P388D1 Suspended小鼠淋巴样瘤细胞系

"P388D1 Suspended小鼠淋巴样瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良好，当补液时，需避免反复吹打。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
P388D1 Suspended小鼠淋巴样瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制好的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；６)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
HT 1197细胞系相关产品：RFL 6细胞、HEK293-FT细胞、IALM细胞
NCI-H1668细胞系相关产品：NPA细胞、Michigan Cancer Foundation-7细胞、HOS TE85细胞
LC-1-sq细胞系相关产品：RH35细胞、P30OHK细胞、Panc_03_27细胞
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
HeLa229细胞系相关产品：RT-BM-1细胞、CA-46细胞、OCI-Ly 7细胞
TK.10细胞系相关产品：HeLa/DDP细胞、ECV-304细胞、TOV112细胞
NuTu-19细胞系相关产品：SUP-B15细胞、WI 38细胞、Tb 1-Lu细胞
细胞生长特性：悬浮
P388D1 Suspended小鼠淋巴样瘤细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
传代细胞培养注意事项：１)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；２)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。体内细胞培养及其操作步骤：瘤细胞悬液接种１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０(７)～１０(８)/ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml/部位，＞１０(６)细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。腹水瘤的建立与腹水瘤的接种：将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下：１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１×１０(６)腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７-１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３-５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。
MuM-2C细胞系相关产品：Hs688(A)T细胞、Calu6细胞、OV2008细胞
Super Tube细胞系相关产品：SCCVII/St细胞、COR-L23/P细胞、TE5细胞
C518细胞系相关产品：MES-SA/Dx-5细胞、SV40 MES 13细胞、HLE-SRA-01/04细胞
Epithelioma Papulosum Cyprini细胞系相关产品：EOMA细胞、McCoy B细胞、MES-SA Dx5细胞
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PLB 985细胞系相关产品：SHI1细胞、OEC33细胞、FRH-0201细胞
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Roswell Park Memorial Institute 6666细胞系相关产品：BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞
P388D1 Suspended小鼠淋巴样瘤细胞系
TYK-nu细胞系相关产品：SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
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H-1092细胞系相关产品：Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
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J.E6-1细胞系相关产品：JROECL 33细胞、SU86_86细胞、18G3.cl 1细胞
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ZR75-30细胞系相关产品：NCI-H1522细胞、SCC VII细胞、HEC1-B细胞
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COLO 738细胞系相关产品：T 98 G细胞、Hs 688(A).T细胞、P560细胞
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Roswell Park Memorial Institute 7951细胞系相关产品：NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞
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RH-30细胞系相关产品：IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞
IGROV 1细胞系相关产品：HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
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Roswell Park Memorial Institute 7666细胞系相关产品：G-Olig2细胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1细胞、Wistar Institute-38细胞
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