MAVER-1 Suspended人淋巴细胞瘤细胞系

"MAVER-1 Suspended人淋巴细胞瘤细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很高的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制好细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较高，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。
细胞生长：悬浮
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
MAVER-1 Suspended人淋巴细胞瘤细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在高处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，最后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。高压消毒：包装好的器皿装入高压锅内盖好盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。高压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
RPMI 7951细胞系相关产品：X63.Ag8.653细胞、BEAS 2B细胞、SU-DHL-4细胞
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细胞传代方法：１：３-１：５传代；２-３天换液１次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
MDA-MB-330细胞系相关产品：U-226AR1细胞、SNU-216细胞、HLE B-3细胞
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细胞生长特性：悬浮生长
MAVER-1 Suspended人淋巴细胞瘤细胞系
细胞形态特性：淋巴母细胞
几种实验室细胞培养基成分的作用：１)NaHCO３的作用是什么？与CO２一起形成缓冲系统，保持培养基PH值稳定；２)酸钠的作用是什么？酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源，尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源，但是如果没有葡萄糖的话，细胞也可以代谢酸钠。酸钠的贮存液浓度一般为５０mM，-２０℃保存，培养基中的终浓度为１mM；３)加入HEPES有何好处？培养基中最常用的Buffer system是碳酸盐，它可提供营养，但却在生理PH值条件下会降低缓冲能力。而HEPES是一种很强的Buffer，加入HEPES能使细胞培养基在PH７.２-７.６条件下缓冲能力增强。Hepes的贮存液浓度一般为１M，常温保存。培养基中的终浓度为２５mM，即５ml １M的Hepes加入到２００ml完全培养基中；４)红的作用是什么？红在培养基中被用来作为PH值指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色；５)谷酰胺的作用是什么？几乎所有的细胞对谷酰胺都有胶高的要求。谷酰胺脱掉基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定，应置-２０℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基４度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷酰胺。试验操作中常配制高浓度(１００倍)的谷酰胺溶液(１ml/支)，分装使用，-２０℃保存。使用时，每支１ml的谷酰胺加入到９９ml完全培养基中，使其终浓度为２mM培养基。
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