JVM-3 Suspended人慢性髓白血病细胞系

"JVM-3 Suspended人慢性髓白血病细胞系
细胞背景资料：慢性髓白血病；女性
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
JVM-3 Suspended人慢性髓白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
OV90细胞系相关产品：McG-1细胞、Hs 821.T细胞、PANC-03-27细胞
TOV-21G细胞系相关产品：H22-H8D8细胞、H865细胞、SNU-251细胞
TMD8细胞系相关产品：UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
NCIH64细胞系相关产品：Colo-201细胞、HL-1细胞、HOP62细胞
U-266细胞系相关产品：EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
COR-L279细胞系相关产品：NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞
细胞生长特性：悬浮
JVM-3 Suspended人慢性髓白血病细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞培养温度：维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为３６.５℃±０.５℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强，温度上升不超过３９℃时，细胞代谢与温度成正比；人体细胞在３９-４０℃１小时，即能受到一定损伤，但仍有可能恢复；在４０-４１℃１小时，细胞会普遍受到损伤，仅小半数有可能恢复；４１-４２℃１小时，细胞受到严重损伤，大部分细胞死亡，个别细胞仍有恢复可能；当温度在４３℃以上１小时，细胞全部死亡。相反，温度不低于０℃时，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用；把细胞放入２５－３５℃时，细胞仍能生存和生长，但速度减慢；放在４℃数小时后，再回到３７℃培养，细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时，细胞可因胞质结冰受损而死亡。但是，如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油)，可在深低温下如－８０℃或－１９６℃(液氮)长期保存。
PLA801D细胞系相关产品：P388-D1细胞、LU-65M细胞、LTEP-a-2细胞
SCI1细胞系相关产品：HC11 Mammary Epithelium细胞、SK-NSH细胞、PIGI细胞
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JVM-3 Suspended人慢性髓白血病细胞系
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SW1417细胞系相关产品：B-16细胞、Kuramochi细胞、L细胞
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