"HPAF-II Thawing人胰腺癌细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
HPAF-II Thawing人胰腺癌细胞系
细胞生长：贴壁
细胞接收操作说明：请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。本公司细胞发货有四种形式：T２５培养瓶(一般是贴壁细胞使用，悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多，当然，有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞，但是，长期经验来说，贴壁细胞容易发生形态变化，估计是细胞培养空间狭小，血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生)，个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用，主要是冬天天气冷，温度低于４℃的地方，都要考虑冻存细胞)。T２５培养瓶：是用T２５细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后，拆开包装T２５培养瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷７５%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用，如细胞密度高于８０%，可以直接消化传代，相反则加入５-６ml培养基放回培养箱继续培养即可。离心管：是用１５ml离心管发货的形式，只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入３７度培养箱平衡两小时以上，再处理细胞。首先将T２５中培养基取出装好备用(如果实验室没有T２５培养瓶，可以暂时T７５培养瓶，加入１０-１５ml培养基，建议１０ml培养基，也可以使用T１７５培养瓶，加入５０-６０ml培养基，培养瓶越大，需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话，不用大瓶子，先用小瓶子养起来再换大的，不然会长得很慢，严重的，会导致细胞死亡等危险)，平衡完成后，离心(１０００rpm，３min)收集细胞，弃上清，用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中，放回培养箱继续培养。干冰：是用本公司冻存液冻存细胞后，直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：２传代
细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法，希望对细胞培养初学操作者有所帮助：1)观察细胞状态：贴壁细胞密度达到85-90%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；2)细胞清洗：培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；3)细胞消化：将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；4)细胞离心：将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；5)细胞冻存：离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；6)细胞保藏：冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HPAF-II Thawing人胰腺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。
细胞形态特性：详见细胞说明书
H-727细胞系相关产品：293A细胞、U251细胞、PK-13细胞
Namalva细胞系相关产品：Nakata-1细胞、FF-WT-BJ细胞、Tca-83细胞
SK-RC 42细胞系相关产品：SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
SW-900细胞系相关产品：HD11细胞、Hs68细胞、AMO1细胞
OCI Ly1细胞系相关产品：NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
CEM-CCRF (CAMR)细胞系相关产品：H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞
NCI-H1703细胞系相关产品：LC1sq细胞、NH-6细胞、OVCAR3细胞
MCF10A细胞系相关产品：NCI-H647细胞、GP5d细胞、CV-1.K细胞
BrCL12细胞系相关产品：LM2-4175细胞、HM06.A1细胞、EOL1细胞
Large Cell Lung Cancer-103H细胞系相关产品：WPMY-1细胞、A2780CP细胞、NCI-SNU-423细胞
KPL4细胞系相关产品：GT1-1细胞、WML2细胞、ABC1细胞
MT-2J细胞系相关产品：SKNAS细胞、FUOV1细胞、293/EBNA细胞
SKRC-39细胞系相关产品：H1155细胞、SPDC-CCL141细胞、MOLT-3细胞
TE3A细胞系相关产品：U266B1细胞、HOSEpiC细胞、A172细胞
EJ细胞系相关产品：Hepa-RG细胞、HVSMC细胞、SKNBE-2细胞
NCI-H2141细胞系相关产品：KTA-7细胞、Panc2_03细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
COLO-824细胞系相关产品：Med 341细胞、Rat Skin 1细胞、M1细胞
PL-9细胞系相关产品：IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
Roswell Park Memorial Institute 1846细胞系相关产品：PLC PRF 5细胞、HuT-102细胞、GM02219细胞
IM 9细胞系相关产品：3T3 J2细胞、16HBEo-细胞、PANC 203细胞
SW-527细胞系相关产品：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
SW-527细胞系相关产品：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
HCC-1419细胞系相关产品：Adeno 293细胞、MCFs细胞、INS-1E细胞
DF-1细胞系相关产品：H1184细胞、UPCI:SCC090细胞、NCIH727细胞
HFTF细胞系相关产品：HeLa细胞、AX-Mel细胞、NCIH1048细胞
L-02细胞系相关产品：H4IIE细胞、H-2330细胞、ECC 12细胞
HPAF-II Thawing人胰腺癌细胞系
TCC Sup细胞系相关产品：Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
BIU-87/Adr细胞系相关产品：OVCA 432细胞、PF-382细胞、KYSE50细胞
HHL5细胞系相关产品：NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞
SKGIIIA细胞系相关产品：Strain L-929细胞、MDAMB415细胞、H1672细胞
NCI-157细胞系相关产品：KP-N-RT细胞、NCIH378细胞、HCC0038细胞
JKT-1细胞系相关产品：HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞
HT-144细胞系相关产品：RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞
LTEP-sm细胞系相关产品：NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
CaES-17细胞系相关产品：MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
SBC-3细胞系相关产品：HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
NIH/3T3细胞系相关产品：MDAPC2B细胞、MDA-MB 468细胞、MX-1细胞
HCC941122细胞系相关产品：NCI-H1963细胞、Blotchy fibroblast-11细胞、H-1793细胞
LWnt3A细胞系相关产品：NCI-H2195细胞、NCI-H2330细胞、SGC-7901细胞
SKMES细胞系相关产品：THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞
RPMI1846细胞系相关产品：KYSE50细胞、RSC-96细胞、HASMC细胞
HLE B-3细胞系相关产品：M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Ly1细胞、CZ-1细胞
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Hs-675-T细胞系相关产品：HO8910细胞、C4 I细胞、RPMI-8226S细胞
WM266细胞系相关产品：KE-39细胞、NTERA2-cloneD1细胞、293EBNA细胞
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H711细胞系相关产品：IMCD-3细胞、SW 982细胞、MGHU3细胞
H-647细胞系相关产品：Kit225/K6细胞、P3X63 AG 8.653细胞、NRK49F细胞
NCI.H226细胞系相关产品：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞
RS 4;11细胞系相关产品：MPC5细胞、H-1404细胞、D-341 Med细胞
NCIH2141细胞系相关产品：Large Cell Lung Cancer-103H细胞、BJAB-1细胞、MESSA-DX5细胞
JIMT1细胞系相关产品：SKMel-28细胞、CL40细胞、Calu-6细胞
HEK-293-FT细胞系相关产品：NP-69细胞、32D:cl3细胞、C3H/10T1/2-clone8细胞
EST81细胞系相关产品：HCC-1954细胞、WB-F344细胞、OVCAR.3细胞
Jurkat FHCRC细胞系相关产品：SCC-1395细胞、KMY1022细胞、SNK6细胞
J 111细胞系相关产品：NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
GM03320细胞系相关产品：SK.OV.3细胞、675T细胞、L-02细胞
HCC15细胞系相关产品：FRO81-2细胞、YD-38细胞、MOLT.4细胞
OSK-1细胞系相关产品：REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
HPAF-II Thawing人胰腺癌细胞系
RT 112细胞系相关产品：PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞
CEM-CCRF (CAMR)细胞系相关产品：H-358细胞、SKM-1细胞、Epstein-Barr-3细胞
SK-ChA1细胞系相关产品：Sc-1细胞、BetaTC6细胞、SCaBER细胞
JKT1细胞系相关产品：Hi-5细胞、PC3M-1E8细胞、CAL 120细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞系相关产品：GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
U251细胞系相关产品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、H-2444细胞、B16-F10-BL6细胞
NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞系相关产品：293GP细胞、KY70细胞、CHO-ori细胞
HCC-1954细胞系相关产品：CMECs细胞、P3-X63Ag8细胞、EST50细胞
MDA 435细胞系相关产品：SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞
NCIH1793细胞系相关产品：D-324 Med细胞、GM04154B细胞、NCIH82细胞
FDCP-1细胞系相关产品：M21细胞、HCC1599细胞、GT1-1细胞
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