"PLB-985 Suspended人急性髓系白血病细胞系
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:淋巴母细胞样
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较高,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
细胞生长:悬浮
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
PLB-985 Suspended人急性髓系白血病细胞系
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,最后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒:包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品:BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞
SMMC-7721细胞系相关产品:CCD841CoN细胞、NCIH1651细胞、L Wnt-3A细胞
Human Embryo Kidney-2细胞系相关产品:U-251-MG细胞、JROECL 21细胞、C-26细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HONE-1细胞系相关产品:PG-4 S+L-细胞、GM05372E细胞、H1522细胞
HNE-2细胞系相关产品:KOPN-8细胞、CL1.0细胞、Hepa 1-6细胞
H-1755细胞系相关产品:NCIH2342细胞、COLO-680N细胞、OCI-AML-3细胞
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
PLB-985 Suspended人急性髓系白血病细胞系
细胞形态特性:详见细胞说明书
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
BV173细胞系相关产品:RGC-5细胞、RBL.2H3细胞、HS-445细胞
MDA-MB231细胞系相关产品:SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞
NCI-SNU-878细胞系相关产品:VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞
C4-I细胞系相关产品:BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
COLO-205细胞系相关产品:NCI-H1105细胞、COV 434细胞、NMCG-1细胞
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PLB-985 Suspended人急性髓系白血病细胞系
QBI-293A细胞系相关产品:G401细胞、C33-A细胞、Hs729细胞
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PLB-985 Suspended人急性髓系白血病细胞系
C166细胞系相关产品:MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞、NCI-SNU-601细胞、NCI-H847细胞
CAL-39细胞系相关产品:B16 subline B78细胞、EA.hy 926细胞、MC-3T3-E1细胞
SKNO-1细胞系相关产品:HEC-151细胞、IEC-18细胞、C32 [Human melanoma]细胞
Swiss-3T3细胞系相关产品:H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
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FTC133细胞系相关产品:HCC1395细胞、HSAS1细胞、HCA 7细胞
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NCI-SNU-878细胞系相关产品:VERO C 1008细胞、BLO-11细胞、HOPC细胞
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