"HCC827 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：这株细胞建于１９９４年三月。这株肺腺癌在EGFR酪酸激酶区域有一个获得性突变(E７４６-A７５０缺失)。患者在２５岁到２６岁时每个月抽１包烟。在诊断前１２年不再抽烟。
细胞形态：上皮细胞样
HCC827 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长：贴壁
养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：１)培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；２)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-２３１，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT４７４就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；３)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；４)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基；５)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；６)养细胞的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。１)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；２)发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；３)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；４)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；５)注意个人卫生。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化５分钟。１：２。４-５天长满。
传代的操作步骤注意事项：1)操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分，工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤：1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许，以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟，当发现细胞质回缩，细胞间隙增大后，立即终止消化。4)吸除消化液，向瓶内注入Hanks液数毫升，轻轻转动培养瓶，把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时，动作要轻，以免把已松动的细胞冲掉流失，如用胰蛋白酶液单独消化，吸除胰蛋白酶液后，可不用Hanks液冲洗，直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后，把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中，置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤：1)吸出细胞培养液，放入离心管中，离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液，加入适量之新鲜培养基，混和均匀后，依稀释比例转移至新的培养瓶中，以正常培养条件培养。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HCC827 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足够消化细胞(绝大部分１min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后３７度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备１００%的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-３细胞)，吹打不超过２０次后(一般１０次即可)，成小规模聚集(１０个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打１h，等待单细胞悬液出现。
细胞形态特性：上皮细胞样
OCI-LY-10细胞系相关产品：Tb1Lu细胞、OAW 42细胞、Tn-5细胞
NCI-H295R细胞系相关产品：OCI-LY-8细胞、MIA-PaCa-2细胞、NCI-H1954细胞
NCI-H2081细胞系相关产品：NCI-H102细胞、Mouse podocyte细胞、Evsa-T细胞
P30OHK细胞系相关产品：Rat-2细胞、H-4-II-E细胞、SK-MEL-5细胞
NPA细胞系相关产品：Rabbit Kidney 13细胞、JB-6细胞、GM16136细胞
SNU-449细胞系相关产品：NCI-H2347细胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞、TPC1细胞
OCI/AML-2细胞系相关产品：HCC94细胞、SKNFI细胞、HC11细胞
GM02219C细胞系相关产品：MCF 10A细胞、Lec1细胞、RD 2细胞
IAR-20细胞系相关产品：LM1细胞、VA-ES-BJ细胞、BE(2)-M17细胞
H-2030细胞系相关产品：OCIAML4细胞、HCC827细胞、H-128细胞
HOP-92细胞系相关产品：L-WRN细胞、SCC25细胞、LA-N-6细胞
TE 32细胞系相关产品：Pro-5 Lec1.3c细胞、T-ALL 1细胞、NCI-H23细胞
NCI-SNU-878细胞系相关产品：VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞
HO1-N-1细胞系相关产品：143TK-细胞、NCIH847细胞、YD15细胞
OP-9细胞系相关产品：MADB-106细胞、PTK-1细胞、FOX-NY细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HCC1395细胞、NBL-4细胞
SNU-182细胞系相关产品：B-104细胞、Hep 3B细胞、MDA-MB-175细胞
KYSE 520细胞系相关产品：H2122细胞、RC-4B/C细胞、NCIH889细胞
COLO-320-HSR细胞系相关产品：OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
HBMEC细胞系相关产品：LNCaP clone FGC细胞、U-266 AR1细胞、LS-174T细胞
SCC 15细胞系相关产品：VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
SCC 15细胞系相关产品：VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
CCRF-CEM C7细胞系相关产品：1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
MA 104细胞系相关产品：IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
CAL 148细胞系相关产品：TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞系相关产品：H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
HCC827 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
Jiyoye细胞系相关产品：ABC-1细胞、LNCaP C4-2细胞、3AO细胞
KCL22S细胞系相关产品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞、SHG-44细胞、SK UT 1细胞
L cells (TK-)细胞系相关产品：Karpas 422细胞、H1882细胞、OV-CA 432细胞
WM-115细胞系相关产品：NCIH1944细胞、MHHCALL2细胞、SK-BR-3细胞
HUVEC细胞系相关产品：QG-56细胞、HCC0078细胞、CL1-5细胞
NEC细胞系相关产品：U14细胞、H1355细胞、Clone M-3细胞
S180细胞系相关产品：SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞
TC-1[JHU-1]细胞系相关产品：OCI/AML5细胞、BEL/FU细胞、MLA 144细胞
NPC-TW039细胞系相关产品：Madison lung细胞、HCC-1954细胞、Ramos (RA)细胞
Hs 852.T细胞系相关产品：IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞
BSC40细胞系相关产品：J 82细胞、HCC-1599细胞、751-NA细胞
Anip[973]细胞系相关产品：B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
NCTC1469细胞系相关产品：SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞
NCIH1944细胞系相关产品：KMM1细胞、H295R-S1细胞、HCC9204细胞
DrG细胞系相关产品：H1373细胞、OAW42细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞
Hep G2-Luc细胞系相关产品：SUDHL-5细胞、A673细胞、Ls-174-T细胞
UCLA SO M14细胞系相关产品：H-220细胞、CEF细胞、C2BBe 1细胞
HBE细胞系相关产品：NCI-446细胞、RL细胞、mIMCD3细胞
HIT.T15细胞系相关产品：M3 Clone M-3细胞、H7721细胞、Capan 1细胞
Wien 133细胞系相关产品：NCI-H1404细胞、KLM-1细胞、MNNG细胞
NPC-TW01细胞系相关产品：Pfeiffer细胞、H1770细胞、C57/B6-L细胞
JEG3细胞系相关产品：L428细胞、CCRF-CEM C1细胞、HuO9细胞
SUM149-PT细胞系相关产品：MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
HCC44细胞系相关产品：NCIH358细胞、SF295细胞、ME1细胞
CMT-167细胞系相关产品：SCLC21H细胞、Hs-578-T细胞、SU8686细胞
A431/P细胞系相关产品：NCIH2135细胞、MCF12F细胞、LMTK-细胞
P3-X63-Ag8.653细胞系相关产品：IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞
NB19细胞系相关产品：IHC-ST1细胞、U-251 MG细胞、NCI-H1869细胞
H22-H8D8细胞系相关产品：CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
LLC细胞系相关产品：SK-RC 52细胞、Eca 109细胞、OCI-AML-2细胞
AML-2细胞系相关产品：OCI-Ly7细胞、NCI-H1755细胞、C-28I2细胞
MM1S细胞系相关产品：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
HCC827 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
HCA7细胞系相关产品：CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
786-0细胞系相关产品：NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
NIE-115细胞系相关产品：MRASMC细胞、Hs852细胞、L5178Y细胞
TU 686细胞系相关产品：NF639细胞、KOPN8细胞、N-Tera-2细胞
WM-239A细胞系相关产品：KYSE 410细胞、BRL-3A细胞、Mel-624细胞
HARA-B细胞系相关产品：HUCCT1细胞、MARC145细胞、DR2R1610细胞
HECCL-1细胞系相关产品：K422细胞、OK细胞、H-1694细胞
SL-1细胞系相关产品：C22 (Clara)细胞、H-2342细胞、HBL100细胞
BC-009细胞系相关产品：MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞系相关产品：HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞
LC-1Sq细胞系相关产品：NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞
"
