"TT Thawing人甲状腺髓样癌细胞系
细胞背景资料:TT细胞由LeongSS等,自一位77岁白人女性甲状腺髓样癌患者的穿刺活检样本中建立。TT细胞持续产生高水平的降血素和CEA。更换培养基后24h和72h,在培养基中检测到的免疫活性的降血素浓度分别为3900pg/106个细胞和7700pg/106个细胞。72小时后CEA积累浓度超过27ng/106个细胞;该细胞最初是在RPMI1640培养液中培养,可产生神经肽,但还不知道在F12培养液中培养是否会产生。
细胞形态:上皮细胞样
TT Thawing人甲状腺髓样癌细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:3-1:4传代,每周换液2次。
细胞培养过程中,总是会出现各种意想不到的问题,一不留神就会全盘皆输。所谓细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。下面是贴壁细胞的保藏方法,希望对细胞培养初学操作者有所帮助:1)观察细胞状态:贴壁细胞密度达到85-90%,即可以细胞冻存形式进行保藏,拍照,记录细胞状态;2)细胞清洗:培养皿表面消毒后,转移至生物安全柜中,去除培养皿中培养液,加入12mlPBS,轻轻摇晃培养皿清洗细胞,随后吸除PBS清洗液;3)细胞消化:将2ml胰酶加入培养皿中,完全覆盖细胞,置于显微镜下观察(期间禁止摇晃培养皿),当细胞刚开始脱落时,立即转移至生物安全柜中,除去大部分胰酶,剩余约0.5ml胰酶,转移至培养箱内继续消化,每30秒肉眼观察细胞状态,至细胞成流沙状完全脱落,转移至生物安全柜中,加入12ml完全培养基,终止消化;4)细胞离心:将终止消化后的细胞悬液吹打均匀,吸取至15ml离心管中,1000r/min(110g),离心3min;5)细胞冻存:离心后去除细胞上清液,按照冻存细胞量5*10^5/ml,吸取冻存液重悬细胞沉淀,吹打均匀后分装至相应的冻存管中,进行冻存;6)细胞保藏:冻存管做好标记,放至程序降温盒中,于4℃冰箱放置30min,转移至-80℃超低温冰箱过夜,将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
TT Thawing人甲状腺髓样癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
实验室细胞培养基知识简介:干粉培养基:以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基,这种人为的误差会减少,因为毕竟是大批量工业化生产的,批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多,以前是这样,但现在大家都认同了;无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。
细胞形态特性:上皮样
H9c2 (2-1)细胞系相关产品:HT clone H9细胞、SKRC-52细胞、LIPF155C细胞
SW1088细胞系相关产品:P3X63NS1细胞、SUDHL-2细胞、SW-1573细胞
NCIH1435细胞系相关产品:CHG-5细胞、293-GP细胞、JIII细胞
MFD-1细胞系相关产品:LAPC-4细胞、JHH-7细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞
OCILY19细胞系相关产品:hFOB 1.19细胞、NCIH2029细胞、Walker-256细胞
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TE-3A细胞系相关产品:COLO 741细胞、GM06141B细胞、SuperTube细胞
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HuCC-T1细胞系相关产品:HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞
Jurkat E6细胞系相关产品:JHH-2细胞、P3J-HR-1细胞、MOLM13细胞
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SUDHL6细胞系相关产品:H841细胞、RAOEC细胞、ATN-1细胞
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TT Thawing人甲状腺髓样癌细胞系
NuTu 19细胞系相关产品:RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
SHIN-3细胞系相关产品:Ball 1细胞、N2a细胞、HTR8细胞
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TT Thawing人甲状腺髓样癌细胞系
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COLO-824细胞系相关产品:Med 341细胞、Rat Skin 1细胞、M1细胞
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