"RWPE-2 Thawing人正常前列腺上皮细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
RWPE-2 Thawing人正常前列腺上皮细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水;2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素;3)超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染;4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的喷洒中和,约几小时即可进入操作。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代。
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RWPE-2 Thawing人正常前列腺上皮细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
细胞形态特性:上皮细胞
SU-DHL2细胞系相关产品:HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
Hs.27细胞系相关产品:H-526细胞、Hs 578Bst细胞、Nb 2细胞
P3X63-Ag8.653细胞系相关产品:8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
TMD-8细胞系相关产品:293-FT细胞、SKNBE-2细胞、CEM-0细胞
3T3-L1细胞系相关产品:NS1-Ag 4/1细胞、LTEP-a2细胞、CCD1112Sk细胞
KYSE270细胞系相关产品:2780CP细胞、P3JHR1细胞、BALB/3T3细胞
MOLM13细胞系相关产品:CAL 85-1细胞、HCC-1954BL细胞、Hep-3B细胞
SNU-449细胞系相关产品:NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
Wien133细胞系相关产品:CHL-CL-11细胞、BALL1细胞、LTEP-a2细胞
D 407细胞系相关产品:HCT 15细胞、293 HEK细胞、ECC12细胞
HEK AD293细胞系相关产品:P3-X63.Ag8.653细胞、C918细胞、SF-767细胞
KPL-1细胞系相关产品:GM2219C细胞、WC00044细胞、Hs 940.T细胞
DSL-6A/C1细胞系相关产品:OVCAR-420细胞、MDA175细胞、A427细胞
Wistar Institute, Susan Hayflick细胞系相关产品:HEK293-EBNA1细胞、RPMI-1846细胞、JROECL 21细胞
L(TK-)细胞系相关产品:MC57G细胞、H-1694细胞、COLO678细胞
SUM-190PT细胞系相关产品:SK-N-F1细胞、MT-2细胞、H-2291细胞
M3 Clone M-3细胞系相关产品:HMy2.CIR细胞、HN-6细胞、T/G HA-VSMC细胞
MHCC97L细胞系相关产品:MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞
NBL-1细胞系相关产品:LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞
B16BL-6细胞系相关产品:MMQ细胞、Ca 9-22细胞、H1755细胞
SCLC-21H细胞系相关产品:SPCA-1细胞、NCIH2107细胞、231-luc细胞
GS9L细胞系相关产品:Mouse INsulinoma 6细胞、RAMOS2G64C10细胞、RGE细胞
BNL 1MEA.7R.1细胞系相关产品:CHO K1细胞、SF17细胞、NCTC 1469细胞
WC00097细胞系相关产品:HCC0202细胞、MFE-296细胞、SEM细胞
MDAMB330细胞系相关产品:Sarcoma OSteogenic-2细胞、OsA-CL细胞、MADISON LUNG TA-109细胞
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品:OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞
RWPE-2 Thawing人正常前列腺上皮细胞系
3T3 L1细胞系相关产品:NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
DH82细胞系相关产品:IM-95细胞、J774 A1细胞、NCIH1793细胞
QGP-1细胞系相关产品:BALB 3T3 clone A31细胞、HSC-1细胞、JB6 Cl 30细胞
HIT T15细胞系相关产品:SuDHL 8细胞、DH82细胞、TCMK-1细胞
MN-9D细胞系相关产品:Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
SKCO1细胞系相关产品:PC3M-1E8细胞、NG108-15细胞、RBVEC细胞
TE5细胞系相关产品:MN-9D细胞、NCI-H2066细胞、TE-5细胞
L-6细胞系相关产品:L02细胞、ATN-1细胞、HOS-143B细胞
P36细胞系相关产品:MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
TE-9细胞系相关产品:DMS-79细胞、MCF/Adr细胞、ECC10细胞
ME-180细胞系相关产品:B16BL-6细胞、B16 F1细胞、SJ-Rh 30细胞
KPL-4细胞系相关产品:NCIH1417细胞、SW626细胞、BMDC细胞
SKNBE-2细胞系相关产品:Laboratory of Allergic Diseases 2细胞、IMCD3细胞、SCL I细胞
Nb2-11细胞系相关产品:NCI-H2444细胞、L-363细胞、MFE 280细胞
P388.D1细胞系相关产品:SKHEP1细胞、BT 549细胞、U-87MG ATCC细胞
HEEpiC细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、BE(2)-C细胞、JCA1细胞
COV504细胞系相关产品:H341细胞、Rh30细胞、Hs 27细胞
Ca Ski细胞系相关产品:Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、D-407细胞
NCI-SNU-407细胞系相关产品:CAMA1细胞、UC-3细胞、H-2009细胞
HSC3细胞系相关产品:Panc3_27细胞、NCI-H498细胞、HuTu-80细胞
VM Cub 1细胞系相关产品:INS1E细胞、HLEpiC细胞、22Rv1细胞
SNU407细胞系相关产品:NCI-BL6细胞、SNU251细胞、OVCAR.4细胞
JROECL 33细胞系相关产品:HOCF细胞、BHK细胞、C3H10T1/2CL8细胞
HEK-293细胞系相关产品:Ramos 2G6.4C10细胞、OCI-Ly19细胞、NPA'87细胞
F56 [Human neoplasm]细胞系相关产品:CL-11细胞、PANC-02-03细胞、TE-85 clone 5细胞
P3-X63-Ag8细胞系相关产品:Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
769-P细胞系相关产品:143B细胞、MA 104细胞、RBE细胞
RMS 1598细胞系相关产品:PC 61.5.3细胞、JJN-3细胞、NCIH1693细胞
HET1A细胞系相关产品:COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
PLA802细胞系相关产品:CaES-17细胞、HS-5细胞、CCD-19Lu细胞
RINm-5F细胞系相关产品:Capan-2细胞、NCIH1781细胞、hs 68细胞
NGP细胞系相关产品:CEM-C1细胞、K299细胞、MRC-9细胞
C1498细胞系相关产品:EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
RWPE-2 Thawing人正常前列腺上皮细胞系
P3X63Ag8653细胞系相关产品:A704细胞、CHO cell clone K1细胞、HEC-1B细胞
U-CH1细胞系相关产品:CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
SNU-601细胞系相关产品:NT2/D1细胞、PANC-03-27细胞、DSL-6A-C1细胞
HEL细胞系相关产品:OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞
DU 145细胞系相关产品:Fetal Human Lens-124细胞、McA-RH 8994细胞、U118-MG细胞
TI-73细胞系相关产品:Hep 3B2.1-7细胞、KS-SLK细胞、P3J.HR1K细胞
Vertebral Cancer of the Prostate细胞系相关产品:CT26.WT细胞、JTC-39细胞、MMVECs细胞
UM-UC14细胞系相关产品:NCIH510细胞、OVCAR 8细胞、Psi2-DAP细胞
JM细胞系相关产品:NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
SNU-878细胞系相关产品:HR8348细胞、OCI-Ly 1细胞、NCI-SNU-878细胞
HuP-T3细胞系相关产品:SK-CO-1细胞、SMMC-7721细胞、HCT-116细胞
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