SC Suspended人急性单核细胞白血病细胞系

"SC Suspended人急性单核细胞白血病细胞系
细胞背景资料：急性单核细胞白血病；男性
细胞形态：淋巴母细胞样
传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记好的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SC Suspended人急性单核细胞白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
HOP92细胞系相关产品：MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞
OAW42细胞系相关产品：EAC细胞、M210B4细胞、MDA-MB-175-VII细胞
CWR22-R1细胞系相关产品：Bat lung细胞、MCF-7B细胞、LS-411细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SW 900细胞系相关产品：H295R-S1细胞、H1563细胞、Tb1.Lu细胞
686LN-M4e细胞系相关产品：HSC-2细胞、Dx5细胞、786-O RCC细胞
BHP-10细胞系相关产品：SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞
细胞生长特性：悬浮
SC Suspended人急性单核细胞白血病细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
以下对初次培养细胞人员来说，是非常好的开门教程：准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台；配液室的设备：扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)；培养室的设备：液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-８０℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)；必须放在无菌间的设备：离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO２孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、４℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌：定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用３‰来苏尔或者新洁尔灭或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培养箱)灭菌：先用３‰新洁尔灭擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外灯照射；实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各２０-３０分钟；实验后灭菌：用７５％酒精(３‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台；实验人员的无菌准备：肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦净双手。
BCP-1细胞系相关产品：P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞系相关产品：Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞
Helacyton gartleri细胞系相关产品：HCGC细胞、VP229细胞、RBL.2H3细胞
HFT 8810细胞系相关产品：CAL-85-1细胞、MPC 11细胞、HEC-151细胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞系相关产品：QBC(939)细胞、JB 6细胞、HIT T15细胞
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SC Suspended人急性单核细胞白血病细胞系
SKMEL2细胞系相关产品：Tca-83细胞、SW1353细胞、GM04679细胞
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