346细胞、BALB 3T3 clone A31细胞
Verda reno细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 1788细胞、H9c2(2-1)细胞、KG1A细胞
BT-483细胞系相关产品:C8161细胞、JROECL33细胞、U-87-MG细胞
CORL51细胞系相关产品:H1299细胞、CF Pac1细胞、Hs746-T细胞
University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞系相关产品:HT 1376.T细胞、OVCAR 433细胞、PANC 1005细胞
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MDA-PCa-2b细胞系相关产品:H-2110细胞、HSC细胞、NCI-H1373细胞
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RTE Thawing大鼠气管上皮细胞系
Hs729细胞系相关产品:Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
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HEK293F细胞系相关产品:SUDHL-2细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞、SupT1细胞
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Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞系相关产品:SCC VII细胞、OCI/AML5细胞、MONO-MAC 6细胞
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ROS17/2.8细胞系相关产品:WERI细胞、HOS TE 85细胞、SKNAS细胞
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NCI-H1672细胞系相关产品:BL2141细胞、Turbot Embryonic Cell line细胞、OVCA432_Bast细胞
RTE Thawing大鼠气管上皮细胞系
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CoCL2细胞系相关产品:HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、143BTK-细胞、J774A.1细胞
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