TK-1 Suspended小鼠T淋巴瘤细胞系

"TK-1 Suspended小鼠T淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：淋巴瘤；AKR/Cum
细胞形态：淋巴母细胞样
传代24h-48h处于对数期的细胞，在冻存前24h换液；按照常规方法消化，离心，收集细胞沉淀；用血清重悬细胞沉淀，用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数；配制细胞冻存液，将冻存液加到细胞液中，吹打混匀，控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml；将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记好的冻存管中，旋紧管盖；将冻存管放入程序冻存盒中，冻存盒立即移至-80°C冰箱中，过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳，会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存，冻存前一天细胞进行换液；消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率；冻存细胞时为按照温度梯度进行操作，会严重影响细胞活率。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
TK-1 Suspended小鼠T淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
HOS (TE85)细胞系相关产品：H4-IIE-C3细胞、HT-1080细胞、PANC-08-13细胞
NCIH82细胞系相关产品：HT55细胞、NTera 2细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞
HC11细胞系相关产品：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
ROS1728细胞系相关产品：T_T_细胞、SW962细胞、SW 954细胞
PL12细胞系相关产品：16HBE140细胞、PA-TU-8988S细胞、HIBEpiC细胞
CCK-81细胞系相关产品：H6c7细胞、MA-c细胞、Mouse Colon 38细胞
细胞生长特性：悬浮
TK-1 Suspended小鼠T淋巴瘤细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
以下对初次培养细胞人员来说，是非常好的开门教程：准备室的设备：单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台；配液室的设备：扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)；培养室的设备：液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-８０℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)；必须放在无菌间的设备：离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO２孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、４℃冰箱(放置serum和培养用液)。无菌室的灭菌：定期打扫无菌室：每周打扫一次，先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等，然后用３‰来苏尔或者新洁尔灭或者０.５％擦拭；CO２孵箱(培养箱)灭菌：先用３‰新洁尔灭擦拭，然后用７５％酒精擦拭或者０.５％，再用紫外灯照射；实验前灭菌：打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各２０-３０分钟；实验后灭菌：用７５％酒精(３‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台；实验人员的无菌准备：肥皂洗手、穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋、用７５％酒精棉球擦净双手。
SNU520细胞系相关产品：H2170细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6细胞、MPASMC细胞
MDCKII-WT细胞系相关产品：MMAc-SF细胞、HRGEC细胞、JVM2细胞
NB1RGB细胞系相关产品：SK-MEL-2-LUC细胞、H-1819细胞、SHIN-3细胞
VP229细胞系相关产品：SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞
YES2细胞系相关产品：MDAMB175细胞、WM2664细胞、H-295R细胞
LM3细胞系相关产品：HCC1500细胞、UCLA-SO-M14细胞、H-35细胞
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TK-1 Suspended小鼠T淋巴瘤细胞系
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