TE15 Suspended小鼠B淋巴细胞系

"TE15 Suspended小鼠B淋巴细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
TE15 Suspended小鼠B淋巴细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
SK_N_BE2C细胞系相关产品：MSTO-211 H细胞、NCI-H865细胞、NCIH2126细胞
MHCC97-H细胞系相关产品：Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、RIN m5F细胞、MC3T3-E1(C4)细胞
H2122细胞系相关产品：HTR-8/SV-neo细胞、H2023细胞、RMa-bm细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
EL4细胞系相关产品：MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞
RPMI 8402细胞系相关产品：Hs-611-T细胞、AML-2细胞、HT-1197细胞
M4e细胞系相关产品：GBCSD细胞、JeKo 1细胞、H676B细胞
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
TE15 Suspended小鼠B淋巴细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
几种实验室细胞培养基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？与CO２一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定；２)酸钠的作用是什么？酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为５０mM，-２０℃保存，培养基中的终浓度为１mM；３)加入HEPES有何好处？培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH７.２-７.６条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为１M，常温保存。培养基中的终浓度为２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培养基中；４)红的作用是什么？红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；５)谷酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定，应置-２０℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基４度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分装使用，-２０℃保存。使用时，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培养基中，使其终浓度为２mM培养基。
A 375细胞系相关产品：Hs 746T细胞、MCF-7/ADR细胞、451Lu细胞
8505C细胞系相关产品：BGC823细胞、NCI-H1930细胞、Danio rerio Gill细胞
CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
2780CP细胞系相关产品：KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
HTR-8细胞系相关产品：NCI-H2330细胞、MDA-157细胞、V 79细胞
AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞
CAL51细胞系相关产品：MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞
SW-480细胞系相关产品：NCI-H78细胞、MSB-1细胞、BALL-1细胞
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TE15 Suspended小鼠B淋巴细胞系
LN382细胞系相关产品：526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
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M14-MEL细胞系相关产品：MDA-MB 361细胞、SW982细胞、CCD-966SK细胞
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293 F细胞系相关产品：Huh-7.5.1细胞、RS4-11细胞、U87细胞
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293A细胞系相关产品：WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
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BJAB-1细胞系相关产品：SF767细胞、SkMel31细胞、Hs739T细胞
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HEC-251细胞系相关产品：GM17346细胞、SV40-MES13细胞、MDA-MB361细胞
NL-20细胞系相关产品：RERF-LC-MS细胞、9L细胞、Hs832.Tc细胞
H295R-S1细胞系相关产品：AU565细胞、AN3-CA细胞、HEK-2细胞
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P3X63Ag8-6-5-3细胞系相关产品：SUM102PT细胞、RINm5F细胞、RT112细胞
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JAR细胞系相关产品：SkChA-1细胞、BL1339细胞、HEL-92.1.7细胞
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Cattle chondrocytes细胞系相关产品：L5178YR细胞、S37细胞、P3JHR1细胞
MyLa 2059细胞系相关产品：B16 melanoma细胞、KYSE 520细胞、mRTEC细胞
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C2C12细胞系相关产品：OC 316细胞、COLO-HSR细胞、RPE D407细胞
Cattle chondrocytes细胞系相关产品：L5178YR细胞、S37细胞、P3JHR1细胞
SV40-MES13细胞系相关产品：KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
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UMNSAH-DF 1细胞系相关产品：EOL1细胞、SK.MEL.2细胞、H2052_MM细胞
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CEM-C7细胞系相关产品：CAL120细胞、7860细胞、MESSA细胞
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