AHH-1 Suspended人外周血B淋巴细胞系

"AHH-1 Suspended人外周血B淋巴细胞系
细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转化
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
AHH-1 Suspended人外周血B淋巴细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
HM细胞系相关产品：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞
KMM1细胞系相关产品：RMS1598细胞、SACCLM细胞、Hs-578T细胞
UMUC14细胞系相关产品：Mono Mac 1细胞、CT26-clone 25细胞、MNNG-HOS细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
BT-B细胞系相关产品：HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
BT-B细胞系相关产品：HET1A细胞、Eph4 1424细胞、G-292 clone A141B1细胞
6T-CEM细胞系相关产品：SNU-449细胞、MALME 3M细胞、Cattle chondrocytes细胞
细胞生长特性：悬浮
AHH-1 Suspended人外周血B淋巴细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代细胞培养注意事项：１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤：瘤细胞悬液接种１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml/部位，＞１０(６)细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种：将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下：１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１×１０(６)腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７-１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
HCAEC细胞系相关产品：NCIH522细胞、H.Ep.-2细胞、PLC细胞
BMU-S1细胞系相关产品：Caco 2细胞、NCI-H1781细胞、SW 982细胞
HFSF细胞系相关产品：526-mel细胞、C4-I细胞、TE15细胞
H2342细胞系相关产品：HGE细胞、3AA细胞、MC 3T3-E1细胞
RTMC细胞系相关产品：PL 45细胞、J-111细胞、KMH-2细胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞系相关产品：PC 12细胞、NCI-H810细胞、Hs 578.T细胞
IM-9细胞系相关产品：SW948细胞、CPA47细胞、NCL-H548细胞
F-36P细胞系相关产品：Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
NPA-87细胞系相关产品：RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
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BHT-101细胞系相关产品：MSTO211H细胞、DV-90细胞、JeKo 1细胞
RH30SJ细胞系相关产品：End1/E6E7细胞、TCC-SUP细胞、HT22细胞
118 MG细胞系相关产品：HNE3细胞、LK-2细胞、B16/F10细胞
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NCTC-929细胞系相关产品：SW1417细胞、HGSMC细胞、HO8910PM细胞
CWR22-Rv1细胞系相关产品：P3-X63-Ag8-6-5-3细胞、Hs822T细胞、Panc203细胞
MS1细胞系相关产品：H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
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C22 (Clara)细胞系相关产品：EFM-192C细胞、HCC1833细胞、NCI/ADRRES细胞
MAVER1细胞系相关产品：SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞
MDCC MSB1细胞系相关产品：MLA-144细胞、DoTc2-4510细胞、Porcine Kidney-13细胞
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Kasumi-6细胞系相关产品：WEHI-3B细胞、HS578细胞、OVCA 420细胞
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T_T_细胞系相关产品：BN-CL2细胞、NCIH82细胞、LP1细胞
MDCK-2细胞系相关产品：Ku812F细胞、HS578T细胞、Swiss/3T3细胞
CHG5细胞系相关产品：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞
BEL 7404细胞系相关产品：Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
H920细胞系相关产品：HG2855细胞、SPCA-1细胞、MA-c细胞
Tu686细胞系相关产品：UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
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OVCA 432细胞系相关产品：YES2细胞、NT-2细胞、HOC细胞
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞
HuCCT-1细胞系相关产品：T-98细胞、AR-42J细胞、RPMI1788细胞
GM03190细胞系相关产品：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞
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JROECL19细胞系相关产品：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞
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