6T-CEM Suspended人T细胞白血病细胞系

"6T-CEM Suspended人T细胞白血病细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过高时，易造成培养基中细胞碎片增多，黑渣子增多，常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化，对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化，细胞密度过高超过80%时，采用分步消化法。胰酶储存在-20°C，解冻在4°C进行，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于-20°C，避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低，并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤：消化过度细胞碎片增多，黑渣子增多，细胞会成片脱落，严重影响细胞活性，并有部分细胞漂浮，随弃去的胰酶流失；消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下，反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同，胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度，是否含EDTA，胰酶的储存时间，胰酶的储存温度，是否反复冻融，消化加入的胰酶体积，消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞，建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间，可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆，记录消化时间，下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
6T-CEM Suspended人T细胞白血病细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释５０倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。
AMO-1细胞系相关产品：Th17细胞、SSP-25细胞、VP303细胞
G361-mel细胞系相关产品：KBM-5细胞、TK-1细胞、REC 1细胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞系相关产品：HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
SNU-761细胞系相关产品：HM1900细胞、MES 13细胞、769P细胞
TOV-112D细胞系相关产品：ECGI10细胞、HEK293-H细胞、Hs68细胞
UO-31细胞系相关产品：Human Kidney-2细胞、PC2细胞、MC-3T3细胞
细胞生长特性：贴壁生长
6T-CEM Suspended人T细胞白血病细胞系
细胞形态特性：详见细胞说明书
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下：１)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子，觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑？知道为什么吗？烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候，炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后，空气变冷，压力骤降，培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳，释放出来。培养基中的碳酸少了，当然会变碱。如果不烧瓶口的话，你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱，因为室温还是比冰箱内的温度高)，其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下，你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话，这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌，除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底，超净台内根本就不点酒精灯；２)不要频繁看细胞。对于初学者而言，养细胞就像养孩子一样，有空就要去看看。细胞越是养不好，就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处，特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后，密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围，形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞，培养瓶这么一晃，把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞，细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管，细胞疯长；３)不要怕消化。在传代的时候，初学者往往生怕细胞消化过度，早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯，吹得满瓶子都是气泡。在我看来，用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候，３７度消化过夜，细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有，动作要轻柔，尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大，对细胞的伤害也是很大的。
NCI.H522细胞系相关产品：PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞
NCI-SNU-398细胞系相关产品：SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
SNU16细胞系相关产品：CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞
MPP89细胞系相关产品：HNEpC细胞、MBdSMC细胞、KS-SLK细胞
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U87MG细胞系相关产品：OE-19细胞、EFM-192C细胞、BHK 21细胞
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A-9细胞系相关产品：LAD 2细胞、IOSE 29细胞、ETCC-007细胞
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NR-8383细胞系相关产品：SU4细胞、NK92细胞、HFL 1细胞
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COR-L279细胞系相关产品：NS1细胞、Caov-4细胞、HCC0015细胞
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JJN-3细胞系相关产品：HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
ChaGo-K1细胞系相关产品：U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞
CALU1细胞系相关产品：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞
SNU423细胞系相关产品：OCILY-10细胞、GOTO细胞、EFM192A细胞
C 643细胞系相关产品：NPC-TW 01细胞、HTh74细胞、MDA-453细胞
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Balb/c3T3细胞系相关产品：IPLB-SF 21AE细胞、DLM8细胞、BL6细胞
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H-676细胞系相关产品：X63-Ag 8.6.5.3细胞、Hs742T细胞、H1238细胞
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
NCI-SNU-878细胞系相关产品：VERO C 1008细胞、CCRF-CEM C7细胞、COR L279细胞
P560细胞系相关产品：HuT-78细胞、H889细胞、OVCAR-10细胞
RBE细胞系相关产品：IGROV-1细胞、HEK 293 c18细胞、NS1-Ag4/1细胞
H-358细胞系相关产品：PC-3M细胞、H-2126细胞、MG-63细胞
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HEK-293-F细胞系相关产品：201T细胞、NCI-H1048细胞、STO细胞
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