"HaCaT Thawing人永生化表皮细胞系
细胞背景资料:该细胞源自一位62岁患有黑色素瘤男性的病灶外围正常皮肤,角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性。
细胞形态:上皮细胞样
HaCaT Thawing人永生化表皮细胞系
细胞生长:贴壁
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HaCaT Thawing人永生化表皮细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
实验室细胞培养基知识简介:干粉培养基:以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基,这种人为的误差会减少,因为毕竟是大批量工业化生产的,批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多,以前是这样,但现在大家都认同了;无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。
细胞形态特性:上皮细胞样
CEM细胞系相关产品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞、HEK-293H细胞、H740细胞
D324细胞系相关产品:IMR32细胞、NCI-H211细胞、RMC-1细胞
LoMeT-ccRcc细胞系相关产品:RASMCs细胞、EoL-1细胞、OVCAR.5细胞
MDA-MB-436细胞系相关产品:CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞
CATHa细胞系相关产品:KMB17细胞、GM 637细胞、GM 637细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品:SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
P3.NS-1/1.Ag4.1细胞系相关产品:BJAB细胞、SKUT1细胞、B16F1细胞
C166细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞
293-GP细胞系相关产品:SHG 44细胞、SKES1细胞、Panc2.03细胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品:H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
Hs-281-T细胞系相关产品:NPC-TW01细胞、OVCA432_Bast细胞、HT 1080细胞
NCIH2141细胞系相关产品:Large Cell Lung Cancer-103H细胞、BJAB-1细胞、MESSA-DX5细胞
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PTK 2细胞系相关产品:COLO 699细胞、NS1-Ag4/1细胞、hCMEC/D3细胞
H2591细胞系相关产品:Hep G2-Luc细胞、SKOV-3细胞、CEMC7细胞
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58F细胞系相关产品:BNL CL2细胞、H1395细胞、NCI-H2135细胞
CCC-HEL-1细胞系相关产品:SF763细胞、MDA.MB.231细胞、WM-266-mel细胞
H-524细胞系相关产品:SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
RMC细胞系相关产品:NBL-2细胞、NCI-H1355细胞、Hs343T细胞
HaCaT Thawing人永生化表皮细胞系
F-81细胞系相关产品:BIC细胞、WM266细胞、X63细胞
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95-D细胞系相关产品:Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞
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NCI-SNU-119细胞系相关产品:NRK clone 49F细胞、MDAMB134细胞、H-2172细胞
PC 61细胞系相关产品:CCF-STTG1细胞、Huh-7细胞、H-524细胞
159PT细胞系相关产品:NCI-H2122细胞、SuDHL 8细胞、CCD-1112sk细胞
GM15452细胞系相关产品:Hs 343.T细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、COLO 320细胞
KOSC2细胞系相关产品:TALL-104细胞、SU-DHL2细胞、HGF-1细胞
PLA801C细胞系相关产品:MBT-2细胞、CCD-19Lu细胞、Experimental Mammary Tumour-6细胞
THP-1细胞系相关产品:OVCAR420细胞、P388-D1细胞、High Five细胞
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品:T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞
Kit225细胞系相关产品:SK-N-BE(2)-M17细胞、CAL-27细胞、NCIH2107细胞
HaCaT Thawing人永生化表皮细胞系
ARO细胞系相关产品:2PK3细胞、MOLM-14细胞、A375.S2细胞
NBL-4细胞系相关产品:UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞
SK HEP-1细胞系相关产品:HEK-293-H细胞、HTR8细胞、HTori 3细胞
B-cell with DC Morphology细胞系相关产品:SCL2细胞、Caco-2/ATCC细胞、CA46细胞
C33细胞系相关产品:2B4细胞、B16-F10--RED细胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞
MESSADX5细胞系相关产品:MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
EMT6细胞系相关产品:NT-2细胞、OVCAR 4细胞、P3-X63-Ag 8.653细胞
HCT-8/V细胞系相关产品:DR2R 1610细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、TCCSUP细胞
NCI-HUT-69细胞系相关产品:SKUT1细胞、Karpas 299细胞、H596细胞
SKOV-3细胞系相关产品:MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞
WEHI3B细胞系相关产品:OS-732细胞、HepG2/C3A细胞、Madison细胞
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