"NCI-H1650 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：该细胞是从一名２７岁白人男性（１０年烟龄）支气管肺泡癌患者的胸腔积液中分离得到的。
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H1650 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长：贴壁
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】１)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；２)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；３)置３７℃孵箱或室温(２５℃温度)下进行消化，２~５min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；５)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；６)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO２培养箱中进行培养；７)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般２～３d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：１：４-１：６传代；２-３天换液１次。
在细胞培养过程中会出现这样或那样的问题，客户遇到的问题从细胞生长角度来说，针对细胞培养过程中生长不好、甚至死亡的原因，我们做以下分析并提出相对应的解决方法。一、培养细胞生长不好》可能原因：细胞本身的状态》1)细胞传代次数多，细胞老化；2)细胞的接种量：接种量过低，细胞生长缓慢；3)细胞传代时间过晚：细胞中毒，影响传代后的细胞生长；4)胰酶消化时间过长或过短：时间过长，细胞死亡；时间过短，细胞未完全分离而成团，细胞死亡；5)细胞的冻存与复苏：慢冻速融。污染：1)支原体污染；2)霉菌污染；培养基或血清：1)更换血清或培养基之前未进行验证；2)选择的培养基是否合适；3)培养基配制是否准确无误；培养环境：1)CO2供应是否正常；2)培养箱或摇床温度控制是否正确；解决方法：根据以上四个方面的可能原因，做出针对性的解决方案》1)注意细胞的本身状态：如传代次数、接种量等；2)避免产生污染（用正规、合法、可溯源的血清）；3)要用合适的血清或培养基，经过验证；4)注意实验室的环境；二、培养细胞死亡》可能原因：1)培养箱内无CO2；2)培养箱内温度波动太大；3)细胞冻存或复苏过程中损伤；4)培养液渗透压不正确；5)培养液中有毒代谢产物堆积；解决方法：1)检测培养箱内CO2；2)检查培养箱内温度；3)取新的保存细胞种；4)检测培养液渗透压；5)换入新鲜培养液。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H1650 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
常规的细胞实验(增殖，凋亡，迁移，分化之类的)，受消化影响不是很大，如果不用胰酶去孵育而使用润洗的方法消化的话(难消化细胞例外)。但少数实验，比如病毒包装，对细胞代数，对细胞状态要求极高。这个时候，胰酶消化，就是润洗，都会对细胞包装病毒的能力有影响，传代次数一多，细胞包装能力就会逐渐下降(当然也有其它因素影响包装效率)。这个时候都不用胰酶消化，用一些盐溶液(不是EDTA液)即可。这些盐溶液通过影响ECM相关酶的活性，来使得细胞脱离基质附着表面，但不切割任何蛋白；EDTA的作用。许多人不用胰酶，只用EDTA，或者用trypsin/EDTA联合作用。这里要明白，trypsin切割ECM的一些负责粘连和附着的蛋白，而EDTA通过螯合Ca离子，作用于Integrin的活性，所以EDTA的作用更加温和。有的人在trypsin里添加一些EDTA，或者对付特别难消化的细胞，添加多一些EDTA，就是这个道理。一般不要试图延长消化时间(如果１０min还消化不彻底的话)，而应该想其它办法；PBS洗涤。消化之前用PBS洗涤，是常见的操作，因为Serum含有抑制trypsin的蛋白。但这里面也有学问可以讲，对于一些难消化细胞，那么可以配制不含Ca，Mg离子的PBS，因为这些离子也会抑制trypsin的活性。但对于绝大部分胰酶或者EDTA溶液润洗即可消化的细胞，不需要配制如此溶液。
细胞形态特性：上皮细胞样
NCIH838细胞系相关产品：MAVER1细胞、KMM-1细胞、NE-4C细胞
3T3F442A细胞系相关产品：Microbiological Associates-104细胞、JB-6 Cl 30细胞、NWA细胞
SUM 102细胞系相关产品：Swiss-3T3细胞、ID8/MOSEC细胞、NFS60细胞
LC-MS细胞系相关产品：NCIH1963细胞、SNU601细胞、NCI-H2170细胞
CEK细胞系相关产品：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
T98 G细胞系相关产品：Colon38细胞、MMQ细胞、32D.cl3细胞
HSAS1细胞系相关产品：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
NCIH1436细胞系相关产品：RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞
NCI-H889细胞系相关产品：P3 88 D1细胞、MCF.10A细胞、BCAP37细胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞系相关产品：SMMC7721细胞、NCI-HUT-460细胞、LSC-1细胞
NK62a细胞系相关产品：OV-1063细胞、ZYM-SVEC01细胞、PG-LH7细胞
WERI-Rb-1细胞系相关产品：HDLM-2细胞、RT112细胞、UM-UC-1细胞
L Wnt-3A细胞系相关产品：HANK1细胞、FRO细胞、Ball 1细胞
MDA-435细胞系相关产品：GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
PAEC细胞系相关产品：HCT-8/V细胞、GA-10 (Clone 4)细胞、HCC1599细胞
NCI-H157细胞系相关产品：Tu 212细胞、KG-1细胞、Hx147细胞
FU-OV-1细胞系相关产品：NCIH526细胞、MDA-MB-231-GFP细胞、U-CH1细胞
U138细胞系相关产品：EJ-1细胞、SW-1353细胞、EC-9706细胞
3 LL细胞系相关产品：UM-UC14细胞、NCI-H1954细胞、GM03671细胞
SUM-159PT细胞系相关产品：Hs683细胞、OCI-LY-3细胞、LC2/Ad细胞
End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
End1/E6E7细胞系相关产品：Vero E6细胞、HECCL-1细胞、H1869细胞
MDAMB415细胞系相关产品：293F细胞、SCL-I细胞、MDA436细胞
HSAS3细胞系相关产品：PE/CA-PJ-34细胞、Buffalo Rat Liver-3A细胞、HUTU80细胞
PA-TU S细胞系相关产品：NCI-H322T细胞、IMR 32细胞、NCI-ADR-RES细胞
CemT4细胞系相关产品：HCC-1937细胞、X63-Ag8细胞、GM2219C细胞
NCI-H1650 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
UMUC-3细胞系相关产品：P388D1细胞、Psi-2 DAP细胞、MOLT 16细胞
CNLMG-B5537SKIN细胞系相关产品：UPCI:SCC90细胞、L 540细胞、SK-N-BE2细胞
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞
MDA-MB-231-GFP细胞系相关产品：EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
IEC18细胞系相关产品：MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
NCI-H2286细胞系相关产品：SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞
B-16细胞系相关产品：SU-86-86细胞、U-2 OS细胞、H1975细胞
GC1-SPG细胞系相关产品：SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞
Hs-578-T细胞系相关产品：H2196细胞、OKa-C-1细胞、H-2228细胞
HCC78细胞系相关产品：SK-N-SH细胞、SK-MEL2细胞、SW-837细胞
H1693细胞系相关产品：PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
RSMC细胞系相关产品：SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞
SF767细胞系相关产品：A2780CP70细胞、TE14细胞、KE 37细胞
253JB-V细胞系相关产品：OV2008细胞、HSC-6细胞、NCI-HUT-520细胞
NCI-H-69细胞系相关产品：DHL-8细胞、HCT116细胞、Fao细胞
HeLa S-3细胞系相关产品：HeLa 229细胞、RFL 6细胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞
SR细胞系相关产品：RPMI 1788细胞、CaEs17细胞、MALME.3M细胞
2780细胞系相关产品：aTC1 Clone 6细胞、T-47D细胞、HCC-1428细胞
MCFs细胞系相关产品：HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞
Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
CD 18细胞系相关产品：KU1919细胞、Earle's L cells细胞、HR-8348细胞
SF763细胞系相关产品：H510A细胞、MONO-MAC 6细胞、PBMC细胞
MDA-MB415细胞系相关产品：VMCUB-1细胞、CAL 85-1细胞、Y-1细胞
EA. hy 926细胞系相关产品：SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
C8D1A细胞系相关产品：NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
LAN-5细胞系相关产品：GA-10细胞、HCC941122细胞、HEM-L细胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞系相关产品：H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
U-87-MG细胞系相关产品：MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
Karpas-299细胞系相关产品：HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
IEC 18细胞系相关产品：H865细胞、alpha-TC1-6细胞、CL-40细胞
FLS细胞系相关产品：Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞
DLD 1细胞系相关产品：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
NCI-H1650 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
SF-539细胞系相关产品：SCCVII细胞、HCC4006细胞、UMR 106细胞
SCL I细胞系相关产品：UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞
SCL I细胞系相关产品：UCW 100细胞、SF-295细胞、Centre Antoine Lacassagne-33细胞
PCI-4M细胞系相关产品：hTERT RPE1细胞、52PE细胞、WM451Lu细胞
PC3细胞系相关产品：MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
WEHI-164细胞系相关产品：HSC 3细胞、3T3(A31)细胞、PC-3M-1E8细胞
GM01232细胞系相关产品：Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞
CMK细胞系相关产品：LS-411细胞、CV-1细胞、NCI-H128细胞
L cell细胞系相关产品：C38细胞、CHO-K1细胞、Hep-G2细胞
PTK-2细胞系相关产品：MHCC97L细胞、SUDHL-1细胞、Ramos (RA 1)细胞
NCIH1436细胞系相关产品：RD-ES细胞、NR8383细胞、HLEC细胞
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