"J82 Thawing人膀胱移行癌细胞系
细胞背景资料:电子显微镜下未观察到桥粒但观察到数目不同的粗面内质网和突出微丝。 含ras (H-ras)癌基因。
细胞形态:上皮细胞样
J82 Thawing人膀胱移行癌细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
预防细胞污染的注意事项:实验进行前,超净台用紫外灯照射30-60min,然后用75%酒精擦拭超净台台面,并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内;实验用品用完应移出超净台,以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞;即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基,避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品,避免污染。勿碰触吸管尖头,不小心碰触后应立即更换;不要在打开的容器瓶口正上方操作,容器打开后,倾斜45°操作,操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方,应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次,用双蒸水清洗,再用酒精棉球擦拭一遍,后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水(应每周更换),待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
J82 Thawing人膀胱移行癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
很多朋友讨论细胞培养问题,见到很多很好的经验总结,这里说一些我个人的经验,因为一些比较特殊的原因,我自己培养接触过近300种细胞,常用于做实验的,累积有百余种,可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇专题,并不是因为细胞消化最重要,而是近期看到大家频繁讨论这个话题,我就抛砖引玉,下面几点拙见,可能与其它朋友总结的一些经验有点出入,仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细胞越养越好。一般的程序步骤,细节操作,我这里就不讲了,只讲一些基本操作背后的知识,如果不对之处,欢迎指正,总结下来,细胞培养中消化很重要,但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要),关键所在是细胞来源,血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题,很多时候bottleneck没有找到,虽然通过其它方法有所改善,但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作,总觉得自己没有经验,而忽视试剂,溶液尤其是细胞的质量,后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
细胞形态特性:上皮细胞样
NFS 60细胞系相关产品:CHO细胞、NCI-SNU-761细胞、Malme3M细胞
CHO细胞系相关产品:MT-2细胞、EVSAT细胞、HECCL-1细胞
10T1/2细胞系相关产品:BGC-823细胞、MT2细胞、NTERA2细胞
SCL-2细胞系相关产品:BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
CCD19-Lu细胞系相关产品:UCD-MLA-144细胞、NG 108-15细胞、AAV-293细胞
Ramos 2G6 4C10细胞系相关产品:PANC-04-03细胞、TE-85细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞
HuT78细胞系相关产品:P3J HR1-K细胞、MHCC 97细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞
CCD-19Lu细胞系相关产品:HTh74细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、H358细胞
SVHUC细胞系相关产品:H-2052细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞、NCI-H716细胞
U373细胞系相关产品:ASPC1细胞、BIC1细胞、Y-79细胞
SNU1040细胞系相关产品:16HBE14o-细胞、PLA-801D细胞、RSC 96细胞
COR-L26细胞系相关产品:EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞
HAVSMC细胞系相关产品:HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
Murine Carcinoma-38细胞系相关产品:SNU-739细胞、95-D细胞、87MG细胞
NCIH1770细胞系相关产品:J45.01细胞、NK-92.05细胞、COLO-824细胞
SNU354细胞系相关产品:NCI522细胞、Rat 2细胞、OCI-AML5细胞
S3 HeLa细胞系相关产品:MDA-MB 231细胞、MPVECs细胞、Melan-a细胞
Japanese Tissue Culture-39细胞系相关产品:HCT-8细胞、Human Embryo Lung-1细胞、LLC-PK(1)细胞
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102PT细胞系相关产品:KMH2细胞、COLO 16细胞、C2C12细胞
RPTC细胞系相关产品:MES13细胞、293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
RPTC细胞系相关产品:MES13细胞、293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞
MOLM13细胞系相关产品:CAL 85-1细胞、HCC-1954BL细胞、Hep-3B细胞
HSC细胞系相关产品:MDAMB435S细胞、AC29细胞、D407 RPE细胞
SU-DHL-16细胞系相关产品:RH8994细胞、NPC-TW 01细胞、H184A1细胞
OVCAR-8细胞系相关产品:578T细胞、Epstein-Barr-1细胞、BJA-B1细胞
J82 Thawing人膀胱移行癌细胞系
H1993细胞系相关产品:Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞
SUDHL2细胞系相关产品:L-M (TK-)细胞、SV-HUC细胞、NCTC929细胞
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HEK293-A细胞系相关产品:UPCI:SCC154细胞、H-2170细胞、C-4-I细胞
Hs675细胞系相关产品:H-1755细胞、Calf Pulmonary Artery 47细胞、Panc 1细胞
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SCH细胞系相关产品:SUP T1细胞、Metastatic Variant 522细胞、DoHH-2细胞
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P815细胞系相关产品:SKMEL2细胞、NPA'87细胞、hFOB 1.19细胞
KCL-22细胞系相关产品:Central Adrenergic TH-expressing a细胞、MKN28细胞、SaOS细胞
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SF-763细胞系相关产品:CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
G-292, clone A141B1细胞系相关产品:Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞
HN6细胞系相关产品:HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞
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AQ-Mel细胞系相关产品:SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞
Wien 133细胞系相关产品:NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞
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J82 Thawing人膀胱移行癌细胞系
TE-85细胞系相关产品:Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
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GM02132C细胞系相关产品:HR-8348细胞、GLC82细胞、MC57G细胞
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细胞、Colo741细胞、D10G41细胞
NCI-H-128细胞系相关产品:RPMI 8226/S细胞、NRK-49F细胞、C-127细胞
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PC-3细胞系相关产品:Lec1细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞、H2141细胞
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