"OPM-2 Thawing人骨髓瘤细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
OPM-2 Thawing人骨髓瘤细胞系
细胞生长:贴壁
体内细胞培养及其操作步骤:【瘤细胞悬液接种】1)无菌选取生长良好(有光泽,淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞;2)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨,经80~100目筛网过滤成细胞悬液;3)培养细胞应用PBS洗两遍;4)计数并调整细胞浓度至107~108/ml;5)常规消毒后,于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(0.1ml/部位,>106细胞)。初次接种成功率低,细胞数尽可能多一些;6)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期,以后随着传代潜伏期逐渐缩短,最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位,引起腹水,腹水中含有瘤细胞,将这种腹水反复传代,即可成为腹水瘤。初次传代时,腹水常呈血性(含大量红细胞),反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。1)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤,进行细胞计数;2)消毒动物,左下腹穿刺接种106腹水瘤细胞;3)接种腹水瘤细胞后约7~12d,待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部,用9号针头抽取腹水,也可行腹部解剖后,用滴管吸取。每只小鼠可抽3~5ml;4)抽取的腹水经3000rpm离心15min,收集上清,分装冻存备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2传代
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题,客户遇到的问题从细胞生长角度来说,针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因,我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因:细胞本身的状态》1)细胞传代次数多,细胞老化;2)细胞的接种量:接种量过低,细胞生长缓慢;3)细胞传代时间过晚:细胞中毒,影响传代后的细胞生长;4)胰酶消化时间过长或过短:时间过长,细胞死亡;时间过短,细胞未完全分离而成团,细胞死亡;5)细胞的冻存与复苏:慢冻速融。污染:1)支原体污染;2)霉菌污染;培养基或血清:1)更换血清或培养基之前未进行验证;2)选择的培养基是否合适;3)培养基配制是否准确无误;培养环境:1)CO2供应是否正常;2)培养箱或摇床温度控制是否正确;解决方法:根据以上四个方面的可能原因,做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等;2)避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清);3)要用合适的血清或培养基,经过验证;4)注意实验室的环境;二、培养细胞死亡》可能原因:1)培养箱内无CO2;2)培养箱内温度波动太大;3)细胞冻存或复苏过程中损伤;4)培养液渗透压不正确;5)培养液中有毒代谢产物堆积;解决方法:1)检测培养箱内CO2;2)检查培养箱内温度;3)取新的保存细胞种;4)检测培养液渗透压;5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
OPM-2 Thawing人骨髓瘤细胞系
细胞生长特性:悬浮生长
我常看到一个比较复杂的四步消化法,这个挺有意思,我也是次听说,应该是网友自己发展出来的方法,很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面,还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞,不需要胰酶孵育即可,只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好,这个视细胞而定。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化好导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的特性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不好;比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),就以colon cancer为例,比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100 mm dish,一次最多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞形态特性:详见细胞说明书
HEK293EBNA细胞系相关产品:OACP4 C细胞、NCIH2110细胞、3AA细胞
95C细胞系相关产品:BT474细胞、Lu-99A细胞、UO.31细胞
H-1944细胞系相关产品:SNB.19细胞、H-35细胞、Rat 2细胞
DLD 1细胞系相关产品:PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
KFB细胞系相关产品:YAC-1细胞、KYSE0030细胞、TK-10细胞
NCI-H1944细胞系相关产品:RBL2H3细胞、RA细胞、NCI-H596细胞
H4-II-E-C3细胞系相关产品:Mel-624细胞、CESS细胞、THEECs细胞
U266BL细胞系相关产品:HP615细胞、RMG1细胞、NOZ细胞
NRK 52E细胞系相关产品:OVCAR8细胞、Human Fetal Thymocyte-8810细胞、GC-1细胞
T84细胞系相关产品:A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
HONE-1细胞系相关产品:PG-4 S+L-细胞、GM05372E细胞、H1522细胞
HSC-I细胞系相关产品:NCI-H69细胞、Co 205细胞、HKC细胞
SCL I细胞系相关产品:UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞
Hs274T细胞系相关产品:NCI-H1437细胞、CAOV3细胞、PC-9/S1细胞
IOSE80UBC细胞系相关产品:HBL1细胞、CCD-841CoTr细胞、tdott细胞
HPBALL细胞系相关产品:HBL100细胞、H-2342细胞、KNS62细胞
TO 175.T细胞系相关产品:RAW264.7细胞、HCC70细胞、SCL2细胞
CWR22R细胞系相关产品:EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
FM88细胞系相关产品:BaF3细胞、NCTC-1469细胞、SKO007细胞
SNU-475细胞系相关产品:SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
P31FUJ细胞系相关产品:DHL-16细胞、ME1细胞、FU-OV-1细胞
CAL62细胞系相关产品:H-2405细胞、NCI-H-82细胞、AgC11x3A细胞
NCI-H125细胞系相关产品:J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
CD 18细胞系相关产品:KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
Sp 2817细胞系相关产品:RPMI1846细胞、OUMS27细胞、NCI-BL6细胞
WRL 68细胞系相关产品:RAT2细胞、LIXC002细胞、U 138 MG细胞
OPM-2 Thawing人骨髓瘤细胞系
CTLL2细胞系相关产品:HeLa-S3细胞、CCRF SB细胞、NCI-H125细胞
HuT-78细胞系相关产品:LLC-PK1细胞、University of Arizona Cell Culture-812细胞、LS-513细胞
GM15452细胞系相关产品:Hs 343.T细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、COLO 320细胞
MV411细胞系相关产品:SCC7细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞、PFSK细胞
343MG细胞系相关产品:Fox/NY细胞、ECC-12细胞、BCP-1细胞
NCI H716细胞系相关产品:OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞
KTA7细胞系相关产品:NuTu-19细胞、M07e细胞、QGY7701细胞
HEL细胞系相关产品:OSA细胞、MPP 89细胞、MDAMB175VII细胞
RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
U251MG细胞系相关产品:3AO细胞、Cattle chondrocytes细胞、MCF10A细胞
SW900细胞系相关产品:NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞
MDA-330细胞系相关产品:SPC-A-1细胞、H87细胞、10RGB细胞
CHP 100细胞系相关产品:PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞
HOS细胞系相关产品:S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
TE85细胞系相关产品:tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
DI TNC-1细胞系相关产品:MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
C-26细胞系相关产品:NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞
G-Olig2细胞系相关产品:C3H10T1-2细胞、SNUC1细胞、Calu 6细胞
Hs737T细胞系相关产品:KLN 205细胞、MDAMB468细胞、HA细胞
TE-11细胞系相关产品:HuPT4细胞、COV434细胞、RPMI6666细胞
CCFSTTG1细胞系相关产品:CORL105细胞、HSAEC1-KT细胞、HCC2279细胞
RCC-4细胞系相关产品:A549细胞、KPL1细胞、COLO 320 HSR细胞
KYSE510细胞系相关产品:Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
SK-NSH细胞系相关产品:COV-362细胞、HCC 38细胞、C4-1细胞
H-1693细胞系相关产品:3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
H-1155细胞系相关产品:143BTK-细胞、LN 229细胞、hADSCs细胞
NCI-H2286细胞系相关产品:SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞
HOS细胞系相关产品:S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
SkChA1细胞系相关产品:REC1细胞、H-146细胞、LU165细胞
MKN28细胞系相关产品:TOV112细胞、D324细胞、SKLU1细胞
BEL7404细胞系相关产品:Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
28SC细胞系相关产品:CCC-ESF-1细胞、HEC1A细胞、COLO201细胞
SW900细胞系相关产品:NCI-H510细胞、HCA7细胞、BxPC-3细胞
OPM-2 Thawing人骨髓瘤细胞系
Panc_03_27细胞系相关产品:A2780/Taxol细胞、Strain KB细胞、GP293细胞
TE3细胞系相关产品:HT 1376细胞、NCI-H1650细胞、GL-261细胞
MDBK (NBL-1)细胞系相关产品:H378细胞、RIN-m细胞、COR-L23/P细胞
SW837细胞系相关产品:MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
OCI AML4细胞系相关产品:CCRF细胞、H-1770细胞、T-HEECs细胞
HS852.T细胞系相关产品:HEL-299细胞、NCIH1915细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞
NBL-5细胞系相关产品:RPMI no. 8226细胞、PL-12细胞、32D clone 3细胞
LYR细胞系相关产品:SU-DHL6细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞、HSC6细胞
RL-95-2细胞系相关产品:SK-ES-1细胞、Y3-Ag123细胞、SUDHL2细胞
RKOAS451细胞系相关产品:T2(174 x CEM.T2)细胞、H-2141细胞、H-820细胞
ME-1 [Human leukemia]细胞系相关产品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、U373MG细胞、NCIH2591细胞
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