"CFSC-2G Thawing鼠肝星形细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
CFSC-2G Thawing鼠肝星形细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
细胞培养更好经验详解:1)收到细胞,首先要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。 由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。2)当通过上一步的观察,细胞初步没有问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。 细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。3)如果经步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,次处理也可以依照第二种情况。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CFSC-2G Thawing鼠肝星形细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
我常看到一个比较复杂的四步消化法,这个挺有意思,我也是次听说,应该是网友自己发展出来的方法,很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面,还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞,不需要胰酶孵育即可,只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好,这个视细胞而定。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好;比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),就以colon cancer为例,比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态特性:详见细胞说明书
T 98 G细胞系相关产品:FHs74Int细胞、MLA144细胞、MPC-83细胞
CV 1细胞系相关产品:hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
SK-MEL-MeWo细胞系相关产品:SP2-0-Ag14细胞、Ly8细胞、NEC细胞
786-O细胞系相关产品:P-19细胞、Y3M细胞、KU812-F细胞
Lec1细胞系相关产品:ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
GLAG-66细胞系相关产品:Molm 13细胞、RPMI7666细胞、SV-HUC-1细胞
JHH-7细胞系相关产品:GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞
EM3细胞系相关产品:WISH细胞、BRL3A细胞、Mino细胞
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
PBMC细胞系相关产品:kms 11细胞、LLC-MK-2细胞、526-mel细胞
PC-3M 2B4细胞系相关产品:KYSE510细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞、Transformed Human Liver Epithelial-2细胞
Walker/LLC-WRC 256细胞系相关产品:GM05384细胞、Panc8.13细胞、HCT 8细胞
BTI-Tn-5B1-4细胞系相关产品:RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞
D283细胞系相关产品:SKMEL3细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞、Det 562细胞
Jurkat细胞系相关产品:Pt-K1细胞、LL2细胞、HEK-293 c18细胞
OCI/AML-2细胞系相关产品:HCC94细胞、MN-60细胞、MES-SA细胞
451-LU细胞系相关产品:U-138 MG细胞、LY-R细胞、HOP92细胞
NK92-MI细胞系相关产品:MPP 89细胞、CHP 126细胞、BRL3A细胞
DC 2.4细胞系相关产品:526细胞、HFLS-OA细胞、NBL-S细胞
COLO-HSR细胞系相关产品:H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞
Ca9-22细胞系相关产品:C643细胞、MV-4-11细胞、NCIH128细胞
LNCaP clone FGC细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-51细胞、H2330细胞、JKT-1细胞
IR983F细胞系相关产品:NK-92细胞、32D clone 3细胞、EL-4细胞
Normal Rat Kidney-52E细胞系相关产品:U-138-MG细胞、MDA-MB157细胞、Wayne State University-Head and Neck 13细胞
HBE135-E6E7细胞系相关产品:WERIRb1细胞、NFS 60细胞、GalK1细胞
Hs 606细胞系相关产品:L132细胞、NCI-H2081细胞、NTERA-2 clone D1细胞
CFSC-2G Thawing鼠肝星形细胞系
HFTF细胞系相关产品:HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
NCI-H719细胞系相关产品:Ca 9-22细胞、HLEC细胞、JG细胞
4-1st细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5细胞、HL 60细胞、NCI H548细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品:P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
Chinese Hamster Ovary细胞系相关产品:Hs934T细胞、SKBR-3细胞、MGC-803细胞
H-719细胞系相关产品:Caki2细胞、H1155细胞、HuT 102细胞
HPAF-2细胞系相关产品:L Wnt-3A细胞、NCI-H2107细胞、HMC3细胞
32D:cl3细胞系相关产品:Farage OL细胞、LS174细胞、HepG2/C3A细胞
Hs839.T细胞系相关产品:SCC154细胞、VMM39细胞、Becker细胞
HFLS-RA细胞系相关产品:Evsa-T细胞、J774 A.1细胞、RAW 264.7细胞
HT 144细胞系相关产品:CNE1-LUC细胞、UMC-11细胞、PC-9细胞
MLE 12细胞系相关产品:MLA144细胞、MDA MB 453细胞、GM03569细胞
NCI-H920细胞系相关产品:HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞
Panc 3.27细胞系相关产品:J774细胞、P3JHR-1细胞、HS852.T细胞
HEM细胞系相关产品:SW 1116细胞、KASUMI6细胞、NCI-446细胞
CA-OV-3细胞系相关产品:HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞
TCMK1细胞系相关产品:CMT.64细胞、OCI Ly1细胞、H-23细胞
CHO-ori细胞系相关产品:FL 62891细胞、X63-Ag 8.6.5.3细胞、HCASMC细胞
Immortalized Human Hepatocytes细胞系相关产品:H-7721细胞、H-774细胞、CaES-17细胞
DH-82细胞系相关产品:PANC-03-27细胞、CMT167细胞、BC-009细胞
JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
J 82细胞系相关产品:RK-13细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、REC细胞
BT-325细胞系相关产品:SNU601细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞、NCI-H87细胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).细胞系相关产品:OV1/P细胞、HFL细胞、RBSMC细胞
VERO C 1008细胞系相关产品:IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞
HCC-1395细胞系相关产品:SCaBER细胞、MOLP8细胞、HO1-N1细胞
MA-104细胞系相关产品:Rin-M-5F细胞、RT4-D6P2T细胞、UMR106细胞
MB39细胞系相关产品:Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
RSC-364细胞系相关产品:NCI-H-128细胞、KMBC细胞、MES-SA细胞
Medical Research Council cell strain-5细胞系相关产品:SupT1细胞、G 292 Clone A 141B1细胞、IR983F细胞
CEL细胞系相关产品:FCCH1024细胞、U266S细胞、H-2342细胞
BT 549细胞系相关产品:DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
L78细胞系相关产品:L929(NCTC)细胞、HEC-151细胞、MCF-12F细胞
CFSC-2G Thawing鼠肝星形细胞系
PLA801D细胞系相关产品:P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
MDA-MB 361细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
WTRL1细胞系相关产品:AAV-293细胞、H-920细胞、DanG细胞
3T3NIH细胞系相关产品:LX-2细胞、HCC1395细胞、OV1-P细胞
HEK 293-H细胞系相关产品:Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
Panc 2.03细胞系相关产品:CC-LP-1细胞、SNU-368细胞、SKML-28细胞
HA1800细胞系相关产品:HUSMC细胞、SUDHL-10细胞、K7M2-WT细胞
Line 522细胞系相关产品:H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞
H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
GM03570细胞系相关产品:Onda 11细胞、NIHOVCAR3细胞、Mouse Bladder Tumor line-2细胞
CAL 51细胞系相关产品:Bac 1.2F5细胞、Hs27细胞、L540细胞
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