"MDA-MB-415 Thawing人乳腺腺癌细胞系
细胞背景资料:这株细胞表达WNT7B癌基因。8168088].带瘤患者来自巴拉圭,虽然填报的是白人,但细胞表型存在G6PDA型,显示其属于混血。细胞株形成平展延伸的上皮细胞样,在电镜下呈现结节,伴随着延伸的微管和微板。不容易用胰酶消化。
细胞形态:上皮细胞样
MDA-MB-415 Thawing人乳腺腺癌细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中细菌、霉菌的污染情况总结】细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!可在培养液中加相应的抗生素处理;霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或D或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,制霉菌素或D或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞,将环境彻底消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化5-10分钟。1:2。4-5天长满。
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到最低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDA-MB-415 Thawing人乳腺腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
有关实验室细胞培养基知识普及:经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养;MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度;BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞;Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养;RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
细胞形态特性:上皮细胞
AG06814-J细胞系相关产品:BAC1.2F5细胞、Pt K2细胞、LWnt-3A细胞
HCC-1438细胞系相关产品:LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞
NCIH524细胞系相关产品:SDBMSC细胞、MDA-415细胞、Kit225细胞
PMVEC细胞系相关产品:BC3H1细胞、FM-88细胞、RMS1598细胞
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P3HR1细胞系相关产品:SNU119细胞、KYSE 450细胞、Clone 166细胞
Douglas Foster-1细胞系相关产品:NCI-H2227细胞、APRE-19细胞、NIH:OVCAR-3细胞
JB-6细胞系相关产品:H322细胞、NCIH740细胞、COLO 824细胞
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NFS60细胞系相关产品:HUT-125细胞、PLC PRF 5细胞、P1-Raji细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞系相关产品:H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
H1355细胞系相关产品:NBL-3细胞、SN-12C细胞、NCI-H250细胞
COS1细胞系相关产品:Pa14C细胞、H-1373细胞、YT细胞
aTC1-6细胞系相关产品:WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞
NCIH211细胞系相关产品:NIH:OVCAR-10细胞、P3-NS1/1Ag 4.1细胞、A375S2细胞
B16F1细胞系相关产品:870细胞、H2052_MM细胞、SK-N-BE(2)C细胞
D-283 Med细胞系相关产品:KALS1细胞、HCC1954 BL细胞、RA-FLSs细胞
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EA. hy 926细胞系相关产品:SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
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U266BL细胞系相关产品:HP615细胞、RMG1细胞、NOZ细胞
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RPMI no 8226细胞系相关产品:NCIH82细胞、KYSE-450细胞、ARH77细胞
MDA-MB-415 Thawing人乳腺腺癌细胞系
VSC4.1细胞系相关产品:UCH-1细胞、KE-37细胞、118 MG细胞
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MDA-MB-415 Thawing人乳腺腺癌细胞系
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WM239细胞系相关产品:GM03320D细胞、SNU-423细胞、TU 686细胞
NCI-H727细胞系相关产品:T-ALL 1细胞、NCI-H1993细胞、KG-1细胞
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Namalva细胞系相关产品:Nakata-1细胞、FF-WT-BJ细胞、Tca-83细胞
H-1404细胞系相关产品:RPMI.8226细胞、CCC-HSF-1细胞、HTR-8细胞
Calu 3细胞系相关产品:MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
HC-11细胞系相关产品:Hca-F细胞、BT-483细胞、KATO 3细胞
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