"SW579 Thawing人甲状腺鳞癌细胞系
细胞背景资料:在裸鼠中成瘤(产生三级恶性纺锤状巨细胞瘤)。
细胞形态:上皮细胞样
SW579 Thawing人甲状腺鳞癌细胞系
细胞生长:贴壁
解冻细胞出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:1)冷冻时细胞密度过低:推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中;2)不适当的冷冻过程:推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:1)培养瓶的大小:一般解决方案是一些细胞在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从T75培养瓶转移到2或3个T25培养瓶中;2)细胞密度过低:通常解决方案是提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SW579 Thawing人甲状腺鳞癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
常规的细胞实验(增殖,凋亡,迁移,分化之类的),受消化影响不是很大,如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验,比如病毒包装,对细胞代数,对细胞状态要求极高。这个时候,胰酶消化,就是润洗,都会对细胞包装病毒的能力有影响,传代次数一多,细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化,用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性,来使得细胞脱离基质附着表面,但不切割任何蛋白;EDTA的作用。许多人不用胰酶,只用EDTA,或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白,trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白,而EDTA通过螯合Ca离子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA,或者对付特别难消化的细胞,添加多一些EDTA,就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果10min还消化不彻底的话),而应该想其它办法;PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤,是常见的操作,因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲,对于一些难消化细胞,那么可以配制不含Ca,Mg离子的PBS,因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞,不需要配制如此溶液。
细胞形态特性:上皮细胞样
CCLP1细胞系相关产品:HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞
NCI-H1435细胞系相关产品:Rat-1细胞、MHCC97L细胞、NCI-H1668细胞
SCC-7细胞系相关产品:NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞
Colo16细胞系相关产品:HBMEC细胞、NCIH520细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞
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CHL-IU细胞系相关产品:KU-812-F细胞、SK-BR3细胞、QGY-7703细胞
P3 NS1 Ag4/1细胞系相关产品:OLN93细胞、Panc 2.03细胞、H-740细胞
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EoL-1-cell细胞系相关产品:BRL细胞、H-1048细胞、SPCA-1细胞
RKO-AS45-1细胞系相关产品:HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
OCI/AML-3细胞系相关产品:MDST8细胞、293FT细胞、He La细胞
COLO320DM细胞系相关产品:GC-1spg细胞、HFF细胞、HEL 92.1.7细胞
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H1618细胞系相关产品:TE-12细胞、TCMK-1细胞、H810细胞
Kit-225细胞系相关产品:PLC8024细胞、ST486细胞、NCIH209细胞
LAN1细胞系相关产品:HCE细胞、SKG-IIIa细胞、Mac-1细胞
SW579 Thawing人甲状腺鳞癌细胞系
H187细胞系相关产品:NCI-H748细胞、TE-7细胞、H2342细胞
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Hs600T细胞系相关产品:SNK1细胞、Hs832T细胞、U20-S细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
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TB1 Lu细胞系相关产品:SK_HEP1细胞、P3HR-1细胞、LA-N-1细胞
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U 937细胞系相关产品:EAHY-926细胞、N1S1细胞、HBdSMC细胞
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RT-BM细胞系相关产品:DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞
SW579 Thawing人甲状腺鳞癌细胞系
SBC5细胞系相关产品:NCI-SNU-C2A细胞、KLE细胞、RD细胞
CHP-100细胞系相关产品:PC9细胞、CAL-33细胞、HPDE6c7细胞
HCC78细胞系相关产品:SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞
MSB-1细胞系相关产品:WEHI3细胞、MC57细胞、NBL-5细胞
HEK 293 c18细胞系相关产品:HBEpiC细胞、OVCAR 420细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2细胞
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OVCA8细胞系相关产品:GM03320细胞、RCC-10细胞、hA549细胞
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