"B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
细胞背景资料:B16-F10是B16-F0的亚系。
细胞形态:上皮细胞样
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长:贴壁
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:1)冷冻时细胞密度过低:推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中;2)不适当的冷冻过程:推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:1)培养瓶的大小:一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从T75培养瓶转移到2或3个T25培养瓶中;2)细胞密度过低:通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化;什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备100%的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性:详见细胞说明书
NH6细胞系相关产品:MonoMac6细胞、WERI细胞、HDQ-P1细胞
IGROV-1细胞系相关产品:G361细胞、PC-9/GR细胞、RPE-1细胞
U-87-MG细胞系相关产品:MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
CHO-K1细胞系相关产品:V 79细胞、MCF 7细胞、NCI-HUT-69细胞
TOV21G细胞系相关产品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
RPE-1细胞系相关产品:Human Hepatocyte Line 5细胞、H-1793细胞、HFLS细胞
HCT116细胞系相关产品:Rat podocyte细胞、MKN 45细胞、SK-N-BE(2)C细胞
MARC-145细胞系相关产品:MC-26细胞、HUVEC细胞、HOMEC细胞
G292细胞系相关产品:Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
P3X63 AG 8.653细胞系相关产品:C33细胞、P-2003细胞、PANC-10-05细胞
2V6.11细胞系相关产品:IPLB-Sf21AE细胞、NCIH1299细胞、WC00044细胞
HO8910PM细胞系相关产品:TGBC-11-TKB细胞、SK.MEL.5细胞、NCI-H220细胞
HCC4006细胞系相关产品:KAT-5细胞、HCC-94细胞、H-1184细胞
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H-2286细胞系相关产品:WERI Rb-1细胞、H2347细胞、CCD19Lu细胞
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MN60细胞系相关产品:COLO-679细胞、VMRCRCZ细胞、WISH细胞
OE-21细胞系相关产品:Colon26细胞、Jurkat E6.1细胞、H250细胞
PK-15细胞系相关产品:PIGI细胞、SK Mel28细胞、GB1细胞
MC9细胞系相关产品:CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
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B 95.8细胞系相关产品:NS20Y细胞、KBM5细胞、HFE-145细胞
SJRH-30细胞系相关产品:MC3T3-E1 Subclone 14细胞、746T细胞、SuDHL 4细胞
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Karpas-299细胞系相关产品:HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
NS1-1 Ag4.1细胞系相关产品:H-1238细胞、PANC1005细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞
MT-2J细胞系相关产品:SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞
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KTC1细胞系相关产品:VMM39细胞、3T3 Swiss Albino细胞、HCC-94细胞
Hs-695-T细胞系相关产品:H226细胞、JB6 Cl 30细胞、OVCA-420细胞
BEP2D细胞系相关产品:HuT102细胞、HFL-I细胞、LS-1034细胞
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H-460细胞系相关产品:GLC-82细胞、RT-4细胞、B16F0细胞
NCIH2452细胞系相关产品:B-3细胞、NMCG1细胞、HPMEC细胞
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McA-RH 7777细胞系相关产品:H157细胞、Gerner 7666细胞、COR-L279细胞
DU 4475细胞系相关产品:WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞
G-292 clone A141B1细胞系相关产品:EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞系相关产品:BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
Hopkins-92细胞系相关产品:SKBr3细胞、H1650细胞、Panc 4.03细胞
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B16-F10--RED细胞系相关产品:3T3(A31)细胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞、HO-8910PM细胞
U-373-MG细胞系相关产品:MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
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PY8119细胞系相关产品:Lu-165细胞、LN382细胞、BC-022细胞
2BS细胞系相关产品:alphaTC1 Clone 6细胞、NCI-H2030细胞、H69细胞
U266S细胞系相关产品:MC3T3-E1细胞、NCI-H2198细胞、SNU-449细胞
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B16-F10 Thawing小鼠黑色素瘤细胞系
87MG细胞系相关产品:BJA-B-1细胞、SK-RC 42细胞、GA10细胞
WEHI-231细胞系相关产品:NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
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HNSC细胞系相关产品:HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
MuM-2C细胞系相关产品:Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
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MB49细胞系相关产品:HOC细胞、SF-763细胞、Mhh-Call 2细胞
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