"MPC-11 Thawing小鼠浆细胞瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
MPC-11 Thawing小鼠浆细胞瘤细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中支原体、黑蛟虫、真菌的污染情况总结】支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢死去。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度;黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率;真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞培养过程中,总是会出现各种意想不到的问题,一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法,希望对细胞培养初学操作者有所帮助:1)观察细胞状态:贴壁细胞密度达到85-90%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态;2)细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液;3)细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化;4)细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min;5)细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存;6)细胞保藏:冻存管做好标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MPC-11 Thawing小鼠浆细胞瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
我常看到一个比较复杂的四步消化法,这个挺有意思,我也是次听说,应该是网友自己发展出来的方法,很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面,还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞,不需要胰酶孵育即可,只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好,这个视细胞而定。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好;比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),就以colon cancer为例,比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态特性:详见细胞说明书
EC-9706细胞系相关产品:LTEP-s细胞、BaF3细胞、G292细胞
Centre Antoine Lacassagne-51细胞系相关产品:LWnt-3A细胞、HT 1197.T细胞、SRA01/04细胞
SK-N-MC细胞系相关产品:Panc-02细胞、TE354T细胞、MDA-MB231细胞
H2405细胞系相关产品:BALL-1细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞、P3 NS1 Ag4细胞
MM1细胞系相关产品:MV 4;11细胞、Tregs细胞、NIH-3T3细胞
OAW 42细胞系相关产品:RMG-I细胞、ME-180细胞、RPMI no 8226细胞
WIL2-S细胞系相关产品:COLO 824细胞、TH1细胞、HRPEpiC细胞
CAKI 2细胞系相关产品:RPMI-6666细胞、BNL 1MEA.7R.1细胞、CHL/IU细胞
alpha-TC1.6细胞系相关产品:Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞
UK Pan-1细胞系相关产品:HPMEC细胞、DAN-G细胞、RBE4细胞
IM 9细胞系相关产品:3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞
B16/F1细胞系相关产品:H345细胞、HEK293E细胞、NCIH1648细胞
BT-20细胞系相关产品:Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞
MFHL-2细胞系相关产品:Normal fibroblast-10细胞、KLN205细胞、H-2198细胞
Oka-C1细胞系相关产品:H-719细胞、SN12-PM6细胞、SKMEL28细胞
EOC 20细胞系相关产品:SK-N-BE(1)n细胞、BJ [Human fibroblast]细胞、NCI-H1648细胞
M059K细胞系相关产品:NMCG1细胞、C-Lu65细胞、M07e细胞
Bx-PC3细胞系相关产品:Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞
NCI-H2291细胞系相关产品:NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
H-1666细胞系相关产品:OCI-AML-2细胞、BE(2)M-17细胞、HCC1428细胞
J774A.1细胞系相关产品:32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
J774A.1细胞系相关产品:32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
GM05384细胞系相关产品:RWPE1细胞、MCF10-A细胞、SW403细胞
DMS153细胞系相关产品:PL-9细胞、NCI-H1819细胞、SK-Mel1细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞系相关产品:H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
MPC-11 Thawing小鼠浆细胞瘤细胞系
H2030细胞系相关产品:Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞
A72细胞系相关产品:JROECL19细胞、P3/NS1/1-Ag4.1细胞、PF382细胞
LNT-229细胞系相关产品:H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
RM-1细胞系相关产品:ChaGo K-1细胞、HOP-92细胞、159PT细胞
PANC0327细胞系相关产品:3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
HOS/MNNG细胞系相关产品:H-2347细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞、JROECL19细胞
U-937细胞系相关产品:MPC 11细胞、JM细胞、Epstein-Barr-2细胞
FET细胞系相关产品:CTLL-2细胞、N-Tera-2细胞、H-1563细胞
YH-13细胞系相关产品:HEp-2细胞、NT2细胞、SHEE细胞
A9 (Hamprecht)细胞系相关产品:HLF细胞、CFSC-2G细胞、HEK293S细胞
NK10a细胞系相关产品:HuTu 80细胞、UMUC14细胞、SN12PM6细胞
NCI-H1694细胞系相关产品:H1048细胞、OKAC1细胞、NCI-H441细胞
H-719细胞系相关产品:Caki2细胞、H1155细胞、HuT 102细胞
OVCAR-433细胞系相关产品:MDA-MB-435 S细胞、BC3H1细胞、Hs578Bst细胞
RAOEC细胞系相关产品:KNS62细胞、WSU-HN13细胞、H-1355细胞
H-1944细胞系相关产品:SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞
G422细胞系相关产品:SKGT2细胞、B16F1细胞、H-2170细胞
IMR32细胞系相关产品:Tu686细胞、TE8细胞、266 Bl细胞
MZCRC1细胞系相关产品:PNT-1A细胞、YD15细胞、HLF-a细胞
NCI-H1693细胞系相关产品:MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞
SK-MEL 28细胞系相关产品:NS1-Ag4细胞、OSC19细胞、IHC-ST1细胞
J82细胞系相关产品:Y1细胞、SW-480细胞、CAKI 1细胞
McA-RH8994细胞系相关产品:LAN1细胞、PL-45细胞、Mel624细胞
A704细胞系相关产品:VP229细胞、HFLS细胞、Hs606细胞
KRC/Y细胞系相关产品:VMM5细胞、GT1-1细胞、P31/FUJ细胞
BHP 10-3细胞系相关产品:W133细胞、Jurkat clone A3细胞、RPMI 1788细胞
CMT64细胞系相关产品:LN382细胞、Ramos(RA1)细胞、LMH细胞
BJ1细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
HD11细胞系相关产品:GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞
WM-2664细胞系相关产品:Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞
HFL-1细胞系相关产品:CCRF-SB细胞、RCC10RGB细胞、H196细胞
BMSC/hBMSCs细胞系相关产品:NCI-SNU-398细胞、H-820细胞、251MG细胞
A375S2细胞系相关产品:H1341细胞、PANC 1005细胞、PNT1-a细胞
MPC-11 Thawing小鼠浆细胞瘤细胞系
Ball 1细胞系相关产品:KM-H2细胞、HMEC1细胞、GM03569B细胞
VMM5细胞系相关产品:NuTu 19细胞、HCC9724细胞、EM3细胞
H-4-II-E细胞系相关产品:8505C细胞、SNUC2A细胞、U-373-MG细胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS细胞系相关产品:OCLY8细胞、HCC-15细胞、HPAF细胞
Rin-M-5F细胞系相关产品:HuP-T3细胞、HCC-1806细胞、EOC-20细胞
GM3569细胞系相关产品:P3.NS-1/1.Ag4.1细胞、MDA-MB361细胞、KNS-81细胞
HNE-3细胞系相关产品:SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞
NCI H69细胞系相关产品:SU.86.86细胞、CAL51细胞、SNU-387细胞
A-9细胞系相关产品:LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞
HT-1080细胞系相关产品:AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞
Mia PACA 2细胞系相关产品:U118细胞、Ramos 1细胞、GM06141B细胞
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