"NCI-H358 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞背景资料：１９８１年从一位开始化疗之前的患者的肿瘤组织中分离建株。超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。不表达SP-B和SP-C。他们在软琼脂中的克隆形成效率为０.８３%。
细胞形态：上皮细胞样
NCI-H358 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长：贴壁
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代方法：消化３-５分钟。１：２。３天内可长满。
预防细胞污染的注意事项：实验进行前，超净台用紫外灯照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超净台台面，并开启超净台风扇运转10min左右再开始实验操作。实验用品用75%酒精擦拭后才能放入超净台内；实验用品用完应移出超净台，以利于气流的流通。实验完成后用75%酒精擦拭超净台台面。每次操作只处理一种细胞；即使不同细胞使用相同的培养基也不要共享同一瓶培养基，避免细胞间的交叉污染。操作时小心取用无菌的物品，避免污染。勿碰触吸管尖头，不小心碰触后应立即更换；不要在打开的容器瓶口正上方操作，容器打开后，倾斜45°操作，操作完成后及时盖上瓶盖。CO2培养箱的清洁是较易被忽视的地方，应1-2个月对培养箱定期进行清洁消毒。先用75%酒精擦拭培养箱内壁、隔板、水盘2-3次，用双蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，后紫外灯照射4h以上。水盘内加入无菌水（应每周更换），待培养箱内温度、湿度、CO2浓度稳定后再放入细胞。定期清洗或更换超净台过滤膜、预滤网。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCI-H358 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
细胞生长特性：贴壁生长
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。
细胞形态特性：上皮样
3396细胞系相关产品：MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞
MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
FT-293细胞系相关产品：B104 [Rat neuroblastoma]细胞、ARH-77细胞、NPA87-1细胞
DR2R 1610细胞系相关产品：GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
COLO-699细胞系相关产品：LI7细胞、CMT-64细胞、BSC-1细胞
NOZ细胞系相关产品：H196细胞、NCI-H-69细胞、THP-1细胞
Panc 3.27细胞系相关产品：J774细胞、P3JHR-1细胞、HS852.T细胞
COLO-829细胞系相关产品：A-10细胞、SW48细胞、CA 46细胞
639-V细胞系相关产品：PA-TU-8988S细胞、CAL27细胞、NCI-H1435细胞
RM1细胞系相关产品：NCIH208细胞、RAMSCs细胞、CFPAC-1细胞
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MeT5A细胞系相关产品：OCIAML5细胞、H2066细胞、Mouse Forestomach Carcinoma细胞
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NCI-H358 Thawing人非小细胞肺癌细胞系
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HNSC细胞系相关产品：HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
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