"SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌细胞系
细胞背景资料:这株细胞源自胸水。没有病毒颗粒。亚显微结构特征包括微丝和桥粒,肝糖原颗粒,大溶酶体,成束的细胞质纤丝。SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物。
细胞形态:上皮细胞样
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌细胞系
细胞生长:贴壁
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
有关实验室细胞培养基知识普及:经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养;MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度;BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞;Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养;RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
细胞形态特性:上皮样
PECAPJ34细胞系相关产品:BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
786-O RCC细胞系相关产品:SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞
MHCC-97细胞系相关产品:U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞
CEMx721.174.T2细胞系相关产品:Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞
JIMT细胞系相关产品:HECV细胞、OCILY19细胞、SUPB15细胞
KMB-17细胞系相关产品:TE354T细胞、IOSE-80细胞、Med 283细胞
R1800[RA]细胞系相关产品:EFM-192A细胞、NCI H716细胞、NCI-SNU-398细胞
WERI-Rb 1细胞系相关产品:C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、293 F细胞、Kasumi 1细胞
BC-023细胞系相关产品:PL5细胞、COLO320HSR细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞
H596细胞系相关产品:GA-10(Clone 4)细胞、CCD 19Lu细胞、Dakiki细胞
H841细胞系相关产品:B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞
J 111细胞系相关产品:NCI-H2030细胞、MRMT-1细胞、L929细胞
KP-2细胞系相关产品:NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
CCD18细胞系相关产品:T-98G细胞、MOLT.4细胞、P3-Jiyoye细胞
VK2 (E6/E7)细胞系相关产品:COLO-320细胞、MDCK Type II细胞、SKGT4细胞
UO31细胞系相关产品:MHH-CALL-2细胞、MV-4:11细胞、293 HEK细胞
KYSE 70细胞系相关产品:REC细胞、Pt-K1细胞、Kit225-K6细胞
H2052_MM细胞系相关产品:SNU-368细胞、GBCSD细胞、WM 451-Lu细胞
OCI-Ly 1细胞系相关产品:TE8细胞、RGCs细胞、A549 ATCC细胞
GB1细胞系相关产品:COLO 680N细胞、HL1细胞、rUCMSCs细胞
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U-373MG细胞系相关产品:Astrocyte type I clone细胞、FU-97细胞、DoTc2 4510细胞
KU-812细胞系相关产品:PC14细胞、2008细胞、NKT细胞
NCI-BL2141细胞系相关产品:UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞
NCIH838细胞系相关产品:MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌细胞系
H23细胞系相关产品:EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
Hs852细胞系相关产品:FDCP1细胞、OCI-AML4细胞、PC-3M细胞
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Hx147细胞系相关产品:343 MG细胞、BJAB细胞、COLO 394细胞
BC-020细胞系相关产品:C-8161细胞、Vero E6细胞、B-16细胞
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GC-1spg细胞系相关产品:SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
Fetal Human Colon细胞系相关产品:GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
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SNU475细胞系相关产品:NCIH661细胞、BEL7402细胞、SJRH30细胞
NCI-H2087细胞系相关产品:SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
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Hs 695T细胞系相关产品:P3/NS1/1-Ag4-1细胞、L-6细胞、Hos TE-85细胞
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C32 [Human melanoma]细胞系相关产品:T/GHA-VSMC细胞、WC00097细胞、SCC-15细胞
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RPMI-7951细胞系相关产品:HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
L-5178-Y细胞系相关产品:Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
HuH6细胞系相关产品:Mel526细胞、LC1细胞、Wistar Institute, Susan Hayflick细胞
H-1688细胞系相关产品:MDA330细胞、LLC-PK-1细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞
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JurkatE6-1细胞系相关产品:Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞
Fetal Human Colon细胞系相关产品:GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
SK-BR-3 Thawing人乳腺腺癌细胞系
HT1080细胞系相关产品:PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞
Functional Liver Cell-7细胞系相关产品:OK-WT细胞、BC-3H-1细胞、CAMA1细胞
no.11细胞系相关产品:HCE-2 [50.B1]细胞、THC-8307细胞、HCA-7细胞
SKMES细胞系相关产品:THLE2细胞、HcerEpic细胞、hFOB1.19细胞
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RH35细胞系相关产品:Hs606T细胞、SK-N-BE(2)C细胞、HCE-T细胞
U-138-MG细胞系相关产品:SK-GT-2细胞、HNSC细胞、RIN-m5F细胞
LA-795细胞系相关产品:NR 8383细胞、HTori 3细胞、DHL6细胞
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R 2 C细胞系相关产品:CCD-841-CoTr细胞、MDA-468细胞、HCEC-12细胞
LAPC-4细胞系相关产品:MESSA Dx5细胞、COR-L51细胞、B95.8细胞
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