"RKO Thawing人结肠癌细胞系
细胞背景资料:RKO是一个低分化的结肠癌细胞系。RKO细胞含有野生型P53,但缺乏人甲状腺受体核受体(h-TRbeta1)。RKO细胞的P53蛋白的水平高于RKO-E6细胞。RKO细胞系是RKO-E6和RKO-AS45-1的亲本细胞系。该细胞系在裸鼠中成瘤,且在软琼脂中形成集落。
细胞形态:上皮细胞样
RKO Thawing人结肠癌细胞系
细胞生长:贴壁
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:1)培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等;2)不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-231,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT474就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了;3)对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况;4)冻存细胞复苏后第二天更换一次培养基;5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次;6)养细胞的教训:不能偷懒!细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存;2)发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下;3)传代细胞日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸;4)细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延;5)注意个人卫生。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代的操作步骤注意事项:1)操作前要洗手,进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦试。2)点燃酒精灯,操作在火焰附近进行,耐热物品要经常在火焰上烧灼,金属器械烧灼时间不能太长,以免退火,并冷却后才能夹取组织,吸取过营养液的用具不能再烧灼,以免烧焦形成碳膜。3)操作动作要准确敏捷,但又不能太快,以防空气流动,增加污染机会。4)不能用手触已消毒器皿的工作部分,工作台面上用品要布局合理。5)瓶子开口后要尽量保持45℃斜位。6)吸溶液的吸管等不能混用。贴壁细胞传代的操作步骤:1)吸除培养瓶内旧培养液。2)向瓶内加入胰蛋白酶和EDTA混合液少许,以能覆满瓶底为限。3)置温箱中2-5分钟,当发现细胞质回缩,细胞间隙增大后,立即终止消化。4)吸除消化液,向瓶内注入Hanks液数毫升,轻轻转动培养瓶,把残余消化液冲掉。注意加Hanks液冲洗细胞时,动作要轻,以免把已松动的细胞冲掉流失,如用胰蛋白酶液单独消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液冲洗,直接加入培养液。5)用吸管吸取营养液轻轻反复吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。6)计数板计数后,把细胞悬液分成等份分装入数个培养瓶中,置温箱中培养。悬浮细胞传代的操作步骤:1)吸出细胞培养液,放入离心管中,离心1000rpm5分钟。2)吸掉上清液,加入适量之新鲜培养基,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RKO Thawing人结肠癌细胞系
细胞生长特性:贴壁生长
有关实验室细胞培养基知识普及:经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养;MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度;BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了;aMEM含有附加的基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞;Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养;RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
细胞形态特性:上皮样
rHSC-99细胞系相关产品:624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞
L-929细胞系相关产品:SN12PM6细胞、HANK-1细胞、Hs.27细胞
CCD-841CoN细胞系相关产品:HPF细胞、Tsup-1细胞、hTERT-RPE细胞
RKO-AS45-1细胞系相关产品:HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
HDLM-2细胞系相关产品:MHCC-97细胞、D407细胞、H2106细胞
PA-1细胞系相关产品:Becker细胞、NUGC-2细胞、NCIH1819细胞
MCA-205细胞系相关产品:HEK-293 c18细胞、NCI-SNU-1040细胞、Nb2a细胞
PL-5细胞系相关产品:CCRF-CEM细胞、UACC-893细胞、NTera2 cl.D1细胞
Huh 7.5细胞系相关产品:MiaPaCa2细胞、Lewis Lung Cancer细胞、SUM 190细胞
OCI AML2细胞系相关产品:MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
XWLC-05细胞系相关产品:H1770细胞、V79-1细胞、Hela-mock细胞
Hs 934.T细胞系相关产品:MV4-11细胞、NCIH2030细胞、G 401细胞
MFE296细胞系相关产品:SU-DHL1细胞、CCD-841CoTr细胞、HBL1细胞
OVHM细胞系相关产品:MV-522细胞、NCIH1963细胞、H9c2(2-1)细胞
Human Embryonic Skin细胞系相关产品:BeWo细胞、A2008细胞、H1105细胞
MGH-U1 (EJ)细胞系相关产品:Lewis lung carcinoma line 1细胞、NTC-200细胞、P3J-HR-1细胞
SuperTube细胞系相关产品:H1930细胞、TGW-I-nu细胞、LM6细胞
RKO_AS45细胞系相关产品:NCL-H548细胞、X63-Ag8.653细胞、Saos2细胞
Human Embryo Kidney-2细胞系相关产品:U-251-MG细胞、JROECL 21细胞、C-26细胞
CCC-HSF-1细胞系相关产品:McArdle RH-7777细胞、UMNSAH-DF-1细胞、2780细胞
TR146细胞系相关产品:NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞、T98 G细胞、TF-1细胞
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P3X63细胞系相关产品:GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
4T1.2细胞系相关产品:SHG-44细胞、143 B细胞、Colon26细胞
OVCA-420细胞系相关产品:RIN-m5F细胞、Fetal Rhesus Kidney-4细胞、Pa14C细胞
HCC1937细胞系相关产品:JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
RKO Thawing人结肠癌细胞系
NCI-SNU-423细胞系相关产品:CNE2细胞、JKT-1细胞、PMVEC细胞
LUDLU-1细胞系相关产品:HOP62细胞、SY5Y细胞、NCIH1734细胞
SK.MEL.5细胞系相关产品:Co 115细胞、HCT.116细胞、PLA801C细胞
MLO-Y4细胞系相关产品:HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
MGH-U3 (RN)细胞系相关产品:P3X63Ag8细胞、MCF-10 Attached细胞、BV-173细胞
Ketr-3细胞系相关产品:C42细胞、CCD 966SK细胞、MES-SA/Dx5细胞
SRA 01/04细胞系相关产品:HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞
COLO 320细胞系相关产品:THLE-2细胞、UM-UC-3细胞、NCI-H1876细胞
LLC1细胞系相关产品:JHH-7细胞、MDA-MB435细胞、JROECL33细胞
M-O7e细胞系相关产品:HCE-T细胞、EFO27细胞、NCIH548细胞
Hs 636.T细胞系相关产品:EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞
LTEP-sm细胞系相关产品:NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
SKNEP-1细胞系相关产品:HuLEC-5a细胞、KM-12细胞、786-O细胞
Clone 166细胞系相关产品:CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞系相关产品:H9c2 (2-1)细胞、R1800[RA]细胞、M059K细胞
NCI-H510细胞系相关产品:NCI-H1755细胞、BE(2)M17细胞、BI-Mel细胞
A-375细胞系相关产品:H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
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EBC1细胞系相关产品:Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
HT1376细胞系相关产品:RH30SJ细胞、RL-65细胞、NK62a细胞
SuDHL 1细胞系相关产品:HSKMC细胞、BE2M17细胞、NCIH3255细胞
T-ALL-1细胞系相关产品:NCI-H716细胞、NCIH2342细胞、ReNcell CX细胞
STO细胞系相关产品:NCIH1092细胞、WEHI3B细胞、H-146细胞
HS 1.Tes细胞系相关产品:MCFs细胞、NCI-747细胞、NCI-H-69细胞
NCIH1915细胞系相关产品:SW260细胞、293细胞、MDA 435细胞
NCI-H676细胞系相关产品:SKN-SH细胞、OCILY-3细胞、BC-027细胞
ME180细胞系相关产品:PNT1-a细胞、L78细胞、Fetal Human Colon细胞
RCC10 RGB细胞系相关产品:HCC1187细胞、HEC-1B细胞、Rat Skin 1细胞
MONO-MAC 6细胞系相关产品:H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
MDA-MB-436细胞系相关产品:CCRF/CEM/0细胞、MRASMC细胞、SCC090细胞
QBI-293A细胞系相关产品:G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞
Hs294T细胞系相关产品:MDAPCa-2b细胞、DanG细胞、J-82细胞
NCI-H1568细胞系相关产品:MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
RKO Thawing人结肠癌细胞系
L-5178-Y细胞系相关产品:Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
Hs940.T细胞系相关产品:293 HEK细胞、UMNSAH-DF 1细胞、IGROV细胞
SHSY5Y细胞系相关产品:H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞
BLO 11细胞系相关产品:COR-L105细胞、HEK-2细胞、MKN28细胞
SKRC 39细胞系相关产品:JM1细胞、HOCF细胞、NCI H69细胞
MM-1S细胞系相关产品:C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
TSUpr1细胞系相关产品:SNU761细胞、UCLA NPA871细胞、KG1细胞
MonoMac6细胞系相关产品:DMS53细胞、SUM190细胞、NCI-H810细胞
BL6细胞系相关产品:UO-31细胞、MC-38细胞、NIH:OVCAR-8细胞
T-HEECs细胞系相关产品:QBI-HEK 293A细胞、MV4;11细胞、MDA134细胞
HTR8细胞系相关产品:JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
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