"SNU-387 Thawing人肝癌细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
SNU-387 Thawing人肝癌细胞系
细胞生长:贴壁
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,最终形成恶性循环。污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水;2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素;3)超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染;4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的喷洒中和,约几小时即可进入操作。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SNU-387 Thawing人肝癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代培养(消化法)标准操作规程【原理】细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以,而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。【材料和试剂】1)无菌生理缓冲液(PBS);2)胰酶-EDTA溶液(0.05%胰酶-0.53mM EDTA-4Na): 以10ml分装于15 ml无菌离心管中,保存于–20℃,使用前放在37℃水槽回温;3)新鲜培养基;4)无菌吸管/离心管/培养瓶【传代前准备操作】1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热;2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染;4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;5)准备好将要使用的消毒后的空培养瓶;6)取出预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内;7)从培养箱内取出细胞:注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察细胞;8)打开瓶口:将各瓶口一一打开,同时要在酒精灯上烧口消毒。
细胞形态特性:上皮样
FUOV1细胞系相关产品:COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞
Sf21细胞系相关产品:U-251_MG细胞、NHRF细胞、HT-3细胞
COLO 829细胞系相关产品:F81细胞、Swiss3T3细胞、SK-UT-1细胞
Calu 3细胞系相关产品:MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
GM00346B细胞系相关产品:ReNcell CX细胞、RCC10 RGB细胞、TR-146细胞
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PANC 813细胞系相关产品:HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
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LAN-5细胞系相关产品:GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞
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TN5B14细胞系相关产品:MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞
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SNU-387 Thawing人肝癌细胞系
NCIH2286细胞系相关产品:IHH-4细胞、Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、HCT/Taxo1细胞
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NCIH196细胞系相关产品:YES 2细胞、AZ521细胞、ZR75-1细胞
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