WILL-2 Suspended人弥漫大B淋巴瘤细胞系

"WILL-2 Suspended人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞背景资料：弥漫大B淋巴瘤；女性
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
WILL-2 Suspended人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
HRIF细胞系相关产品：CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
SW 403细胞系相关产品：NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
KP-2细胞系相关产品：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
EA.Hy926细胞系相关产品：NCI-H1770细胞、SCCVII细胞、P36细胞
Sup T-1细胞系相关产品：NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
SK-MEL28细胞系相关产品：Hs 606.T细胞、Hs863T细胞、FRTL-5 Cl 2细胞
细胞生长特性：悬浮
WILL-2 Suspended人弥漫大B淋巴瘤细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
IB-RS-2细胞系相关产品：CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
Balb/3T3-4-Cl31细胞系相关产品：PL-5细胞、Tb1.Lu细胞、CHG5细胞
HS578T细胞系相关产品：MDA-468细胞、EAhy 926细胞、LA-N-6(OAN)细胞
RPMI2650细胞系相关产品：H747细胞、HEC-1-A细胞、HS688AT细胞
HL-60细胞系相关产品：Panc-813细胞、CX-1细胞、KNS62细胞
AHH-1细胞系相关产品：Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
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Mv1Lu细胞系相关产品：P3X63-Ag8.653细胞、KU-812细胞、BIU-87细胞
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SNU-C1细胞系相关产品：NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
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Hi-5细胞系相关产品：HCC1438细胞、SNU-C2A细胞、As-PC1细胞
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P3-X63-Ag8-6-5-3细胞系相关产品：JJN-3细胞、CT26细胞、HEK293-EBNA1细胞
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C2BBe1细胞系相关产品：PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
NCTC929细胞系相关产品：OAW-42细胞、GM07404细胞、SK-N-BE(1)n细胞
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Clone 166细胞系相关产品：CCD-33Co细胞、COLO 320F细胞、SV40 MES 13细胞
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