"HEC-1-B Thawing人子宫内膜癌细胞系
细胞背景资料:该细胞是H.Kuramoto1968年分离的HEC-1-A细胞亚株。不同於HEC-A-1的是:该亚株在培养第135天到190天之间表现出稳定的生长周期,且重现扁平,与亲本细胞系相比更具铺路石式样。此外主要染色体组是亲本细胞的两倍。
细胞形态:上皮细胞样
HEC-1-B Thawing人子宫内膜癌细胞系
细胞生长:贴壁
细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式:T25培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。T25培养瓶:是用T25细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T25培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管:是用15ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T25中培养基取出装好备用(如果实验室没有T25培养瓶,可以暂时T75培养瓶,加入10-15ml培养基,建议10ml培养基,也可以使用T175培养瓶,加入50-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3传代,2-3天换液一次
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HEC-1-B Thawing人子宫内膜癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
很多朋友讨论细胞培养问题,见到很多很好的经验总结,这里说一些我个人的经验,因为一些比较特殊的原因,我自己培养接触过近300种细胞,常用于做实验的,累积有百余种,可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题,并不是因为细胞消化最重要,而是近期看到大家频繁讨论这个话题,我就抛砖引玉,下面几点拙见,可能与其它朋友总结的一些经验有点出入,仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,总结下来,细胞培养中消化很重要,但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要),关键所在是细胞来源,血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题,很多时候bottleneck没有找到,虽然通过其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作,总觉得自己没有经验,而忽视试剂,溶液尤其是细胞的质量,后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
细胞形态特性:上皮样
KP-N-RT-BM-1细胞系相关产品:OCIAML3细胞、KAT5细胞、578T细胞
LN 229细胞系相关产品:RBMVEC细胞、SUM 52PE细胞、COLO-679细胞
HRMC细胞系相关产品:Institute for Medical Research-90细胞、3T3-Swiss细胞、Hs852T细胞
SW-13细胞系相关产品:B35细胞、RH35细胞、MCF-7B细胞
RAW264细胞系相关产品:TYK-nu细胞、CD18细胞、HIEC6细胞
SUM 52细胞系相关产品:MDA415细胞、SU86-86细胞、SKRC-20细胞
PL9细胞系相关产品:Centre Antoine Lacassagne-78细胞、CAKI1细胞、MDA-MB-231-GFP细胞
Ku812F细胞系相关产品:159PT细胞、GC-2细胞、CD-18细胞
MCF-12F细胞系相关产品:COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
H1522细胞系相关产品:Swiss 3T3细胞、AML193细胞、CTLA4Ig-24细胞
HCC1954细胞系相关产品:MFE280细胞、A549-Taxol细胞、SKO3细胞
CAL148细胞系相关产品:Hs895T细胞、QG-56细胞、SKOV-433细胞
OCI-Ly07细胞系相关产品:MDA-175细胞、Nthy-ori 3-1细胞、U118MG细胞
MCF12A细胞系相关产品:EST50细胞、NCI-SNU-C2B细胞、GC-2细胞
Giant Cell Tumor细胞系相关产品:L- cell细胞、TOV-112细胞、K299细胞
SCC9细胞系相关产品:NCI-H2135细胞、NCI-H1734细胞、NCI-H2009细胞
639-V细胞系相关产品:PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
KYSE0520细胞系相关产品:Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
TKB-1细胞系相关产品:Human Embryo Lung-1细胞、AMC-HN-8细胞、KYSE270细胞
T-HEECs细胞系相关产品:QBI-HEK 293A细胞、MV4;11细胞、MDA134细胞
786-0细胞系相关产品:NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
786-0细胞系相关产品:NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
H774细胞系相关产品:IAR 20细胞、C28/I2细胞、Functional Liver Cell-7细胞
GFP-Olig2细胞系相关产品:hTERT-RPE细胞、AML 12细胞、NCIH1618细胞
OCIAML5细胞系相关产品:Leukemia 1210细胞、HS-294细胞、HEL-92-1-7细胞
NCI-SNU-1040细胞系相关产品:DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
HEC-1-B Thawing人子宫内膜癌细胞系
ONS-76细胞系相关产品:3D4/21细胞、SC细胞、KRC Y细胞
MCF-12A细胞系相关产品:LSC-1细胞、SKHEP-1细胞、EB-2细胞
F9细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
NCIH211细胞系相关产品:NIH:OVCAR-10细胞、MDA-361细胞、NCI-H740细胞
C2BBe1细胞系相关产品:PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
Centre Antoine Lacassagne-148细胞系相关产品:ARO-81细胞、A2058细胞、AdHek细胞
OUMS-23细胞系相关产品:210RCY3-Ag1.2.3细胞、SF 763细胞、COLO206F细胞
ESC-410细胞系相关产品:HOS-143B细胞、FOXNY细胞、HANK-1细胞
SKG IIIa细胞系相关产品:HS578T细胞、NIH:OVCAR-3细胞、WEHI 3细胞
L细胞系相关产品:PMVEC细胞、DU-4475细胞、NCI-SNU-668细胞
MM1-S细胞系相关产品:NR8383细胞、L-M (TK-)细胞、UMRC2细胞
BE2-M17细胞系相关产品:COLO680N细胞、CDC/EU.HMEC-1细胞、SW1222细胞
HUCCT1细胞系相关产品:Hs-343-T细胞、MT-3 [Human leukocytes]细胞、Bx-PC3细胞
alpha-TC1.6细胞系相关产品:Line 522细胞、MV 4;11细胞、Leydig细胞
PIEC细胞系相关产品:SK-SH-SY5Y细胞、GC-1 spg细胞、WiDr-TC细胞
Hs-578T细胞系相关产品:MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞系相关产品:HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
3T6细胞系相关产品:L cells细胞、alpha TC1-6细胞、OV 1063细胞
PC-3细胞系相关产品:Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
293/EBNA-1细胞系相关产品:SK_N_FI细胞、Ly3细胞、U2-OS细胞
MDA361细胞系相关产品:HCC0038细胞、RCC 786-O细胞、QG56细胞
RD细胞系相关产品:MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞
SCC90细胞系相关产品:COLO.205细胞、U-373MG ATCC细胞、W256细胞
SCL-2细胞系相关产品:BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
NCI-H1876细胞系相关产品:H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
NBL-7细胞系相关产品:KU 812F细胞、M14细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞
HELF细胞系相关产品:BAR-T细胞、MBT-2细胞、CAL-120细胞
SW 780细胞系相关产品:Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
NCIH1648细胞系相关产品:NRK-49F细胞、Hs343T细胞、NS-1细胞
MKN 28细胞系相关产品:AG06814-N细胞、RPMI #1846细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞
PANC0403细胞系相关产品:L-540细胞、RGE细胞、A704细胞
NCI-H69C细胞系相关产品:SK.MEL.28细胞、KNS42细胞、HEK;293细胞
SuDHL 10细胞系相关产品:Madin-Darby Canine Kidney细胞、CATHa细胞、SK-MEL 28细胞
HEC-1-B Thawing人子宫内膜癌细胞系
mIMCD3细胞系相关产品:BC-023细胞、CEM C7细胞、CNE-1细胞
P3/ag细胞系相关产品:HECCL-1细胞、NCI-HUT-292细胞、B-cell with DC Morphology细胞
MCFs细胞系相关产品:HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞
LA795细胞系相关产品:Vero from pool #76细胞、HLF-a细胞、OVCAR-5细胞
KATO 3细胞系相关产品:WTRL1细胞、L929细胞、HCC1438细胞
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MAntle cell VERona-1细胞系相关产品:CORL88细胞、PASMCS细胞、Tu686细胞
SNUC1细胞系相关产品:HSC3细胞、PY8119细胞、AML-EOL-1细胞
OEC33细胞系相关产品:ZR-75-1细胞、HPF细胞、Wien133细胞
KYSE 30细胞系相关产品:P3HR1细胞、EA.Hy926细胞、PCI-04B细胞
GCT细胞系相关产品:BRL-3A细胞、M1细胞、EFM-192B细胞
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