"Ramos Suspended人B淋巴细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Ramos Suspended人B淋巴细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
BT-474细胞系相关产品：T-47-D细胞、Ly10细胞、BC-028细胞
IPECJ2细胞系相关产品：EOC-20细胞、CAL-12T细胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma细胞
HS5细胞系相关产品：huH 1细胞、PLB985细胞、COLO829细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MUS-M1细胞系相关产品：KE-37细胞、PCI-4M细胞、BNCL2细胞
SKNBE(2c)细胞系相关产品：Melan-a细胞、HCA 7细胞、NCI-H522细胞
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
Ramos Suspended人B淋巴细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
以下对初次培养细胞人员来说，是非常好的开门教程：准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台；配液室的设备：扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)；培养室的设备：液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-８０℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)；必须放在无菌间的设备：离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO２孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、４℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌：定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用３‰来苏尔或者新洁尔灭或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培养箱)灭菌：先用３‰新洁尔灭擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外灯照射；实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各２０-３０分钟；实验后灭菌：用７５％酒精(３‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台；实验人员的无菌准备：肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦净双手。
N-2a细胞系相关产品：SUDHL16细胞、B16-BL6细胞、NCI.H226细胞
Ha Fe细胞系相关产品：HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、HAPI细胞、C-6细胞
Mhh-Call 2细胞系相关产品：GP2-293细胞、RBVEC细胞、J 774A.1细胞
SUM 52PE细胞系相关产品：OKa-C-1细胞、HT 1376细胞、NCI-H2198细胞
MRC-V细胞系相关产品：Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
D10.G4.1细胞系相关产品：CHP-126细胞、QGY-7703细胞、MDA-MB157细胞
CAL 33细胞系相关产品：HO1-N1细胞、HOP 92细胞、KM932细胞
BMDC细胞系相关产品：KGN细胞、AHH-1细胞、MDA MB 231细胞
Hs683细胞系相关产品：293-F细胞、LK 2细胞、Line 697细胞
SW-1271细胞系相关产品：HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
NCI-H1876细胞系相关产品：H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
SNU-761细胞系相关产品：HM1900细胞、MES 13细胞、769P细胞
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Swiss-3T3细胞系相关产品：H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
SW-579细胞系相关产品：OCI/AML3细胞、M-G63细胞、MAVER细胞
RCS细胞系相关产品：A375细胞、GM17219细胞、PANC3.27细胞
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TE-10细胞系相关产品：NGEC细胞、SK-N-BE(2)-C细胞、SUPB-15细胞
ATC241细胞系相关产品：HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
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M14细胞系相关产品：SK MEL-28细胞、T1-73细胞、Douglas Foster-1细胞
FAK+/+细胞系相关产品：NCI-H1869细胞、Melanoma 14细胞、RD-ES细胞
CCRF CEM细胞系相关产品：ARO81-1细胞、MKN 7细胞、2PK-3细胞
HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞系相关产品：Y3M细胞、HPAF2细胞、MLM细胞
LTEP-sm细胞系相关产品：NCI-H146细胞、293/EBNA细胞、HFL-I细胞
H2347细胞系相关产品：ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞
U-87MG细胞系相关产品：D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
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SW579细胞系相关产品：Human ErythroLeukemia细胞、HS766T细胞、Ej138细胞
HBL1细胞系相关产品：U2-OS细胞、VSMC细胞、D324细胞
MNNGHOS细胞系相关产品：BIC1细胞、V 79细胞、H28细胞
H35 Reuber细胞系相关产品：CV-1 in Origin Simian-1细胞、RN细胞、MMAc-SF细胞
DHL-16细胞系相关产品：MyLa2059细胞、NS1-Ag4细胞、ARO81-1细胞
EAhy926细胞系相关产品：Hs.27细胞、C-33 A细胞、NCI-322细胞
PanC1细胞系相关产品：TB1 Lu细胞、OLN-93细胞、M-20细胞
NCI-H2227细胞系相关产品：H-2286细胞、HC11细胞、FAT细胞
EFM192细胞系相关产品：SUDHL8细胞、Hs 578.Bst细胞、G-292, clone A141B1细胞
LN382细胞系相关产品：526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
NCI-H1435细胞系相关产品：Rat-1细胞、MHCC97L细胞、NCI-H1668细胞
OVCAR8细胞系相关产品：RCC4细胞、SKRC-39细胞、Panc4.03细胞
BAC1.2F5细胞系相关产品：LAD-2细胞、HBVP细胞、VB细胞
HCC1833细胞系相关产品：HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞
BT-20细胞系相关产品：Ramos (RA 1)细胞、H-1694细胞、MC-4细胞
WEHI-279细胞系相关产品：P31FUJ细胞、LICCF细胞、PC14细胞
BGC823细胞系相关产品：KM12SM细胞、Hep G2/C3A细胞、MLMA细胞
KBM-7/Hap8细胞系相关产品：HEP3B2细胞、GCT0404细胞、4T1-A细胞
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HEK293S细胞系相关产品：Michigan Cancer Foundation-12A细胞、SUM149PT细胞、LNCaP.FGC细胞
SBC3细胞系相关产品：L-M[TK-]细胞、RPE1细胞、WERI Rb-1细胞
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BNL.1ME A.7R.1细胞系相关产品：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
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TSU-Pr1细胞系相关产品：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
SU8686细胞系相关产品：BRL3A细胞、PANC-28细胞、LuCL4细胞
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SUM102细胞系相关产品：CPAE细胞、GS9L细胞、H2.35细胞
FUOV1细胞系相关产品：COLO320 DM细胞、MonoMac 6细胞、MNNGHOS细胞
COS7细胞系相关产品：BALB/3T3 cl. A31细胞、HR1K细胞、Vx2细胞
HEK;293细胞系相关产品：HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞
SNU-182细胞系相关产品：B-104细胞、Hep 3B细胞、MDA-MB-175细胞
DU_145细胞系相关产品：ETCC-007细胞、FT-293细胞、RCC 7860细胞
H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、SW-1417细胞、HNE2细胞
MDA-MB-231细胞系相关产品：KYSE70细胞、N-9细胞、COLO-684细胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞系相关产品：Ketr-3细胞、OVCAR-433细胞、IHH4细胞
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